刘长振
- 作品数：16 被引量：49H指数：4
- 供职机构：清华大学医学院生物医学工程系更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PC12细胞Glutaredoxin cDNA的克隆、表达与蛋白分离纯化
- Glutaredoxin是一种小的酶蛋白(12KD),具有保守活性位点序列cys-pro-tyr-cys,可催化GSH与二硫键之间氧化还原反应,与硫氧还蛋白、蛋白质二硫键异构酶同为巯基-二硫键氧化还原酶家族.它在生物体内...
- 刘长振谢振华王爱民张雪峰申峰
- 文献传递
- 肌肽对PC12细胞氧化应激损伤的保护作用被引量：20
- 2001年
- 本研究采用过氧化氢和谷氨酸纳作用于PC12细胞 ,成功的制作了氧化应激损伤的细胞模型。将培养的细胞进行分组 :正常对照组 ;损伤组 ;分别给予过氧化氢和谷氨酸钠 ;肌肽保护组 ,同损伤组的制备 ,但予先加入肌肽。用MTT法检测了各组细胞的生长状态并测定了LDH活性 ,观察了细胞形态和蛋白电泳等。结果表明 :在保护组 ,MTT的测定结果高于损伤组 ,LDH低于损伤组 ,其细胞生长状态和蛋白质电泳结果也与损伤组有显著差异 ,证明了肌肽对PC12细胞的氧化应激损伤有明显保护作用。
- 刘长振王爱民谢振华聂丹瑶马春杨歌德贺雨虹
- 关键词：PC12细胞肌肽氧化应激损伤
- PC12细胞GlutaredoxincDNA的克隆、表达与蛋白分离纯化
- 我们以来源大鼠肾上腺的PC12细胞为生物材料,使用RT-PCR、分子克隆技术,成功的克隆了PC12细胞glutaredoxincDNA序列,也同时确定了未知的大鼠glutaredoxincDNA,并道交Genbank,登...
- 刘长振
- 关键词：GLUTAREDOXIN克隆PC12细胞氧化应激损伤
- PC12细胞中氧化还原因子-1对过氧化氢和谷氨酸损伤的不同反应
- 目的通过研究 PC12细胞抗氧化应激的氧化还原因子-1(apurinic/apyrimidimic endonuclase/redox factorl, APE/Ref-1)分子在过氧化氢和谷氨酸损伤过程中表达水平的变化...
- 谢振华刘长振王爱民马春
- 关键词：PC12细胞APE/REF-1H2O2
- 文献传递
- 铜诱导人体转铜伴侣蛋白Atox1构象变化的研究被引量：1
- 2001年
- 目的 探讨铜对Atox1蛋白构象变化的影响。方法 用圆二色性光谱分析了Atox1的构象变化。结果 结合铜以后 ,Atox1无论是二级结构 ,还是三级结构都发生了变化 ,铜诱导的构象变化对于Atox1在体内发挥其作用时可能起关键作用。
- 张雪峰贺雨虹尹珅周宏博王秀宏刘长振申峰周虹
- 关键词：圆二色性构象
- 过氧化氢对PC12细胞中硫氧还蛋白和APE/Ref-1基因表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察过氧化氢(H2O2)对硫氧还蛋白和APE/Ref-1基因表达的影响,探讨H2O2预处理对神经细胞具有适应性保护的分子机制。方法以PC12细胞作为神经细胞模型,以200和400μmol/L浓度的H2O2处理PC12细胞,用MTT法检测细胞的损伤程度,以Western blot方法测定硫氧还蛋白和APE/Ref-1表达水平。结果200μmol/LH2O2促进PC12细胞的硫氧还蛋白和APE/Ref-1表达,400μmol/LH2O2也促进PC12细胞的APE/Ref-1表达,但使PC12细胞的硫氧还蛋白表达显著降低。结论促进硫氧还蛋白和APE/Ref-1表达可能是低浓度H2O2预处理对神经细胞具有适应性保护的分子机制。
- 谢振华刘长振王爱民马春
- 关键词：PC12细胞过氧化氢
- PC12细胞氧化应激与APE/Ref-1,TRX cDNA的克隆与表达
- 本研究采用分子生物学,逆转录PCR等技术,成功的克隆,表达了来自PC门细胞的氧化还原因于APE/Ref-1和硫氧还蛋白(TRX).检测了在氧化应激条件下它们在细胞中的基因表达.APE/Ref和 TRX共同参与细胞内的氧化...
- 谢振华刘长振王爱民
- 文献传递
- PC12细胞APE/ref-1cDNA的克隆和表达被引量：4
- 2001年
- APE Ref 1是双功能核蛋白 ,它既能在碱基切除修复过程中切除脱嘌呤 脱嘌啶位点 ,又能促进包括AP 1、Myb和NF κB等受氧化还原调节的转录因子对DNA的结合 .从PC12细胞中抽提总RNA ,经逆转录PCR(RT PCR)扩增出APE ref 1cDNA并克隆到pQE3 1表达质粒上的BamHⅠ和PstⅠ位点间 .经测序表明 ,PC12细胞的APE ref 1cDNA以正确的阅读框架重组进入表达质粒 ,表达重组质粒pQE3 1 APE在宿主菌BL2 1中得到稳定表达 .SDS PAGE鉴定表明 ,带 6个组氨酸的融合蛋白分子量为 3 8kD ,并经Ni NTA琼脂糖亲和纯化得到电泳纯融合蛋白 .Western印迹证明重组蛋白为APE ref 1融合蛋白 .
- 谢振华王爱民刘长振马春
- 关键词：PC12细胞APE/REF-1RT-PCR克隆限速酶
- 水溶性大豆异黄酮对破骨细胞分化和功能的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:研究水溶性大豆异黄酮(WSSI)对1,25-二羟基维生素D3诱导兔骨髓细胞分化形成破骨细胞样细胞以及兔成熟破骨细胞骨吸收功能的影响。方法:通过TRAP染色对骨髓细胞诱导分化形成的TRAP阳性多核巨细胞计数;用显微摄影结合计算机图像分析测定骨吸收造成的陷窝数目及表面积,以评价破骨细胞活性;用扫描电镜观察骨吸收陷窝的形态。结果:浓度为20.0、4.0、2.0和0.4μg/ml的水溶性大豆异黄酮既能抑制破骨细胞样细胞的形成(P<0.001),还能抑制成熟破骨细胞的骨吸收功能(P<0.001),具体表现在随着浓度的升高骨吸收陷窝数目及表面积减少。结论:WSSI可以明显抑制破骨细胞样细胞的形成和成熟破骨细胞的骨吸收功能。
- 李湘辉张金超张雅鸥刘长振隋森芳杨梦甦
- 关键词：破骨细胞样细胞骨吸收
- PC12细胞硫氧还蛋白cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：9
- 2002年
- 硫氧还蛋白 (Thioredoxin ,TRX)是广泛存在于原核和真核细胞中的低分子量蛋白质 ,它含有保守的Cys Gly Pro Cys活性位点 ,作为多效性细胞因子而具有重要的生物学功能。从PC1 2细胞中提取总RNA ,经逆转录PCR(RT PCR)扩增出硫氧还蛋白cDNA并克隆到PUC1 8质粒上。序列分析表明 ,克隆所得序列与GenBank中大鼠硫氧还蛋白cDNA序列完全一致。将该基因亚克隆到表达质粒pQE30上 ,质粒pQE30 TRX在大肠杆菌M1 5中获得高效表达。带 6His的融合蛋白约占总菌体蛋白的 30 %。分析鉴定表明 ,纯化的融合蛋白质分子量是 1 4kD ,且具有二硫键还原酶活性。
- 谢振华王爱民马春刘长振刘明杨歌德贺雨虹
- 关键词：PC12细胞硫氧还蛋白RT-PCR克隆大肠杆菌
