刘贤华
- 作品数：60 被引量：198H指数：9
- 供职机构：武警总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学电子电信更多>>
- 烧伤后小鼠小肠潘氏结 RNA 的快速制备
- 1999年
- 目的：本实验拟建立一种更经济、实用、简便又快速的 Ｒ Ｎ Ａ 制备方法。方法：利用改进后的方法及试剂盒提取烧伤后小鼠小肠潘氏结组织中的 Ｒ Ｎ Ａ，紫外分光光度计测定 Ｄλ值、电泳、然后进行 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ。结果：①紫外分光光度计测定所提 Ｒ Ｎ Ａ Ｄ２６０／ Ｄ２８０比值均在２．０ 左右。每１ ｇ 小鼠小肠潘氏结组织 Ｒ Ｎ Ａ的平均产量为３００～５００ μｇ。② Ｒ Ｎ Ａ 甲醛变性琼脂糖凝胶电泳显示所提总 Ｒ Ｎ Ａ 完整性好。③ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ获得成功。结论：此快速制备 Ｒ Ｎ Ａ 的方法纯度和产量都较高，而且经济、简便又快速，我们已常规应用到其它组织细胞 Ｒ Ｎ Ａ 的制备中。
- 刘贤华胡川闽白晓东
- 关键词：烧伤小鼠DNA
- C端带Myc和多聚组氨酸双重标签基因的改构体J-HNP-1在COS-7细胞的转染表达被引量：1
- 2006年
- 目的改构α-防御素-1(HNP-1)使其成为一端带J链的改构体J-HNP-1分子,并探索建立能有效表达和分泌J-HNP-1,其表达产物又易于被检测和分离纯化的哺乳动物细胞表达系统。方法利用重组PCR技术,使HNP-1一端带上J链;将J-HNP-1 DNA片段插入哺乳动物细胞表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-HisC中,构建出C端带Myc和6×His的rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1;将此重组真核表达载体导入COS-7细胞,分别从mRNA和蛋白质水平分析J-HNP-1的表达情况,并同步检测细胞可溶性蛋白及培养上清的抗菌活性。结果采用RT-PCR法从被转染的细胞中扩增出1条约786bp的片段,其大小与预测相符;采用Western印迹法,用抗His抗体检测到细胞可溶性蛋白及培养上清在相对分子质量约24×103处有强反应条带显示;细胞可溶性蛋白及培养上清的抗菌活性检测显示,经rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1转染的COS-7细胞的可溶性蛋白和培养上清均有明显的抗菌活性。结论α-防御素-1(HNP-1)被成功改构成杀菌肽J-HNP-1;所建立的J-HNP-1哺乳动物细胞表达载体系统能有效表达和分泌活性J-HNP-1。
- 白晓东刘贤华仝青英张韶峰
- 关键词：抗菌肽
- 早期切痂对重度放烧复合伤大鼠的影响
- 2002年
- 目的 探讨早期切痂对放烧复合伤大鼠存活以及创面愈合的影响 ,为临床治疗提供依据。方法 60 Coγ射线全身照射 5Gy ,而后用 5kW溴钨灯光辐射致 10 %Ⅲ度烧伤。伤后给予抗休克、抗感染 ,伤后 2 4h进行早期切痂缝合或保痂等治疗 ,观察 6 0d存活率、创面愈合时间以及体重变化等。结果 早期切痂缝合组 6 0d存活率达 78%,创面无感染、愈合好 ,体重恢复快 ;明显高于不切痂组的 40 %(P <0 0 5 ) ,更高于切痂不缝合组的 15 %(P <0 0 1)和对照组的 10 %(P <0 0 1)。结论 早期切痂缝合术在本伤情下是有效的 ,也是可行的 ,手术时机以伤后 2 4～ 48h为宜。
- 冉新泽刘贤华王东海何庆嘉程天民林远
- 关键词：放烧复合伤早期切痂创面愈合动物实验抗休克抗感染
- 一种新原位分子杂交技术被引量：1
- 2000年
- 刘贤华白晓东胡川闽
- 关键词：分子杂交地高辛标记CDNA探针原位分子杂交
- 烧伤后肠系膜淋巴结GP130基因表达与细胞凋亡
- 2000年
- 目的 观察烧伤后肠系膜淋巴结GP130基因表达与细胞凋亡变化的时相关系。方法 BALB c种小鼠 60只 ,分为致伤组、正常对照组。致伤组动物予以 2 0 %TBSAⅢ度烧伤。于伤后 1、2、3d活杀致伤组 ,并活杀对照组。取肠系膜淋巴结 :ELISA检测IL 6水平 ;提取RNA ,RT PCR检测GP130基因表达变化 ;采用TUNNEL法对细胞凋亡进行观察。结果 在伤后 3d以内IL 6含量明显升高 ;GP130基因表达、细胞凋亡在伤后 1d明显增加。结论 在烧伤后早期 ,肠系膜淋巴结IL 6、GP130表达与细胞凋亡均增加。
- 白晓东刘贤华肖光夏
- 关键词：烧伤GP130细胞凋亡肠系膜淋巴结
- HA1077对骨髓间质干细胞促愈作用的影响
- 2009年
- 目的探讨HA1077对骨髓间质干细胞（bone mesenchymal stemcells，BMSCs）促愈作用的影响及其机制。方法（1）体外实验：体外分离培养大鼠BMSCs，随机分为正常对照组、诱导组和HA1077组。对照组加入DMEM完全培养液；诱导组：70％DMEM完全培养液＋30％大鼠成纤维细胞上清液＋含8μg/L表皮细胞生长因子（EGF）的培养液；HA1077组：在诱导组培养液基础上加入终浓度为10μmol／L的HA1077。取培养7d的细胞，流式细胞检测CK19表达，细胞周期和核增殖抗原（PCNA）表达。（2）在体实验：按前述方法制备兔BMSCs。取新西兰大耳白兔8只，在背部制备6个直径为3cm的圆形皮肤缺损（每侧各3个），深至皮下。创面随机分为空白对照组（A组）：创面应用等渗盐水；EGF对照组（B组）：创面外用EGF，50 U／cm^2；BMSCs治疗组（C组）：除用EGF外，创面注射BMSCs细胞悬液1ml，2×10^6／ml；BMSCs＋HA1077治疗组（D组）：除应用c组措施外，创面注射0．5mlHA1077，浓度为20μmol／L。伤后3，7，14d计算愈合指数（WCD。结果（1）体外实验：诱导组CK19的阳性率为（11．13±2．14）％，HA1077组为（40．31±0．82）％，明显高于诱导组（P〈0．01）。HA1077组PCNA阳性率明显高于诱导组，细胞周期分析显示S期细胞数量最多。（2）在体实验：D组伤后14d的创面愈合指数为86．20±1．92，效果明显好于B组、C组和对照组。结论HA1077可以促进BMSCs细胞表达PCNA进入S期，进而分化表达CK19；在体表联合应用HA1077和BMSCs，可以明显促进创面愈合。
- 白晓东刘贤华柳晓杰王佳哲付小兵
- 关键词：间质干细胞细胞分化创面愈合
- 严重烧伤后特异抗白念菌IgA下降与白念菌粘附定植的关系
- 2000年
- 目的对烧伤后早期肠内特异抗白念菌IgA变化及其白念菌粘附肠粘膜的关系进行观察。方法利用无特殊病原菌(SPF)的小鼠定植白念菌模型 ,致以20%TBSAⅢ度烧伤。ELISA法检测伤前及伤后1、2、3d的肠内特异抗白念菌IgA水平 ;同时选择培养并计数盲肠及小肠粘膜表面粘附的白念菌。结果伤前组特异IgA为(69.37±25.37)U/mg,伤后1d为(48.84±26.47)U/mg,2d明显降为(38.22±23.57)U/mg,3d为(52.64±37.35)U/mg;肠内白念菌总量伤后第1天最高 ;伤后第2、3天粘附菌量明显升高。结论特异IgA下降与肠粘膜表面粘附菌量增多密切相关。
- 白晓东刘贤华肖光夏
- 关键词：烧伤IGA白色念珠菌细菌定植
- 分期手术治疗难愈性创面效果评价被引量：1
- 2009年
- 目的观察和评价采用先行创面清创、全封闭负压吸引装置安置术后，再行肌皮瓣、筋膜皮瓣或全厚皮移植修复难愈性创面等分期手术的治疗效果。方法选择22例各种难愈性创面病例，随机分成2组，进行比较分析。结果两组22例均痊愈出院，治疗组创面修复手术均一期愈合，对照组延期愈合6例。治疗组创周红肿消退时间、平均住院天数、住院花费均少于对照组。结论采用创面清创、全封闭负压吸引装置安置术后行肌皮瓣、筋膜皮瓣或全厚皮移植修复难愈性创面，分期手术缩短住院时间，减轻患者的经济负担，提高了手术的一期愈合率。
- 柳晓杰刘贤华白晓东王佳哲兰久利
- 关键词：分期手术难愈性创面负压吸引肌皮瓣
- 烧伤后肠粘膜免疫组织细胞增殖分化的研究
- 2003年
- 目的:对烧伤后肠粘膜免疫组织潘氏结内淋巴细胞(PPL)膜 IgA 转型以及肠固有层的淋巴细胞(LPL)体外增殖情况进行观察,为提高粘膜免疫屏障水平、预防肠源性感染的发生提供依据。方法:无特殊病原菌(SPF)小鼠,随机分为对照组(10只),烧伤组(10只)。烧伤组致以20%TBSAⅢ度烧伤,于伤后3d 与对照组同时活杀,用免疫组化染色观察肠固有层中 IgA 型浆细胞;PP 中淋巴细胞表面 IgA 流式细胞计数;烧伤后 LP 淋巴细胞体外增殖检测;肠组织中 IL-6 ELISA 测定。结果:PP 中淋巴细胞表面 IgA 阳性率烧伤后3d 低于正常对照组;烧伤后 LP 中 IgA 浆细胞数明显少于伤前的水平;烧伤后动物的 LP 中淋巴细胞体外增殖明显下降;烧伤后3d 肠组织中 IL-6水平与正常对照组无显著差别。结论:烧伤后抑制肠粘膜免疫组织淋巴细胞自身的增殖、分化,导致粘膜免疫屏障水平降低。
- 白晓东刘贤华仝青英
- 关键词：烧伤粘膜免疫增殖分化
- 改良的Ab－PABF与Ab－PAS组织化学染色法在小鼠小肠粘液染色中的应用比较被引量：1
- 1996年
- 改良的Ａｂ－ＰＡＢＦ与Ａｂ－ＰＡＳ组织化学染色法在小鼠小肠粘液染色中的应用比较ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｉｍｐｒｏｖｅｄＡｂ－ＰＡＢＦａｎｄＡｂ－ＰＡＳｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｓｉｎｍｏｕｓｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｕｃｏｕｓｓｔａｉｎｉｎ...
- 刘贤华白晓东粟永萍
- 关键词：染色法
