姚素艳
- 作品数：32 被引量：120H指数：6
- 供职机构：辽宁医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 成骨诱导后的脐血间充质干细胞与β-磷酸三钙复合植骨材料对兔颅骨缺损的修复作用被引量：6
- 2011年
- 目的探讨成骨诱导后的人脐血间充质干细胞(UCB-MSCs)与β-磷酸三钙(TCP)构成的人工植骨材料修复兔颅骨缺损的作用。方法在无菌条件下用密度梯度离心和贴壁培养法分离培养人UCB-MSCs;取传3代细胞应用条件培养基进行成骨诱导2周后,绘制细胞生长曲线并检测碱性磷酸酶(AKP)、骨钙素(OCN)和钙离子的含量;成骨诱导后UCB-MSCs与β-TCP复合培养后形成人工植骨材料,用扫描电镜观察成骨诱导后的UCB-MSCs在β-TCP表面的生长状况;按人工植骨材料的形状制作兔颅骨全层缺损模型,术后4周行颅骨X线摄片,分析人工材料对骨缺损的修复作用。结果采用Percoll(1.073 g/mL)密度梯度离心和贴壁培养得到的UCB-MSCs大小较为均匀、梭形或星形的成纤维细胞样细胞。成骨诱导前后细胞的生长曲线测定无明显变化;UCB-MSCs内AKP、培养基中的OCN含量和细胞内钙离子的含量与对照组相比均明显增高(P<0.01);成骨诱导的细胞在β-TCP表面生长良好,在细胞周围有白色的钙盐沉积。人工植骨材料植入骨缺损4周后,发现复合材料与颅骨缺损中间大部分被高密度影所充填。结论成骨诱导后的UCB-MSCs呈现成骨细胞特性,在β-TCP表面生长状态良好;与β-TCP构成人工植骨材料具有促进骨缺损修复的作用。
- 郑德宇刘建生杨依勇秦书俭包翠芬姚素艳
- 关键词：成骨诱导脐血间充质干细胞Β-磷酸三钙骨缺损修复
- PcDNA3-hBMP2转染骨髓基质细胞及其稳定表达被引量：13
- 2004年
- 目的 :通过观察转染hBMP 2基因的骨髓基质细胞的生长特性的变化和检测目的基因在受体细胞中表达 ,探讨骨髓基质细胞用作hBMP 2基因的受体细胞的可能性。方法 :在脂质体介导下将hBMP 2基因导入体外培养的骨髓基质细胞中 ,用G418筛选获得阳性细胞 ,分别应用原位杂交技术和酶联免疫吸附方法检测目的基因在受体细胞内的存在与表达。结果 :在mRNA水平可检测到目的基因在阳性细胞中进行了转录 ,在培养基中 ,用ELISA的方法能检测到目的基因在骨髓基质细胞中进行了表达 ,并分泌到培养基中。从细胞的生长曲线上 ,可知细胞的倍增时间并没有因为目的基因的导入而改变 ,其生长时间也与正常的细胞相近。结论 :骨髓基质细胞可以用作hBMP 2基因的受体细胞 ,表达并分泌hBMP 2蛋白质 ,也可作为骨组织工程学中的种子细胞。
- 郑德宇秦书俭姚素艳
- 关键词：人骨形态发生蛋白-2转染骨髓基质细胞
- 知母皂甙对Aβ_(25-35)激活的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α和iNOS表达的抑制作用
- 2005年
- 目的观察知母皂甙(SAaB)对Aβ25-35激活的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α和iNOS表达的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法分离小鼠腹腔巨噬细胞进行培养,用10μg/L的Aβ25-35刺激细胞,对照组同时加入不同浓度(10μg/L、30μg/L、100μg/L)的SAaB共同孵育。采用ELISA法、Griess反应和免疫组织化学(SP)方法分别检测TNF-α分泌量、iNOS表达、NO的生成量。结果Aβ25-35能激活小鼠腹腔巨噬细胞,使其分泌的TNF-α增多、iNOS表达上调、NO的生成量增加。SAaB能有效地抑制此变化,并呈剂量依赖关系。结论这一作用的机制可能与其抑制激活的巨噬细胞释放炎症因子有关。
- 刘卓刘魁元姚素艳金英郑德宇
- 关键词：知母皂甙AΒ25-35巨噬细胞INOSTNF-Α
- 脂肪间充质干细胞的分离培养和鉴定被引量：5
- 2010年
- 背景:近年来的研究发现,在脂肪组织中也存在这与骨髓间充质干细胞类似的间充质干细胞。脂肪组织可以从美容吸脂中获得,来源丰富,取材方便,蕴藏着巨大的临床应用价值。目的:分离培养人脂肪间充质干细胞并检测其生物学特性。方法:用离心的方法获得人脂肪间充质干细胞,接种于含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养基中行贴壁培养。并进行细胞形态学观察,绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞表面抗原。结果与结论:采用消化、离心分离获得的脂肪间充质干细胞大小较为均匀,呈梭形或星形的成纤维细胞样。细胞生长曲线测定表明接后第5天细胞进入指数增生期,至第9天后数量减少;流式细胞仪检测表明超过90%细胞为CD29、CD45和CD105阳性。提示体外分离培养脂肪间充质干细胞生长稳定,可作为组织工程的种子细胞。
- 姚素艳杨依勇秦书俭郑德宇
- 关键词：脂肪间充质干细胞流式细胞仪免疫细胞化学
- 续断皂苷Ⅵ诱导的脂肪间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架治疗大鼠桡骨骨缺损被引量：6
- 2016年
- 摘要目的：探讨续断皂苷Ⅵ诱导的大鼠脂肪间充质干细胞（ADMSCs）联合纳米羟基磷灰石／壳聚糖（n-HA／CS）人工骨材料修复大鼠桡骨骨缺损的效果。方法：应用细胞表面抗原鉴定ADMSCs。取传至第3代的ADMSCs，培养基中加入续断皂苷Ⅵ诱导15d。诱导后的ADMSCs和n-HA／CS复合培养获得的植骨材料修复大鼠桡骨骨缺损模型，于术后第4、12周骨缺损区行X光拍片并按照改良Gray标准进行结果分析。H—E染色，并按改良Nilsson的组织学评分标准进行成骨效应评估。结果：ADMSCs呈成纤维细胞样贴壁生长，高表达CD44。续断皂苷Ⅵ诱导后的细胞呈三角形、矮方形及多边形。茜素红染色可见散在的红色阳性结节，骨钙素表达阳性，阳性细胞率85．46％±5．22％。骨缺损修复术后4周移植材料已部分被吸收。术后12周实验组部分新生骨皮质恢复连续，开始出现骨髓腔。改良Gray评分显示，在各时间点实验组均高于各对照组，差异有统计学意义。第4周行H-E染色可见植入支架部分被吸收，实验组支架间隙和周围均充满细胞。第12周实验组出现类似骨单位样结构，骨基质中为淡粉色。改良Nilsson评分显示实验组在术后的4周和12周均高于各个对照组，有统计学意义。结论：续断皂苷Ⅵ能够诱导大鼠ADMSCs分化为成骨细胞，复合n-HA／CS支架能很好修复骨缺损。
- 赵刚刘学元姚素艳郑德宇
- 关键词：脂肪间充质干细胞骨缺损
- 左旋多巴治疗前后帕金森大鼠脑内γ-氨基丁酸A受体的变化被引量：4
- 2015年
- 目的探讨帕金森病治疗前后脑内皮质、黑质、纹状体部位γ-氨基丁酸A受体(gamma aminobutyric acid A receptor,GABAAR)的分布变化规律。方法首先制备PD大鼠模型,经检测成模后,随机分为对照组和治疗组,分别给予生理盐水和左旋多巴甲酯+苄丝肼治疗4周,治疗后经行为学检测,选择成功的治疗后的PD大鼠,于治疗后4、8、12周分别留取大鼠脑皮质、黑质和纹状体部位的标本,进行免疫组化检测,对比PD大鼠治疗前后脑内上述部位GABAAR的分布、表达情况变化。结果治疗后4、8、12周的免疫组化检测结果经统计学分析,脑内黑质和皮质部位的GABAAR阳性表达的细胞治疗后比治疗前减少。而纹状体部位的GABA_AR阳性表达的细胞数量无明显变化。结论 (1)左旋多巴甲酯+苄丝肼治疗PD大鼠,可以使症状改善。(2)PD大鼠治疗前后脑内不同部位GABAAR的变化不同。
- 王晓巍崔宏福姚素艳刘建生郑德宇
- 关键词：Γ-氨基丁酸Γ-氨基丁酸A受体
- 绿原酸对Aβ_(25-35)诱导的大脑皮层细胞损伤的保护作用机制被引量：3
- 2014年
- 目的：研究绿原酸（CHA）对淀粉样β蛋白25-35（Aβ25-35）激活巨噬细胞导致大脑皮层细胞损伤的保护作用机制。方法采用生后0~3 d左右的Sprague-Dawley（SD）大鼠乳鼠，取出大脑皮层细胞然后做体外培养。培养8 d后与小鼠腹腔巨噬细胞共同培养2 d，再加入10μmol/L Aβ25-35制作阿尔茨海默病细胞模型。实验分为单独培养组、共同培养组、单独培养Aβ组、共同培养Aβ组和共同培养CHA组分别作用0.5、1、2、4、6 h后检测各组的结果。细胞损伤程度通过观察细胞形态和记数判定。p38分裂原激活蛋白激酶（p38MAPK）、有丝裂原激活蛋白激酶活化的蛋白激酶2（MAPKAPK-2）和热休克转录因子（HSP27）三种蛋白磷酸化的表达水平由Western blot检测。通过免疫荧光观察微管相关蛋白-2（MAP-2）的表达。结果 CHA显著抑制Aβ25-35处理所致的颗粒细胞密度的减少并且改善细胞的形态。Aβ25-35可以使p38MAPK的磷酸水平明显增加，在2h的时候磷酸化水平达到最高峰，4h后就逐渐下降，而使MAPKAPK-2和HSP27的磷酸化水平降低，2h降低最明显。结论 CHA通过抑制Aβ25-35诱导巨噬细胞释放炎症因子激活的p38MAPK信号转导通路，从而可以起到保护神经细胞的作用。
- 周静赵宏秦书俭姚素艳郑德宇
- 关键词：绿原酸大脑皮层细胞热休克蛋白27
- 中药当归主要活性成分阿魏酸钠抑制淀粉样β蛋白激活炎症因子的量剂反应被引量：13
- 2005年
- 目的:观察中药当归提取的主要活性成分阿魏酸钠对淀粉样β蛋白激活的小鼠腹腔巨噬细胞α肿瘤坏死因子、诱导型一氧化氮合酶和一氧化氮水平的影响。方法:实验于2004-03/10在锦州医学院药理实验室和解剖实验室完成。选择8～10周龄的小鼠36只,随机分为6组,每组6只。正常对照组:巨噬细胞接种24h后用培养基继续培养。淀粉样β蛋白组:巨噬细胞接种24h后在培养基中加入经老化处理的终浓度为10μmol/L的淀粉样β蛋白。淀粉样β蛋白+10,100,500μmol/L,1mmol/L阿魏酸钠组:在加入淀粉样β蛋白的同时加入10,100,500μmol/L,1mmol/L的阿魏酸钠共同孵育。培养48h后采用酶联免疫吸附法、免疫组织化学方法和Griess反应分别检测肿瘤坏死因子α分泌量、诱导型一氧化氮合酶表达和一氧化氮的生成量。结果:36只小鼠均进入结果分析。①巨噬细胞的肿瘤坏死因子α分泌量:淀粉样β蛋白组明显高于正常对照组[(281.54±14.85),(17.55±4.84)ng/L,(P<0.01)]。淀粉样β蛋白+10,100,500μmol/L,1mmol/L阿魏酸钠组可以不同程度地减少由淀粉样β蛋白诱导产生的肿瘤坏死因子α的分泌量[(238.05±6.21),(186.90±7.44),(117.55±8.08),(71.77±10.50)ng/L,P<0.01],且有明显剂量依赖关系(P<0.05)。②巨噬细胞的一氧化氮生成量:淀粉样β蛋白组明显高于正常对照组[(85.04±6.16),(26.10±3.25)μmol/L,(P<0.01)],淀粉样β蛋白+10,100,500μmol/L,1mmol/L阿魏酸钠组可以不同程度地减少由淀粉样β蛋白诱导产生的一氧化氮的量[(69.80±4.96),(54.52±3.45),(43.88±4.04),(33.83±3.13)μmol/L,P<0.01],且有明显剂量依赖关系(P<0.05)。③诱导型一氧化氮合酶的表达:正常对照组只有零星细胞染色阳性;而淀粉样β蛋白组多数细胞胞浆被染成黄褐色。各剂量组的阿魏酸钠可以不同程度地抑制由淀粉样β蛋白激活巨噬细胞造成的诱导型一氧化氮合酶的表达,该抑制作用呈明显剂量依赖性�
- 姚素艳张宝云郑德宇金英刘卓
- 关键词：淀粉样Β蛋白巨噬细胞阿魏酸
- 阿魏酸钠对淀粉样β蛋白致神经细胞损伤的保护作用被引量：2
- 2005年
- 目的:通过检测阿魏酸钠对联合培养的神经细胞和巨噬细胞中神经细胞的乳酸脱氢酶漏出量和微管相关蛋白-2的影响,观察阿魏酸钠对淀粉样β蛋白激活巨噬细胞引起神经细胞损伤的保护作用。方法:实验于2004-05/12在锦州医学院药理实验室和解剖实验室完成。选择8～10周龄的小鼠进行巨噬细胞培养,出生两三天的大乳鼠进行神经细胞培养。单独培养的神经细胞和巨噬细胞:将加入10μmol/L淀粉样β蛋白和未加入淀粉样β蛋白的巨噬细胞上清液分别移入单独培养的神经细胞中,通过Hoechst33258染色检测神经细胞的凋亡百分比。联合培养的神经细胞和巨噬细胞:联合培养24h后,加入10μmol/L的淀粉样β蛋白,阿魏酸钠组同时加入不同浓度(10μmol/L,100μmol/L,500μmol/L,1mmol/L)阿魏酸钠共孵育。48h后,采用免疫组织化学方法和乳酸脱氢酶检测试剂盒检测微管相关蛋白-2表达水平和乳酸脱氢酶漏出量。结果:将淀粉样β蛋白激活的巨噬细胞上清液移入到单独培养的神经细胞48h后,可使凋亡神经细胞的百分比明显增加,从正常11.3%增加到74.0%,(P<0.01)。在巨噬细胞和神经细胞联合培养中,淀粉样β蛋白组与空白对照组相比,乳酸脱氢酶漏出量明显增加,由375nkat/L增加到2859nkat/L,微管相关蛋白-2表达阳性的神经元数目相应减少,与淀粉样β蛋白组相比,阿魏酸钠(10μmol/L,100μmol/L,500μmol/L,1mmol/L)能显著地降低乳酸脱氢酶漏出量,使微管相关蛋白-2表达阳性的神经细胞数目明显增加,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:①淀粉样β蛋白是通过激活巨噬细胞,使其释放毒性物质,从而引起神经细胞的损伤。
- 姚素艳邹金发李淑云郑德宇刘卓金英
- 关键词：淀粉样Β蛋白巨噬细胞阿魏酸神经元
- 阿魏酸钠抑制Aβ_(25-35)激活小鼠巨噬细胞引起的神经细胞损伤
- 2009年
- 目的探讨阿魏酸钠(SF)抑制淀粉样β蛋白(Aβ25-35)激活巨噬细胞引起的神经细胞损伤及其机制。方法单独培养小鼠腹腔巨噬细胞以及与神经细胞联合培养,加入10μmol/L的Aβ25-35,保护组加入不同浓度的SF。单独培养的巨噬细胞,采用Western blot和ELISA法分析P38 MAPK水平和检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)生成量。神经细胞和巨噬细胞联合培养,采用免疫组织化学方法和LDH检测试剂盒检测微管相关蛋白2(MAP-2)的表达水平和乳酸脱氢酶(LDH)漏出量。结果SF能显著降低Aβ25-35诱导的腹腔巨噬细胞核蛋白P38 MAPK的含量及细胞的TNF-α水平,能显著地降低LDH漏出量,使MAP-2表达水平明显增加,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论SF可抑制Aβ25-35诱导的P38 MAPK通路,使TNF-α水平降低,对神经细胞具有保护作用。
- 姚素艳金英郑德宇
- 关键词：阿魏酸钠淀粉样Β蛋白丝裂原活化蛋白激酶P38
