吴保平
- 作品数：36 被引量：67H指数：5
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金全军“十五”指令性课题高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大肠癌淋巴结抗体Fab段基因的扩增
- 2001年
- 目的 从大肠癌病人淋巴结中扩增抗体Fab段重链 (Fd)和轻链 (κ)基因。方法 以一步法提取淋巴结总RNA ,采用逆转录及PCR反应。反应产物以琼脂糖凝胶电泳观察。结果 扩增的Fd和κ基因长度分别为 70 0和 650bp ,相应肿瘤和正常切缘组织未见扩增。结论 Fab段重链 (Fd)和轻链 (κ)基因的成功扩增为大肠癌基因工程抗体的制备噬菌体抗体库的构建奠定了基础。
- 吴保平张亚历孙逊肖冰周殿元赖卓胜王亚东高春芳
- 关键词：抗体FAB段基因大肠癌
- 真核细胞起始因子阻滞对LS-174T细胞乙酰肝素酶表达及活性的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 确定结肠癌细胞中真核细胞起始因子 4E(eukaryoticinitiationfactor 4E ,eIF 4E)是否在帽依赖翻译水平上调控乙酰肝素酶的表达 ,并对乙酰肝素酶表达和肿瘤细胞侵袭性改变的相关性进行探讨。方法 采用Westernblot和RT PCR方法 ,分别检测eIF 4E被阻抑后其转录和翻译水平的改变。乙酰肝素酶活力是以其将大分子放射性元素 (3 5 S)标记硫酸乙酰肝素底物降解为小分子的能力来确定。癌细胞侵袭力改变使用膜浸润培养系统来检测。结果 反义寡核苷酸 (asODN)经脂质体转染LS 174T细胞后 ,eIF 4E基因表达明显抑制 ,其蛋白表达也显著下降。伴随eIF 4E被阻抑 ,LS 174T细胞乙酰肝素酶的活力和蛋白表达量均下降 ,并伴有癌细胞体外侵袭力的下降。结论 eIF 4E在翻译步骤对乙酰肝素酶表达具有调控作用 。
- 杨玉捷张亚历赖卓胜王继德吴保平王亚东
- 关键词：乙酰肝素酶活性癌细胞
- 人源性大肠癌Fab段噬菌体抗体库的免疫组化鉴定
- 2002年
- 目的鉴定基因工程抗体库技术构建的人源性大肠癌自然致敏噬菌体Fab段抗体库与人大肠癌组织及体外培养的大肠癌细胞的特异性结合活性。方法通过免疫组化的方法检测抗体库对人大肠癌标本及体外培养的大肠癌lovo细胞的结合活性,并取绒毛状腺瘤、胃癌、食管癌及正常肠粘膜组织和体外培养的胃癌、肝癌细胞进行对照研究。结果 30例大肠癌有22例发生了阳性反应:肠息肉、胃癌、食管癌、正常肠粘膜各取20例,发生阳性反应的分别为13例、5例、4例和1例,体外培养的胃癌、肝癌细胞未发生阳性反应。结论大肠癌噬菌体抗体库能较特异性地与人大肠癌组织及体外培养的大肠癌细胞结合。
- 孙逊吴保平肖冰张振书赖卓胜
- 关键词：大肠癌抗体FAB段噬菌体抗体库免疫组化
- 肝癌经皮射频毁损不良反应的护理被引量：1
- 2002年
- 探讨超声引导下经皮射频治疗肝癌的不良反应及其护理要点。 15 4例患者共进行 182次治疗 ,平均每例患者治疗 1.18次 ,每次治疗 5 .74点。治疗后症状改善 ,肿瘤缩小。主要不良反应有 :疼痛、出血、发热、肝功能轻度损害 ,胸水、腹水、腹泻、肝脓肿等 ,经严密观察 ,及早发现 ,及时处理 ,精心护理 ,均好转或治愈出院。
- 刘梅娟郭瑜王继德吴保平
- 关键词：肝癌护理超声引导
- CD95抑制大肠癌细胞生长的实验研究
- 1999年
- 目的建立表达外源性CD95基因的大肠癌细胞株,观察CD95表达细胞株在CD95抗体作用下对体外培养的大肠癌细胞的抑制效应。方法采用分子克隆技术将CD95基因插入真核表达载体pBK-CMV的多克隆位点之间。以脂质体介导法将目的基因导入受体细胞的HT-29,用G418筛选克隆细胞。以Northern blot,Western blot检测转导细胞CD95基因的表达。MTT法和直接记数法以及软琼脂集落形成实验检测转导株在CD95抗体作用下的细胞增殖水平、生长曲线及细胞克隆形成率。结果成功地构建了真核表达载体pBK-CMV/CD95 cDNA。转导细胞并经筛选后,获得了2株稳定的抗性细胞,从而建立了CD95基因表达株(HT-29 CD95 cells)。杂交结果表明、转导株CD95mRNA及其蛋白水平的表达均明显高于非转导株,转导细胞增殖速度、倍增时间、对数生长期等均比非转导株更为缓慢和处于抑制状态,集落形成能力低下,但差异无显著性意义,而在CD95抗体作用下效果更为显著,差异有非常显著性意义。结论 CD95基因在大肠癌细胞中处于低表达状态;通过真核表达载体的介导,CD95基因导入大肠癌细胞后,能有效地表达CD95mRNA及其蛋白。CD95表达细胞株在CD95抗体的作用下可明显抑制体外培养的大肠癌细胞的生长增殖,其作用机制与CD95诱导细胞凋亡有关。
- 赖卓胜肖冰吴保平周京旭南清振沈健王来东张亚历张振书
- 关键词：CD95大肠癌细胞转导HT-29集落形成CMV
- 活性氧及抗癌药物对内皮细胞通透性、细胞骨架及癌细胞粘附量的影响被引量：4
- 1995年
- 为研究癌─内皮细胞的相互关系，建立了一种研究血管内皮通透性变化的体外模型，观察了氧自由基及抗癌药诱发的细胞毒作用对内皮细胞通透性、细胞骨架及癌细胞粘附量的影响。结果表明，细胞毒作用可引起内皮细胞通透性增加，在形态学上表现为内皮细胞收缩、内皮间隙增大，骨架纤维变短变粗。扫描电镜下可见粘附细胞增多。
- 张亚历周杰周殿元吴保平
- 关键词：内皮细胞抗癌药物活性氧
- 胃癌超声内镜分期与微小卫星DNA不稳定性关系的研究被引量：3
- 1999年
- 目的探讨微小卫星ＤＮＡ不稳定性（ＭＩＮ）与胃癌术前分期的关系。方法应用超声内镜对７３例胃癌患者行术前分期，同时采用银染ＰＣＲＳＳＣＰ方法检测内镜活检组织第２、５、１７号染色体４个位点的ＭＩＮ。结果ＭＩＮ总的检出率为３７０％，其中出现４、３、２个及单个位点异常分别为１１１％、２２２％、４８１％和１８５％。Ｔ１至Ｔ４期癌ＭＩＮ检出率分别为４０４％、３３３％、３９３％和３５７％（Ｐ＞００５），与胃癌的浸润深度无关，其中有淋巴结转移组为５１４％，明显高于无转移组的２２２％（Ｐ＜００２５）。结论ＭＩＮ是胃癌病变中常见的分子遗传学事件，与胃癌转移有一定的相关性。
- 郭文张亚历邱红明吴保平张立力周殿元
- 关键词：胃癌超声内镜肿瘤分期
- 具有家族背景大肠癌微卫星不稳定性的研究
- 2001年
- 为了解具有家族背景大肠癌微卫星不稳定性（MIN）的表达及其与临床病理表现的关系。应用银染聚合酶链反应-单链构相多态性（PCR-SSCP）分析技术，对46例大肠癌进行研究，MIN在具有家族背景两面三刀肠癌中的表达明显高于无家族史的散发性大肠癌（Ｐ<0.05)。癌家族史MIN的表达与大肠癌发病年龄轻、右半大肠癌、大肠外癌及低分化癌的发生率高均有明显关系（P<0.01,P<0.05)，而与多原发癌的发生及转移复发无明显关系（P>0.05)。结果表明，MIN在具有家族背景大肠癌中起着明显的作用。MIN阳性和有家族背景大肠癌具有发病年龄轻、右半大肠癌、伴大肠外癌及低分化癌的发生率高的表现。
- 吴保平张亚历等
- 关键词：大肠癌微卫星不稳定DNAPCR-SSCP
- PCR-SSCP结合FCM探讨多原发大肠癌起源被引量：1
- 2000年
- 张立力张振书张亚历郭文吴保平周殿元
- 关键词：PCR-SSCPFCM多原发大肠癌
- 人源性大肠癌自然致敏噬菌体抗体Fab呈现库的构建与筛选被引量：2
- 2000年
- 目的 构建大肠癌病人自然致敏淋巴结抗体Fab段噬菌体呈现库，初步筛选相关抗大肠癌抗体。方法 取大肠癌病人转移淋巴结，提取淋巴结总RNA，逆转录PCR扩增重链Fd和κ轻链cDNA。依次将PCR产物插入载体pComb3的相应部位，构建人源性大肠癌噬菌体Fab基因库，并应用噬菌体表面呈现技术对该抗体库进行淘选及鉴定。结果 所选2种Ig亚类的重链Fd片段、2种κ轻链cDNA得到扩增。Fd片段和κ轻链均插入pComb3的重组率为40％，Fab噬菌体表达库容达1.48×10^6。经3轮淘选，抗体库得到约120倍的富集。3轮抗体库的点印记免疫染色均显示有Fab表达：酶联免疫吸附实验显示其与大肠癌抗原有结合活性。结论 成功构建了大肠癌病人自然致敏淋巴结抗体Fab段噬菌体呈现库，利用噬菌体抗体库技术，可筛选相关抗大肠癌抗体。
- 吴保平张亚历肖冰张振书周殿元赖卓胜王亚东周京旭
- 关键词：大肠癌噬菌体抗体库
