吴远彬
- 作品数：37 被引量：78H指数：5
- 供职机构：广东省中医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省中医药管理局基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基因扫描分析人T细胞受体CDR3谱型检测T细胞克隆技术的建立被引量：1
- 2007年
- 目的建立人T细胞受体(TCR)互补决定区3(CDR3)基因谱型的基因扫描分析术,为分析T细胞克隆提供研究方法。方法分别以Jurkat和Raji细胞作为阳性和阴性对照,应用RT-PCR方法扩增5例健康志愿者外周血T细胞的34个TCR Vα亚家族和26个TCR Vβ亚家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性。结果T细胞株Jurkat细胞仅表达TCR Vα1.1和Vβ8基因,且为单克隆,而B细胞株Raji细胞则不表达所有的TCR Vα和Vβ基因。5例健康人表达所有的TCR Vα和Vβ基因,均为多克隆T细胞。结论基因扫描分析人TCR CDR3基因谱型是检测T细胞克隆性的精确敏感方法。
- 周健胡亮杉郭坤元黄迎郭爱林吴远彬王杨涂三芳
- 关键词：T细胞受体互补决定区3基因扫描T细胞克隆
- 单倍体相合造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病小鼠模型的建立及其评价被引量：8
- 2008年
- 目的：因供受者主要或次要组织相容性抗原存在差异而引起的移植物抗宿主病是影响异基因造血干细胞移植效果的关键因素,目前国内尚缺乏研究此领域的实验动物模型及其评价体系。本实验拟建立半相合异基因造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病小鼠模型,并制定半定量评价体系。方法：实验于2007-03/08在南方医科大学实验动物中心完成。①动物：供鼠为近交系Balb/CH-2d小鼠40只,雄性,8～10周龄,体质量18～22g;受鼠为CB6F1小鼠（Balb/c×C57BL/6F1H-2d/b）48只,雌性,10～12周龄,体质量18～24g,随机数字表法分为3×10^7,6×10^7,9×10^7个脾细胞移植组及空白对照组,12只/组。小鼠均由南方医科大学实验动物中心提供,SPF级,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法：Balb/CH-2d小鼠颈椎脱臼处死,取脾脏研磨后制成脾单细胞悬液,离心弃上清,加入Tris-NH4Cl裂解红细胞,用RPMI1640调整细胞浓度为1.2×10^8L^-1,锥虫蓝染色计数脾细胞拒染率为95.6%。3×10^7,6×10^7,9×10^7个脾细胞移植组分别经尾静脉输入对应数量的MHC半相合脾细胞悬液0.5mL,空白对照组输入等体积RPMI1640培养液。③实验评估：脾细胞移植后2,5,8,12周,光镜下计数20个分裂相,检查骨髓细胞中的Y染色体数量,进行嵌合体分析。脾细胞移植18d后,每3d观察受体小鼠的临床表现,包括体质量、体形、体位、毛发变化及生存情况,并予以评分。输注脾细胞后100d观察皮肤、肝脏、回盲端小肠靶器官的病理变化,并进行评分。结果：48只受体小鼠均进入结果分析。①嵌合体检测：6×10^7个脾细胞移植组可形成较为稳定的低水平供受者混合嵌合体;9×10^7个脾细胞移植组起初可形成较高水平的供受者混合嵌合体,随时间的推移水平降低;3×10^7个脾细胞移植组未能形成稳定的供受者混合嵌合体。②慢性移植物抗宿主病的临床及病�
- 吴远彬郭坤元陆志刚周健宋朝阳吴秉毅吴顺杰
- 关键词：造血干细胞移植异基因慢性移植物抗宿主病
- 3’-甲异靛玉红对不同种系小鼠脾细胞增殖、凋亡及生物功能的调节
- 2008年
- 背景：靛玉红及其衍生物具有抗炎、抗肿瘤作用，可用于自身免疫性疾病的治疗，但其对正常免疫细胞的作用尚鲜见报道。目的：观察3’-甲异靛玉红对不同种系小鼠脾淋巴细胞增殖及生物功能影响的调节。设计、时间及地点：随机对照实验，于2007-07，2008—02在南方医科大学珠江医院血液科实验室完成。材料：清洁级BALB/c，C57BL/6以及F1代杂交鼠，均雄性，6～8周龄，体质量（20±2）g，由第一军医大学实验动物中心提供。3’-甲异靛玉红由美国Sigma公司提供。方法：取BALB＆，C57BL/6以及F1代杂交鼠脾组织研磨过滤为单个核细胞悬液，以5、10、15、20和25μmol／L3’-甲异靛玉红处理各种系小鼠脾细胞，以未处理的为空白对照，以刀豆蛋白A处理组为阳性对照。主要观察指标：MTT法测定各种系小鼠脾淋巴细胞增殖情况；ELISA法测定淋巴细胞培养上清白细胞介素12活性；流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及死亡率、细胞内活性氧浓度变化；RT-PCR检测细胞Bcl-2和CDK2基因mRNA水平；荧光显微镜检测细胞Bcl-2、Bax和CDK2蛋白表达率。结果：MTT检测显示，15、20和25μmol／L3’．甲异靛玉红作用24h便可明显抑制3种小鼠脾淋巴细胞增殖俨〈0．05），此效应呈量效、时效依赖性。将25μmol／L3’-甲异靛玉红处理72h后的细胞离心后撤除3’-甲异靛玉红干预继续培养，椎虫蓝记数发现细胞恢复增殖。ELISA检测显示，各浓度3’-甲异靛玉红抑制各种系小鼠脾细胞分泌白细胞介素12，各种系间差异不显著。RT-PCR检测显示，15μmol／L3’-甲异靛玉红处理12h后脾细胞Bcl-2和CDK2的mRNA水平明显降低。流式细胞仪检测细胞凋亡率及死亡率表明，15umol／L的3’-甲异靛玉红可降低各种系小鼠脾淋巴细胞凋亡相关蛋白Bcl，2水平，升高Bax蛋白水平，下调Bcl-2／Bax比例，降低CDK2表达，不同种系
- 胡海燕宋朝阳邓兰吴远彬郭坤元张梅霞
- 关键词：凋亡白细胞介素12
- 基因扫描分析小鼠T细胞受体CDR3谱型检测T细胞克隆技术的建立
- 2008年
- 目的建立小鼠T细胞受体(TCR)互补决定区3(CDR3)谱型的基因扫描分析术,为分析T细胞克隆提供研究方法。方法应用RT-PCR方法分别扩增近交系小鼠C57BL/6H-2b,Balb/CH-2d和F1代小鼠(Balb/c×C57BL/6F1H-2d/b,CB6F1)脾脏T细胞的21个TCRVα家族和18个TCRVβ家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性。结果3种小鼠脾脏T细胞均表达所有的TCRVα和VβCDR3基因,基因扫描显示全部TCRCDR3谱型呈高斯(钟型)分布,提示均为多克隆T细胞。各家族CDR3基因表达频率接近,但呈现不同的多态性和长度分布。结论基因扫描分析TCRαβCDR3基因谱型是检测小鼠T细胞克隆性的精确敏感方法。
- 周健黄迎吴远彬胡亮杉涂三芳王杨孙明郭爱林郭坤元
- 关键词：小鼠T细胞受体互补决定区3基因扫描T细胞克隆
- 人骨髓瘤细胞RPMI 8226的生物学特性被引量：1
- 2010年
- 目的观察人骨髓瘤细胞RPMI 8226的生物学特性。方法光镜下观察RPMI 8226细胞形态、生长特点、体外克隆形成率;流式细胞仪分析其免疫表型、周期分布、多药耐药蛋白P-170和ABCG2的表达情况;MTT法分析其药物敏感性;PCR-SSP法检测HLA-Ⅰ类分子基因型;动物实验观察成瘤情况。结果 RPMI 8226细胞呈圆形,悬浮生长,细胞体积较大,细胞群体倍增时间为24.48 h。14 d和21 d时的克隆形成率分别为（10.27±1.38）%、（42.56±2.98）%。RPMI 8226细胞表达CD38、CD138和CD49e,不表达CD20、CD19、CD11a、CD3、CD13、κ、λ。RPMI 8226细胞周期为：G0/G1期细胞占（57.64±2.31）%,S期细胞占（35.75±1.18）%、G2/M期细胞占（6.73±0.21）%;P-170和ABCG2表达率分别为（2.27±0.35）%、（1.33±0.26）%。RPMI 8226细胞对ADM、VCR、DDP、VP16和MMC药物的IC50分别为（0.56±0.06）、（0.92±0.10）、（1.17±0.32）、（1.83±0.16）和（4.91±0.84）μmol/L。染色体数目在43－49之间。HLA-Ⅰ基因型为A19,19;B 15,37;Cw02,02。BALB/c裸鼠皮下接种1×107个细胞可以成瘤,病理证实为浆细胞瘤。结论 RPMI 8226细胞具有多发性骨髓瘤细胞的特点,可以用于基础和临床研究。
- 周健吴远彬蒋东霞宋永平魏旭东
- 关键词：骨髓瘤细胞株生物学特性
- Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤机制的初步探讨
- 目的：观察同种异体 NK 细胞对人 B 细胞淋巴瘤 Raji 细胞的杀伤活性,并初步探讨 Raji 细胞逃逸 NK 细胞免疫杀伤的机制。方法：以 NK 细胞杀伤敏感细胞株 K562作为对照,应用 LDH 释放法检测不同效...
- 周健郭坤元梅家转牛新清涂三芳王杨何颖芝孙明吴远彬
- 关键词：自然杀伤细胞自然杀伤细胞受体
- 文献传递
- U251细胞溶解物体外诱导人TCR VβT细胞增殖和杀伤活性的研究
- 2008年
- 目的了解神经胶质瘤U251细胞溶解物lysate体外诱导人外周血T细胞的特异性细胞毒作用和T细胞受体（TCR）vB谱系表达和克隆性变化情况。方法采用混合淋巴细胞／肿瘤细胞培养方法，以lysate作为刺激原体外诱导外周血单个核细胞增殖，应用LDH释放法检测不同效靶比时诱导后T细胞杀伤U251和Raji细胞的细胞毒活性，同时利用RT-PCR基因扫描技术分析诱导前、后TCR Vβ亚家族的克隆性增殖特点。结果基因扫描显示lysate诱导前5例健康人全部TCR Vβ谱型呈高斯（钟型）分布，T细胞均为多克隆；lysate诱导后部分TCR Vβ亚家族T细胞呈单克隆、寡克隆或寡克隆趋势生长。相同效靶比时lysate诱导前、后T细胞对U251细胞杀伤活性之间的差异有统计学意义（P〈0．05）；而对Raji细胞的杀伤活性之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论U251细胞溶解物lysate在体外可诱导T细胞呈克隆性增殖，此优势增殖的克隆性T细胞对U251细胞具有特异性细胞毒作用。
- 周健胡亮杉郭坤元涂三芳王杨孙明吴远彬
- 关键词：T细胞克隆性
- 中西医结合治疗低中危骨髓增生异常综合征22例疗效分析被引量：2
- 2017年
- 目的:评价中西医结合治疗低中危骨髓增生异常综合征(MDS)的近期临床疗效,及其该治疗方法对输血依赖和生存情况的影响。方法:对22例低中危MDS患者采用中医药为主配合常规造血刺激和支持治疗,疗程至少6个月。结果:完全缓解3例,部分缓解1例,骨髓完全缓解2例,疾病稳定1例,血液学改善10例,治疗失败5例,总有效率77.3%;红细胞输注依赖改善率69.2%,血小板输注依赖改善率40.0%;中位随访43个月,16例尚存活,6例死亡;生存期7个月~270个月,中位生存期34.5个月,死亡原因包括造血衰竭继发重症感染2例,心力衰竭1例,脑出血1例,转化为急性髓系白血病(AML)死亡2例。结论:中西医结合治疗可提高低中危MDS近期临床疗效,改善输血依赖,远期生存情况有待进一步随访。
- 代喜平王国征李慧李琤陈瑶吴远彬胡永珍李达
- 关键词：骨髓增生异常综合征补血方三氧化二砷
- 移植性C57BL/6小鼠FBL-3红白血病模型的建立及其生物学特性被引量：4
- 2010年
- 目的探讨利用国内传代培养的FBL-3细胞建立H-2相合C57BL/6小鼠FBL-3红白血病模型的可行性,并观察模型的生物学特性。方法把FBL-3小鼠红白血病细胞经尾静脉接种C57BL/6小鼠,观察小鼠的生存时间和染色体变化,并对濒死小鼠的肝、脾、肺和肾进行病理检查,部分进行电镜检查。结果静脉接种1×10^3-1×10^7个白血病细胞,C57BL/6小鼠发病率分别为100%;接种细胞的数量与存活时间呈线性关系;白血病细胞主要侵及肝、脾、骨髓、肺和肾组织,糖原染色阳性、氯醋酸染色部分阳性,过氧化物酶、碱性磷酸酶、丁酸染色均阴性。电镜下观察到细胞内病毒样颗粒。脾脏和骨髓细胞染色体多数为非二倍体,只表达H-2b。结论经尾静脉接种FBL-3细胞可建立C57BL/6小鼠红白血病模型。
- 吴远彬周健郭坤元李达代喜平吴顺杰王国征
- 关键词：小鼠
- 万坷联用中药治疗复发难治性弥漫大B细胞淋巴瘤的初步探讨
- 目的:探讨万坷治疗复发难治性弥漫大B细胞淋巴瘤的有效性、安全性及中药减轻万珂不良反应的作用。方法:研究对象:患者,男,65岁,住院号:0108853;确诊为非何杰金氏淋巴瘤NHL(弥漫大B细胞型)(DLBCL)Ⅳa,6年...
- 陈琪李达张赛儿胡永珍吴远彬李慧康颖王国征
- 文献传递
