吴海珍
- 作品数：70 被引量：130H指数：6
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 大肠杆菌ubiCA基因的克隆、表达及对CoQ8产量的影响
- 辅酶Q(CoQ)属于醌类,即2,3-二甲氧基-5-甲基-6-聚异戊二烯醌,由于它广泛存在于生物系统中,所以又叫泛醌(ubiquinone,UQ)。CoQ带有一很长的脂肪族侧链,是由多个异戊二烯(isoprene)单位构成...
- 叶江马林吴海珍张惠展
- 文献传递
- 大黄鱼凝血酶原类似基因的克隆及其表达分析
- 2010年
- 采用快速末端cDNA扩增法，首次从大黄鱼中克隆到全长为2023bp的凝血酶原类似基因cDNA，编码为617个氨基酸，其中包括80bp的5’末端非编码区及89bp包含poly（A）尾的3’末端非编码区。预测1～15位的氨基酸处存在1个信号肽。推导的氨基酸序列与哺乳动物及其他鱼类进行同源性比较，发现其与红鳍东方纯有73％同源性，而与哺乳动物的同源性为50％～65％。凝血酶原类似基因虽然在大黄鱼的各个组织中组成型表达，但是在减毒鳗弧菌免疫的大黄鱼的脾脏和肾脏中表达明显上调，这表明凝血酶可能参与大黄鱼对细菌侵染的免疫应答。
- 卫玮吴海珍徐红艳常抗美张元兴
- 关键词：大黄鱼鳗弧菌
- 第三代基因工程—代谢工程被引量：19
- 2000年
- 代谢工程 (MetabolicEngineering) ,亦称途径工程 (PathwayEngineering)和代谢设计 (MetabolicDesign) ,是一门利用分子生物学原理系统分析细胞代谢网络、并通过DNA重组技术合理设计细胞代谢途径及遗传修饰 ,进而完成细胞特性改造的应用性学科。鉴于它涉及到多基因的联合协同表达控制机制 ,与传统的蛋白多肽单基因表达 (第一代基因工程 )以及基因定向突变 (第二代基因工程 )已有显著区别 ,故作者将之看作为第三代基因工程。
- 孙丽萍吴海珍张惠展
- 关键词：代谢工程分子生物学
- 基因工程综合性教学实验系统的开发与应用被引量：6
- 2003年
- 本文介绍一种基因工程大型综合性教学实验系统的开发和应用。该实验系统由16个单元操作组成,以大肠杆菌染色体DNA为起始材料,最终获得纯净的重组碱性磷酸单酯酶基因工程产物。各单元操作均设有“建议模式”,但鼓励学生在实验条件允许的范围内自行创新设计实验操作流程。同时,还建立了相应的实验评价系统。
- 张惠展吴海珍赵健俞建瑛张慧静
- 关键词：基因工程生物技术专业高校
- 辅酶Q生物合成途径的研究
- 辅酶Q生物合成途径中,聚异戊烯焦磷酸合成酶和对羟基苯甲酸聚异戊二烯基转移酶是两个关键因子,以大肠杆菌中相应基因的部分序列为探针,杂交了七种生物体的染色体DNA,前者基本呈阳性,基因保守性强,后者只有荚膜细细菌呈阳性,保守...
- 吴海珍
- 关键词：杂交
- 文献传递网络资源链接
- bagZH编码酪氨酸酶样铜酶并参与bagremycin生物合成
- 2018年
- 【目的】研究bagremycin产生菌链霉菌Tü4128中编码酪氨酸酶样铜酶的bagZH基因的功能。【方法】基于同源重组技术敲除bagZH基因,利用HPLC和LC-ESI-MS分析其次级代谢产物谱。在E. coli BL21(DE3)中异源表达BagH并分离纯化,分别以邻氨基酚和3,4-AHBA为底物,利用LC-ESI-MS分析BagH催化产物。【结果】HPLC显示,bagZH基因敲除突变株的bagremycin产量显著降低,回补bagZH基因表达盒后bagremycin产量有所上调。LC-ESI-MS分析bagZH基因敲除突变株的次级代谢产物谱,结果显示,保留时间为3.18 min的新产物分子量为286.32 g/mol,与推测的3,4-AHBA在体内酯化合成的产物分子量吻合。体外生化分析显示,BagH能将邻氨基酚的邻位氨基氧化为亚硝基(保护基团)。【结论】本文首次鉴定了bagZH基因编码的酪氨酸酶样铜酶参与bagremycin生物合成。BagH负责将3,4-AHBA的邻位氨基氧化为亚硝基(保护基团)避免自身酯化,待与反式对香豆酸衍生物缩合后,再由胞内的还原酶将保护性亚硝基还原为氨基,最终合成bagremycin A和bagremycin B。我们的研究结果为bagremycin作用机制的深入研究以及高产菌株的理性设计与改造提供了基础和参考。
- 祁双双吴海珍叶江张惠展
- 关键词：亚硝基化
- 48株爱德华氏菌糖酵解持家酶的胞外分泌被引量：1
- 2019年
- 【背景】病原菌的糖酵解持家酶能分泌到胞外或定位在细胞膜表面,在病原菌的侵染和细胞粘附方面发挥着重要作用,爱德华氏菌是重要的鱼类致病菌,研究其糖酵解持家酶的胞外分泌有助于该病原的致病机制研究和疫苗开发。【目的】探究爱德华氏菌中糖酵解持家酶的胞外分泌。【方法】通过ELISA方法考察48种不同来源的爱德华氏菌中5种糖酵持家酶的胞外分泌。【结果】48种不同来源的爱德华氏菌中糖酵解持家酶蛋白均能分泌到胞外。【结论】爱德华氏菌中糖酵解持家酶的胞外分泌是普遍现象。
- 周翔宇吴海珍
- 关键词：爱德华氏菌ELISA
- 迟钝爱德华氏菌突变株及其应用
- 本发明提供迟钝爱德华氏菌突变株及其应用，尤其是提供具有生物学屏障的突变株和具有生物学屏障的减毒突变株。
- 王启要刘琴张元兴王亚敏吴海珍肖婧凡
- 文献传递
- 大肠杆菌guaC基因的克隆及高效表达
- 2003年
- 以 E.coli MC41 0 0染色体 DNA为模板使用 PCR扩增技术克隆了鸟苷酸还原酶基因gua C,该基因全长 1 0 44bp,编码相对分子质量为 3 7ku的蛋白质。将该基因直接克隆于 p ET-1 6b质粒的 T7启动子下游 ,得到质粒 p EXP1。转化 E.coli BL2 1 (DE3 ) ,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导 ,获得了高效的表达。含表达质粒的菌体胞内粗提液经酶活分析表明 ,鸟苷酸还原酶的活性为不含质粒的宿主菌的 80～
- 糜蓉娟吴海珍叶江张惠展叶勤
- 关键词：E.COLI基因表达
- 不同途径免疫减毒活疫苗Vibrio anguillarum诱导的鱼类TH17相关粘膜免疫反应
- 鳗弧菌减毒活疫苗Vibrio anguillarum不同途径接种斑马鱼，研究其在不同免疫途径下激发的鱼体粘膜组织皮肤、鳃和肠道的免疫反应。免疫28天后模拟自然感染的浸泡攻毒发现，浸泡免疫诱导的保护作用更佳。采用RT-qP...
- 张华吴海珍沈斌兵高原王启要肖婧凡张元兴
- 关键词：大菱鲆TH17粘膜免疫浸泡免疫注射免疫
