吴文书
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
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- 人免疫球蛋白轻链恒区基因的体外扩增及其在大肠杆菌中的分泌表达
- 1992年
- 本文应用聚合酶链反应(PCR)技术体外大量扩增人免疫球蛋白轻链恒区基因(人C_k基因),并将该基因克隆至分泌型表达载体pINⅢ-ompA2,转入大肠杆菌中表达。应用水休克法抽提大肠杆菌的周质蛋白,经SDS-PAGE电泳,免疫印迹法分析,结果表明人恒区基因在大肠杆菌中得到表达,并能分泌至细菌的周质空间。约50％的表达蛋白其ompA信号肽已被切除。
- 吴文书刘健孙学逊黄震宇张文祥郭虹纷
- 关键词：免疫球蛋白
- 抗人小细胞肺癌单克隆抗体的重链变区基因的体外扩增、克隆和序列分析被引量：2
- 1993年
- 本文从抗人小细胞肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,合成第一链cDNA,直接用PCR技术(polymerase chain reaction)扩增出351bp的重链变区基因(V_H),克隆至pUCV_(NP)-PCR载体上,经筛选得一批插入片段为351bp的阳性克隆,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了该单克隆抗体的重链可变区基因。
- 刘健吴文书王斌潘志美田培坤黄震宇洪锦心
- 关键词：聚合酶链反应嵌合抗体
- 小鼠抗人小细胞肺癌单抗轻链可变区基因的体外扩增、克隆及序列分析被引量：2
- 1992年
- 本文通过一对分别位于小鼠免疫球蛋白轻链可变区基因 FR1骨架区和 FR4骨架区的通用引物,利用 PCR 技术首次从小鼠抗人小细胞肺癌2F7杂交瘤细胞染色体组总 DNA 中直接扩增出相应的免疫球蛋白轻链可变区基因,扩增出的基因片段经引物上引进的两个限制性内切酶位点直接克隆到装有人免疫球蛋白轻链恒区的克隆载体 pGEM-7Zf(+)-V_kPCR 中的 EcoR1和 BglⅡ内切酶位点之间.通过对其进行顺序分析,结果表明我们克隆得到了免疫球蛋白轻链可变区基因,其长度为318bp.
- 吴文书李岱宗刘健黄震宇张文祥洪锦心
- 关键词：杂交瘤通用引物
- 用基因定点突变技术改建—免疫球蛋白重链可变区基因的通用表达载体被引量：2
- 1991年
- 本文介绍了一种简便的、具有高突变率的基因定点突变方法。应用Bio-Rad Muta-Gene Phagemid Kit,在一装有表达载体上的抗NP(4-hydroxyl-3-nitrophenacetyl)免疫球蛋白重链可变区基因的J_a区引进BstE Ⅱ酶切位点,从而改建成一种能用于表达免疫球蛋白重链可变区基因的通用表达载体。应用该Kit,基因定点突变率达43％。
- 刘健陈宏蔚潘志美吴文书洪锦心
- 关键词：免疫球蛋白基因定点突变
