周光斌
- 作品数：36 被引量：59H指数：5
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 家畜iPS技术研究与应用
- 2016年
- 对建立猪和牛的胚胎干细胞系(Embryonic stem cells,ESCs)的条件进行了摸索和优化,建立了良好的胚胎培养体系、内细胞团分离方法和饲养层的选择;另外分别建立猪和牛的诱导性多能性干细胞系(induced pluripotent stem cells,i PS),并分别对其进行了鉴定;对目前的培养体系进行了优化提高了i PS的效率和发育潜能;尝试以i PS为供体细胞进行核移植,以期获得i PS来源的动物种群。
- 刘蕾陈丽文赵庆国周光斌崔春
- 关键词：重编程
- 小鼠4、8-细胞胚胎单卵裂球体外培养体系的研究
- 2006年
- 以CZB为基础培养液,培养小鼠4、8-细胞胚胎单卵裂球,研究葡萄糖、牛磺酸和猪输卵管上皮细胞共培养在其体外发育中的作用。结果表明:牛磺酸添加与否对4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为29%、30%和14%、14%,无显著性差异(P>0.05)。添加葡萄糖后,4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为36%和19%,有显著提高(P<0.05)。含有葡萄糖而牛磺酸的添加与否对4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为36%、38%和19%、20%,无显著性差异(P>0.05)。各组内4、8-细胞胚胎单卵裂球形成的囊胚细胞数分别为(10.44±1.24～(12.43±1.18)和(7.57±0.97)～(8.48±1.16),均无显著性差异(P>0.05)。4、8-细胞胚胎单卵裂球与猪输卵管上皮细胞共培养,其囊胚发育率分别为47%和26%,囊胚细胞数分别为(17.57±1.13)和(11.43±0.92),均高于单一培养(P<0.05)。
- 胡辛怡周光斌杨中强刘国世朱士恩
- 关键词：畜牧兽医科学基础学科卵裂球体外培养小鼠
- 简易高效的胚胎管内解冻和直接移植法
- 本实验以小鼠的胚胎为模型,研究玻璃化冷冻、管内解冻后直接移植新方法。实验一利用细管法玻璃化冷冻小鼠桑椹胚,在管内配制较大比例0．5mol/L蔗糖溶液,解冻时以稀释玻璃化溶液EFS30。结果表明,解冻后管内停留3-16mi...
- 朱士恩杨其恩杨中强侯云鹏周光斌
- 关键词：胚胎玻璃化冷冻小鼠
- 文献传递
- 哺乳动物胚胎玻璃化冷冻研究进展被引量：5
- 2010年
- 近40年来,利用冷冻保存技术将哺乳动物胚胎长期保存起来,建立"胚胎库"是保护物种资源和拯救濒危动物的有效手段,同时也是加快家畜品种改良、建立动物基因库和实施胚胎移植产业化的重要组成部分,也可以为克隆、转基因等现代生物技术提供丰富的试验材料,使胚胎的供给不受时间和空间的限制。胚胎冷冻保存技术在人类辅助生殖方面也具有广阔的应用前景。本文主要介绍了玻璃化冷冻过程中胚胎冷冻主体承载工具特点和应用,并展望未来哺乳动物胚胎冷冻发展的方向。
- 周光斌张清靖侯云鹏史文清朱士恩
- 关键词：玻璃化冷冻胚胎哺乳动物
- 双重套式PCR对不同取样胚胎性别鉴定灵敏度测试被引量：5
- 2005年
- 目的 :测定双重套式PCR微量扩增体系的灵敏度 ,为附植前遗传学诊断 (PGD)、家畜胚胎性别鉴定等提供技术保障。方法 :以桑椹胚卵裂球为模板进行扩增 ,建立昆明白小鼠特异的SRY ZFX双重套式PCR性别鉴定体系。按卵裂球数量的不同分为五组 ,对应的卵裂球个数分别为 1、2、3、4、5及以上。根据有效扩增结果得出双重套式PCR的灵敏度。结果 :第 1组 (卵裂球个数为 1 ) ,有效检出率为 85 % ( 34 /40 ) ,污染率为 7 5 % ( 3 /40 ) ,漏检率为 7 .5 % ( 3 /40 )。随着卵裂球个数的增多 ,有效检出率逐渐升高 ,而污染率和漏检率则呈逐渐下降趋势。第 5组 (卵裂球达到 5及以上 ) ,有效检出率达到 1 0 0 % ,漏检率为 0。对于第 2、3、4、5组而言 ,有效检出率及漏检率各组间并无显著差异 (P >0 . 0 5 ) ;而第一组与其它各组间 ,有效检出率及漏检率存在显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :双重套式PCR可以有效扩增基因组DNA量约为 1 2pg的模板 ,且扩增片段为单拷贝片段。
- 赵学明朱士恩侯云鹏周光斌
- 关键词：套式PCR卵裂球PGD遗传学诊断胚胎性别鉴定桑椹胚
- ICR小鼠胚胎干细胞建系初步研究被引量：3
- 2012年
- 实验旨在探讨消化方式和胚胎发育阶段对ICR小鼠胚胎干细胞(ES细胞)建系效率的影响。ICR小鼠3.5 d囊胚在饲养层上贴壁后采用单一酶消化或机械化与酶消化法相结合分离隆起的细胞集落,进行传代培养;然后选择二者中较优消化方式对不同发育时期囊胚所形成的细胞集落进行处理。结果表明:采用机械化与胰酶消化相结合的方式,形成的类ES细胞超过7代的比率(85.0%)要显著高于单一的胰酶消化(15.0%)(P<0.05);当用二者相结合的方式对ICR小鼠3.5 d(早期囊胚)、4.0 d(扩张囊胚)和4.5 d(孵化囊胚)所形成的细胞集落进行消化传代培养,三者在贴壁率和形成原代细胞集落率上均无显著差别(P>0.05),但传代超过7代的效率上早期囊胚和扩张囊胚均高于孵化囊胚(P<0.05)。结果提示,采用机械化与酶消化法相结合更适合于3.5～4.0 d ICR小鼠囊胚的ES细胞建系。
- 周光斌孟庆勇丁方荣戴蕴平李秋艳李宁
- 关键词：胚胎干细胞细胞培养碱性磷酸酶ICR小鼠
- 一种卵母细胞冷冻保存的抗氧化添加剂及应用
- 本发明提供一种提高卵母细胞冷冻保存效果的抗氧化添加剂及应用，涉及生殖工程技术领域。本发明提供的一种卵母细胞冷冻保存的抗氧化添加剂，包括卵母细胞玻璃化冷冻解冻液、卵母细胞孤雌激活液、孤雌激活胚胎体外培养液，卵母细胞玻璃化冷...
- 周光斌魏耀宗秦建鹏曹倍嘉潘波
- 小鼠孵化囊胚细管法和OPS法玻璃化冷冻保存技术的研究被引量：8
- 2004年
- 利用小鼠孵化囊胚为模型 ,为猪孵化囊胚的冷冻保存摸索适宜的方法和条件 :在 2 5和 37℃条件下 ,用不同含量的玻璃化溶液 (EFS和EDFS) ,对小鼠孵化囊胚实施细管法和OPS法冷冻保存。在 2 5℃条件下 ,细管一步法冷冻保存后的囊胚恢复率仅为 32 5 %～ 74 4 % ,与对照组 (10 0 % )差异极显著 (P <0 0 1) ;而细管二步法冷冻组用方法C解冻后 ,孵化囊胚恢复率达 87 0 % ,为细管法最佳组 ,但仍与对照组有显著差异 (P <0 0 5 )。在 37℃条件下 ,改用OPS法冷冻后 ,以方法A脱出抗冻保护剂 ,孵化囊胚恢复率最高值为 87 2 % (P <0 0 5 )。当采用EDFS30和EDFS4 0对孵化囊胚冷冻保存后 ,以方法C脱出抗冻保护剂 ,恢复率分别高达 97 8%和 93 3% (P >0 0 5 )。利用细管法和OPS法 2种最佳冷冻 -解冻组获得的 133和 15 4枚胚胎 ,分别移植给 12和 10只假妊娠 3～4d的受体母鼠。使 2种冷冻方法均有 6只妊娠 ,各产仔 2 2和 36只 ,产仔率分别为 35 5 %和 39 1% ,与对照组(39 8% )差异均不显著 (P >0 0 5 )。证明 2种方法对胚胎冷冻后均起到了保护作用。
- 周崇侯云鹏周光斌吴通义金方洪琼花朱士恩
- 关键词：小鼠细管法OPS法玻璃化冷冻
- 小鼠附睾的冷藏和体外受精
- 本实验研究低温冷藏小鼠附睾的方法,并利用卵母细胞透明带打孔技术提高冷藏附睾的精子与新鲜/冷冻卵母细胞的体外受精能力.分别采用屠体法和混合气法(5％CO2、 5％ O2和90％ N2)低温(4℃)冷藏小鼠附睾,将冷藏附睾的...
- 范志强李秀伟刘颖侯云鹏周光斌朱士恩
- 关键词：卵母细胞体外受精
- 文献传递
- 不同冷冻和解冻方法对小鼠桑椹胚发育的影响被引量：3
- 2006年
- 本试验以2种程序化冷冻液和2种玻璃化冷冻液对昆明白系小鼠的桑椹胚进行细管法冷冻保存,比较程序化冷冻-管外解冻和玻璃化冷冻-管内解冻对胚胎体内、外发育的影响。胚胎体外培养结果表明:玻璃化冷冻组及程序化冷冻组胚胎发育率(95.3%￣95.8%,98.9%)无显著(P>0.05)差异。将程序化冷冻、EFS30玻璃化冷冻以及新鲜的胚胎各168枚移植给假孕受体鼠,妊娠受体产活仔率各组间相比(50.8%,58.3%,54.9%)无显著性(P>0.05)差异。结果证明,玻璃化冷冻保存的胚胎管内解冻效果好,为生产中家畜的胚胎移植提供了理论和技术参考。
- 杨中强朱士恩周光斌侯云鹏闫长亮
- 关键词：畜牧学玻璃化桑椹胚小鼠
