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伪狂犬病毒gB基因的表达及单克隆抗体的制备被引量：1: 2014年; 为了研究伪狂犬病毒gB基因的原核表达并制备其单克隆抗体,试验采用含有伪狂犬病毒(PRV)gB蛋白抗原表位的基因作为模板进行扩增,得到大小为588 bp的扩增产物,将其克隆到表达载体pET-32a(+)中,转化表达菌Transetta(DE3),经诱导表达得到目的蛋白;以纯化后的重组gB蛋白为抗原,免疫Balb/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞。结果表明:表达的重组gB蛋白约为44 ku,以包涵体形式存在,具有良好的反应原性;获得的2株杂交瘤细胞均能够稳定分泌抗gB蛋白的特异性单克隆抗体(McAb)。; 邱佳符芳柴政姜福成田华彬郎月坤郑楠李曦张彦龙; 关键词：伪狂犬病毒原核表达单克隆抗体

抗副猪嗜血杆菌猪源化嵌合抗体的构建、表达及其活性鉴定: 副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS），属巴斯德杆菌科，非溶血性的、具有NAD依赖性的革兰氏阴性菌。副猪嗜血杆菌属于条件性致病菌，它可以在应激的情况下入侵机体而引起严重的全身性疾病，即格拉瑟氏（...; 姜福成; 关键词：副猪嗜血杆菌抗体治疗杆状病毒表达; 文献传递

溶瘤新城疫病毒D90株反向遗传操作系统的建立及其对肿瘤的治疗: 新城疫病毒属于禽副粘病毒科成员，已表明一些新城疫毒株具有明显溶瘤活性。在与临床和临床研究中，利用自然分离的溶瘤型新城疫病毒对肿瘤进行治疗是安全、有效的。本研究以自然源性的溶瘤型新城疫病毒D90株为研究对象，在对NDV-D...; 柴政符芳张雪云姜福成王香玲郑楠李曦

猪源抗体基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达: 2015年; 为制备原核表达猪源重组抗体,本研究利用FITC标记的山羊抗猪Ig G标记猪外周血淋巴细胞,通过流式细胞术筛选出Ig G+B细胞。以提取的Ig G+B细胞总RNA反转录制备的c DNA为模板,通过PCR扩增猪抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),将扩增的可变区与本实验室前期克隆的猪源抗体恒定区编码序列通过Linker序列[(Gly)4Ser]3连接,构建全长的猪源抗体编码基因(H-linker-L)。将该基因克隆于原核表达载体p ET-28a中进行原核表达及纯化。Western blot鉴定结果表明,该重组蛋白能够被兔抗猪Ig G-HRP所识别,表明构建的重组抗体为猪源抗体。本研究为特异性猪源抗体的制备以及猪病的防制奠定了基础。; 王香玲柴政田华彬符芳姜福成郑楠张雪云郭佃磊李曦; 关键词：B淋巴细胞

副猪嗜血杆菌单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定: 2014年; 为筛选具有临床诊断价值的副猪嗜血杆菌（H.parasuis）单克隆抗体（MAb）,本研究采用H.parasuis 5型强毒株（HPS-5）免疫BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术制备了一株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株.Western blot结果表明该MAb能够特异性识别所有H.parasuis标准菌株;免疫共沉淀技术与蛋白质谱分析显示该MAb所识别的蛋白为ATP结合盒转运蛋白（ABCT）家族的寡肽透过酶（OppA）;利用MAb对噬菌体12肽库进行淘选,8个阳性噬菌体克隆展示有“KTPAE-R”保守序列,对应于H.parasuis SH29755株和SH0165株的469位～475位的氨基酸残基.对OppA氨基酸序列比对结果表明H.parasuis与其它10种猪常见细菌病病原序列一致性为9.1％～74.5％,本研究结果为进一步研究H.parasuis感染的病原学诊断建立了良好的基础.; 杨玉菊郑楠符芳柴政姜福成王香玲张雪云王卓李曦; 关键词：副猪嗜血杆菌病原学诊断

猪源化嵌合抗体在杆状病毒中的表达被引量：1: 2014年; 为构建具有活性的抗副猪嗜血杆菌(H.parasuis)鼠-猪嵌合单链抗体(scFv),本研究以H.parasuis单克隆抗体(MAb)杂交瘤细胞1D8株的总RNA制备的cDNA为模板,通过RT-PCR分别扩增抗MAb轻链、重链可变区序列及猪抗体轻链和重链恒定区序列,并将这些片段经重叠延伸PCR分别扩增可变区与恒定区的轻链与重链的序列。将扩增的两个目的基因克隆于双向表达载体pFast-Bac-Dual中,并进一步以其构建的重组杆粒,转染Sf9昆虫细胞筛选制备稳定表达的抗H.parasuis猪源化嵌合的scFv重组杆状病毒。Western blot、ELISA、体外和体内的抑菌试验表明,抗H.parasuis猪源化嵌合scFv具有中和活性和抑制细菌增殖的能力,可以为进一步的H.parasuis的抗体治疗奠定基础。; 杨玉菊姜福成柴政符芳郑楠王香玲郭殿磊李曦; 关键词：副猪嗜血杆菌杆状病毒表达

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姜福成