史莹飞
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：厦门大学化学化工学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 重组毕赤酵母表达新型人胰岛素原类似物的研究
- 胰岛素是治疗糖尿病，特别是胰岛素依赖型糖尿病的特效药，具有广阔的应用前景。本课题旨在通过基因工程等方法，利用巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)为表达宿主，研究开发一种新型长效人胰岛素药物，在患者体内重建胰岛...
- 史莹飞
- 关键词：重组毕赤酵母基因工程
- 文献传递
- 人胰岛素原密码子的优化及其在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2012年
- 依据毕赤酵母偏好密码子,设计合成长效人胰岛素原(human proinsulin,HPI)基因序列,所合成的HPI基因全长为200bp,并在其N端添加信号肽(EEAEAEAEPK)以提高目的蛋白表达.将改造后基因克隆到pPIC9K载体中,构建分泌表达型载体pPIC9K-HPI,转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中.用遗传霉素G418梯度筛选获得高拷贝菌株,在甲醇诱导下表达分子质量为7.87ku的HPI,利用金属螯合层析纯化蛋白质,胰蛋白酶酶切后利用人胰岛素试剂盒测得生物活性,HPI摇瓶最高产量可达35.4mg/L.该研究为获得大量长效胰岛素基因工程产品奠定研究基础.
- 史莹飞敬科举凌雪萍卢英华
- 关键词：胰岛素原基因改造毕赤酵母
