吴江雪
- 作品数：17 被引量：33H指数：3
- 供职机构：中山大学肿瘤防治中心更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 人IFNγ对鼻咽癌模型的抗肿瘤作用与机制研究
- 鼻咽癌是东南亚和地中海地区常见的头颈部恶性肿瘤，患者主要为中青年。鼻咽癌的首选疗法为放射治疗，即使结合顺铂化疗，患者的5年生存率也仅为70％。因此，迄需研发新的治疗方法。
本课题对重组IFN γ蛋白对鼻咽癌的抗...
- 吴江雪
- 关键词：鼻咽癌干扰素Γ抗肿瘤基因治疗
- 文献传递
- T-bet对小鼠巨噬细胞(Raw264.7)生物学功能的影响
- 2006年
- 背景与目的:T-bet(TboxexpressedinTcells)是一种特异性调控Th1淋巴细胞的核转录因子,它广泛调控多种免疫细胞(如Th1、NK、CD8+、DC、B细胞等)的生物学活性。本研究观察转染小鼠T-bet基因(pcDNA3.0-mT-bet)对小鼠巨噬细胞Raw264.7生物学功能的影响。方法:构建含T-bet的真核表达载体pcDNA3.0-mT-bet,通过双酶切鉴定及测序、PCR鉴定其准确性,RT-PCR及Westernblot检测其在Raw264.7细胞中的表达。以PBS、pcDNA3.0空载体作为对照,将其瞬时转染入Raw264.7细胞,48h后观察其对细胞周期、细胞表面分子MHCⅠ/Ⅱ表达的影响,以及对FITC-右旋糖酐(FITC-dextran)的吞噬能力、一氧化氮(nitricoxide,NO)分泌水平及T-bet对小鼠白血病细胞L1210的杀伤活性。结果:载体pcDNA3.0-mT-bet构建成功并在Raw264.7细胞中表达;T-bet对Raw264.7细胞周期没有影响(P>0.05);经T-bet修饰后,细胞表面MHCⅠ类分子的表达(24.8±0.6)高于空载体组(20.8±0.7),有统计学意义(P<0.05);但两组间MHCⅡ类分子的表达无显著性差异(P>0.05)。T-bet修饰组吞噬Dextran的平均荧光强度(32.8±0.8)高于空载体组(28.2±0.4),有统计学意义(P<0.05)。在无脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激时,T-bet组NO的产生量[(1.7±0.6)pmol]高于空载体组,两组相比差异有显著性(P<0.05);经10μg/mlLPS持续刺激20h后,T-bet组NO的产生量[(15.6±1.6)pmol]显著高于空载体组[(10.5±1.3)pmol](P<0.05)。pcDNA3.0-mT-bet对L1210细胞的体外杀伤活性[(51.9±3.5)%]明显高于空载体组[(35.6±2.1)%],差异有显著性(P<0.05)。结论:T-bet可诱导Raw264.7细胞表达MHCⅠ类分子,增强其对Dextran的吞噬能力,促进其分泌NO,增加其对L1210细胞的杀伤活性,但对其细胞周期及MHCⅡ类分子的表达无影响。
- 肖林檀卫平肖霞梁志慧吴江雪李鸿立刘然义黄必军黄文林
- 关键词：小鼠巨噬细胞杀伤活性
- 利用枯草杆菌整合表达嗜铬粒蛋白抗真菌片段被引量：6
- 2004年
- 为实现CGA1-76片段基因在枯草杆菌中的稳定表达,将CGA1-76片段基因的表达元件重组到枯草杆菌转座子质粒pHV1249微转座子mini＿Tn10内,利用mini＿Tn10将CGA1-76片段基因的表达元件整合到枯草杆菌DB1342染色体上,用氯霉素和红霉素筛选枯草杆菌转座工程菌DB1342(TnSVTQ)。DB1342(TnSVTQ)在无选择压力条件下经10d连续传代培养,转座子内氯霉素抗性丢失率为0%,说明转座子稳定整合在DB1342染色体上。SDS＿PAGE和免疫印迹分析结果表明,在蔗糖诱导下,CGA1-76片段基因在DB1342(TnSVTQ)中获得表达,产物被分泌到细胞外。孔穴琼脂扩散法测定表达上清的抑制真菌活性,结果表明重组CGA1-76能抑制烟曲霉菌和黄曲霉菌的生长,抑菌圈直径分别为9mm和8mm。
- 李瑞芳罗进贤张添元贺国安吴江雪官文俊
- 关键词：基因表达枯草杆菌抗真菌活性
- 内皮细胞抑制素在毕节酵母与汉森酵母中的表达及活性分析
- 该论文采用PCR技术从人胎脑cDNA库中扩增了人内皮细胞抑制素基因.经DNA序列分析后将扩增的基因克隆至酵母载体pPIC9K,获得的重组质粒pPIC9K-EDN转化毕节酵母GS115,构建能表达内皮细胞抑制素的酵母工程菌...
- 吴江雪
- 关键词：内皮细胞抑制素基因表达毕节酵母生物活性分析
- 内皮细胞抑制素酵母工程菌的高密度发酵及产物纯化和活性分析被引量：4
- 2004年
- 用 30升发酵罐研究了内皮细胞抑制素 (EDN)酵母工程菌P .pastorisGS115 (pPIC9K EDN)的高密度发酵工艺 ,摸索出发酵培养基 ,pH ,诱导时间等对菌体生长和基因表达的影响 .根据所确定的最适条件进行发酵 ,通过补料和甲醇诱导 4 8h后 ,工程菌GS115 (pPIC9K EDN)生物量的A60 0 值达到 2 5 0 ,分泌量为 15 0mg L .发酵液经StreamlineSP ,SepharoseSPFF离子交换柱和Sepharose HeparinHiTrap亲和柱纯化 ,产物纯度达 97%以上 ,回收率为 6 0 % .Western印迹结果表明 ,酵母工程菌GS115 (pPIC9K EDN)表达的重组人内皮细胞抑制素具有天然EDN的免疫原性 .MTT法和抑癌实验结果显示 :纯化产物能抑制人脐静脉内皮细胞的增殖并能抑制移植于小鼠的黑色素瘤的生长 ,其平均抑瘤率是 94 2 % .
- 吴江雪符武钊张添元罗进贤吴群悦
- 关键词：内皮细胞抑制素纯化毕赤酵母
- 新型基因治疗药物-重组人内皮抑腺病毒注射液
- 黄文林吴江雪姜文奇刘然义林旭滨
- 该项目以重组人内皮抑素腺病毒注射液的生产研发为基础，建立了基因治疗药物制剂生产的关键技术体系，并应用服务于多个腺病毒基因治疗药物的产业化。其中应用于“重组人卵巢癌特异性溶瘤腺病毒（AdE3.IAI.3B）感染的A549细...
- 关键词：
- 关键词：抗血管生成肿瘤
- 基因治疗的进展与临床应用
- 2010年
- 在过去的40多年间.基因治疗已从临床前试验研究过渡到了临床试验阶段.并应用于多种疾病治疗中.从单基因隐性遗传的血友病到与多因素相关的疾病如癌症、心血管疾病以及人类免疫缺陷病。迄今为止.在近30个国家范围内.包括已经完成或正在进行或已经获得批准在内的基因治疗临床试验超过了1650项。在这些临床试验中.绝大多数是用于肿瘤的治疗。从20世纪60年代初提出基因治疗的理论到90年代初第一例基因治疗临床试验的开展再到当前基因治疗的广泛应用.可以说基因治疗经历了一个曲折的过程。尽管这个领域至今为止还没有成熟.但是基因治疗仍然有潜力能够为肿瘤患者减轻病痛。本文主要从基因治疗的策略和载体系统的研究两大方面对该领域的进展简单综述。
- 左瑜芳吴江雪黄文林
- 关键词：基因治疗抑癌基因自杀基因抗血管生成逆转录病毒
- 共激活分子及相关因子对机体抗肿瘤免疫的调节作用被引量：2
- 2010年
- 肿瘤在生长过程中,由于细胞转化产生的基因毒性应激和微环境的破坏,可激活具有抗肿瘤能力的效应细胞刺激专职抗原提呈细胞,触发T细胞和B细胞的特异性免疫反应。机体尽管存在免疫监视机制,但肿瘤的存在提示了瘤细胞逃避免疫反应的能力，其中包括各种逃避免疫识别的策略，例如表达死亡配体排除病灶的免疫细胞，通过降低主要组织相容性复合物（MHC）或共激活分子削弱免疫原性，以及干扰自然杀伤细胞（NK）和NKT细胞的识别能力。尽管面临诸如此类的问题，现代免疫治疗在治疗恶性疾病方面仍然显示出发展的前景。
- 张湘宁何志巍吴江雪黄文林
- 关键词：抗肿瘤免疫机体主要组织相容性复合物特异性免疫反应专职抗原提呈细胞
- 波氏假丝酵母启动子的克隆及新霉素基因的表达被引量：1
- 2001年
- 报道了波氏假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉｉ）启动子的克隆，将克隆的启动子与 Ｎｅｏ基因重组构建了 含Ｎｅｏｒ基因的表达载体ＹｅｐＮＰ１８１，转化波氏假丝酵母，实现了Ｎｅｏｒ基因在波氏假丝酵母中的表达，使波氏 假丝酵母转化子能在含Ｇ４１８的抗性培养基上生长从而建立了Ｎｅｏｒ基因──Ｇ４１８选择系统，为外源基因在 波氏假丝酵母中表达创造了条件．
- 徐柏年吴江雪李文清罗进贤
- 关键词：启动子克隆转化子
- 内皮细胞抑制素在毕节酵母中的表达与活性分析被引量：3
- 2003年
- 采用PCR技术从人胎脑cDNA库中扩增了人内皮细胞抑制素基因。经DNA序列分析后将扩增的基因克隆至酵母载体pPIC9K,获得的重组质粒pPIC9K＿EDN转化毕节酵母GS115,构建表达内皮细胞抑制素的酵母工程菌P.pastorisGS115(pPIC9K＿EDN)。SDS＿PAGE分析结果显示:人内皮细胞抑制素在重组酵母GS115(pPIC9K＿EDN)中获得高效表达。用30L发酵罐构对建的工程菌进行高密度发酵,经甲醇诱导48h,生物量达到250OD,分泌量为150mg L,发酵液经SPStreamline,SPSepharoseFF阳离子交换柱和SepharoseHeparinHiTrap柱纯化,产物纯度达到98%。纯化产物具有免疫活性并能抑制bFGF诱导的鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。
- 吴江雪符武钊张添元罗进贤吴群悦
- 关键词：毕节酵母高密度发酵纯化生物活性分析
