孙娟
- 作品数：10 被引量：4H指数：2
- 供职机构：上海市血液中心更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 耐受型DC/TGF-β联合诱导的iTreg细胞能有效抑制自身免疫性关节炎被引量：2
- 2017年
- 目的初步探讨通过成熟耐受型DC(mtDC)与转化生长因子-β(TGF-β)联合诱导的诱导型调节性T细胞(i Treg细胞)对自身免疫性关节炎的抑制作用。方法在体外,对CD4+CD25-T细胞进行TGF-β诱导和mtDC细胞扩增,获得iTreg_(mtDC)细胞。通过流式细胞术、细胞计数、CBA等方法检测iTreg_(mtDC)细胞的表型、对CD4+T效应细胞增殖的抑制作用。在体内实验中,iTreg_(mtDC)细胞以1×10~6个细胞/ml的剂量过继性输注入胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠体内,并通过关节病变评分、病理组织病变评分、血清中细胞因子、总anti-CⅡIgG的分泌情况来评价iTreg_(mtDC)细胞对CIA的抑制作用。结果在体外,通过TGF-β和mtDC细胞两轮诱导/扩增后,Treg_(mtDC)细胞得以大量扩增,并能持续表达高水平的Foxp3。在体外,与iTreg细胞相比,Tregmt DC细胞有更强的抑制效应T细胞增殖的能力。在体内,与iTreg细胞相比,Treg_(mtDC)细胞的过继性输注能更有效地减少发病关节处的炎性浸润,进一步改善CIA的症状;对CIA小鼠体内细胞因子的分泌有更强的调节能力,能更显著地减少炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-17(IL-17)的分泌,并促进大量TGF-β产生;更明显地降低总anti-CⅡIgG的分泌量;进而更有效地抑制CIA病程的发展。结论与iTreg相比,iTreg_(mtDC)细胞能通过调节体内细胞因子和抗CⅡIgG的分泌更有效地抑制CIA病程发展。
- 杨洁孔宁杨懿铭谢如锋王志成孙娟蒋雪玉
- 关键词：胶原诱导型关节炎
- 黄芩苷通过调节Treg/Th17比例抑制红细胞输注小鼠模型中的IgG的生成
- 目的自1970年代起,我国便广泛应用茵陈汤于预防母胎Rh和ABO血型不合引起的新生儿溶血病。开展这项研究是为了评估茵陈汤中的1种主要成分黄芩苷能否抑制红细胞免疫并阐明其潜在的机制。方法我们将人类红细胞与佐剂脂多糖(LPS...
- 蒋雪玉刘李栋孙娟杨洁向东杨懿铭高跞谢如锋
- 雷帕霉素处理后的树突状细胞对感染后输血相关急性肺损伤保护作用
- 2022年
- 目的 探讨雷帕霉素处理后的树突状细胞(dendritic cells, DC)干预感染后输血相关急性肺损伤(transfusion-related acute lung injury, TRALI)策略的可行性。方法 1)通过细菌脂多糖(LPS)联合抗-H2Kd诱导小鼠TRALI的发病,并测定小鼠肺脏,肾脏,脾脏和脑组织等器官湿干比及肛温,建立TRALI小鼠模型;2)体外诱导小鼠骨髓来源的DC细胞,并经雷帕霉素(10nM)处理24 h;3)小鼠经尾静脉注射或不注射雷帕霉素或雷帕霉素处理后的DC,1 h后腹腔注射LPS,24 h后注射抗-H2Kd诱导TRALI发病,观察并记录小鼠死亡情况,并通过小鼠体温、肺脏湿干比、胸腔积液重量以及肺组织病理切片分析小鼠TRALI发病后情况。结果 通过对不同浓度和不同容量的抗-H2Kd溶液诱导效果的比较,本研究选择0.1 mg/kg LPS联合4.5 mg/kg抗-H2Kd(输注体积100μL)诱导的小鼠模型为TRALI小鼠模型。该模型小鼠TRALI发病后,能显著增加了肺脏湿干比,体温显著降低。使用雷帕霉素处理后DC对TRALI发病小鼠进行干预后,死亡率显著降低,小鼠肺组织病变显著改善,且效果优于雷帕霉素处理组;与TRALI发病组相比,干预组胸腔积液重量呈现显著减少(P<0.05),但肺脏湿干比和体温差异无统计学意义。结论 通过LPS联合抗体能有效诱导稳定且典型的TRALI小鼠模型,可见先后存在感染性炎症和输血相关炎性物质是TRALI发病的决定性因素。同时,雷帕霉素处理后DC对感染后TRALI具有保护作用,有望成为干预TRALI恶化的潜在的细胞治疗策略。
- 高跞杨懿铭谢如锋龚裕春孙娟蒋雪玉杨洁
- 关键词：树突状细胞
- 可作为细胞治疗制品的CD8调节性T细胞的体外诱导扩增方法
- 2018年
- 目的建立1种可用于细胞治疗制品的CD8调性T细胞（CD8＋Reularory T cell,Treg）的体外诱导扩增方法,并检测所获Treg细胞性质及功能的稳定性。方法通过免疫磁珠从人外周血PBMC中分选出CD8＋T细胞,在抗人-CD3/CD28磁珠与外源性IL-2激活下,联合使用不同组合的诱导因子：转化生长因子1（TGF-β1）、雷帕霉素（Rapamycin,RAPA）和全反式维甲酸（All-trans retinoic acid,ATRA）,多克隆诱导扩增出CD8＋Treg细胞,比较不同诱导组CD8＋Treg细胞扩增能力、表型、细胞内因子分泌、抑制功能等情况,筛选出最合适的诱导组细胞,进行体外多轮重刺激扩增并检测其功能及性质的稳定性。结果对不同组CD8＋Treg细胞扩增数量、表型、细胞内因子分泌情况分析得出：TGF-β1和雷帕霉素联合诱导组细胞高表达Foxp3和CD103,扩增能力强,对同种异基因CD4效应T细胞抑制功能可达90%以上、炎性因子IL-2和IFN-γ分泌细胞比例低、在炎性条件下不分泌IL17A和分泌很低量的IFN-γ。体外进行四轮重刺激,扩增倍数最低可达10000倍,且扩增所获Treg细胞活性高,Foxp3表达稳定,各轮抑制功能无显著差别。对Treg抑制作用机制研究发现,Treg通过竞争性消耗内源性IL-2起到部分抑制功能。结论 CD8＋Treg细胞体外扩增诱导方法的建立将填补了目前CD8＋Treg培养方法上的空白。体外大量扩增的CD8＋Treg细胞具有治疗自身免疫病、GVHD等疾病的应用潜力,可作为1种细胞治疗制品运用于临床。同时,通过利用原本在输血中废弃的PBMC,诱导出功能稳定的CD8＋Treg细胞,在一定程度上提高了血液的利用效率和促进了成份输血的进程。
- 孙娟霍小娜杨懿铭杨懿铭蒋雪玉李振华李振华谢如锋高跞刘李栋范华骅朱永明
- 关键词：成份输血
- 人外周血来源的CD8 Tregs对小鼠慢性结肠炎模型的治疗效果研究
- 目的研究人外周血PBMC来源的CD8Tregs对DSS诱导的小鼠慢性结肠炎模型的治疗效果。方法本实验室通过分离外周血PBMC中的CD8 T细胞,将其在CD3、CD28抗体的刺激下,以及IL-2存在的情况下,用TGF-β1...
- 蒋雪玉孙娟杨懿铭杨洁
- 文献传递
- 人外周血来源的CD8 Tregs对小鼠慢性结肠炎模型的治疗效果研究
- 蒋雪玉孙娟杨懿铭杨洁
- 体外诱导多轮扩增的CD8+调节性T细胞:1种具有潜在治疗自身免疫病能力的Treg细胞
- 目的自身免疫病(autoimmune disease,AID)是1类发病进程缓慢、严重危害人类健康的免疫系统疾病。研究发现自身免疫病患者体内Treg细胞的表型和功能均有一定程度的缺失,动物模型中Treg过继输注可显著降低...
- 孙娟杨懿铭杨洁蒋雪玉谢如锋
- 文献传递
- 一种免疫抑制剂诱导调节性CD8+T细胞体外扩增的方法
- 本发明涉及一种免疫抑制剂诱导调节性CD8<Sup>+</Sup>T细胞体外扩增的方法，所述的方法为CD8<Sup>+</Sup>T细胞在TGF‑β和RAPA的联合诱导下扩增。本发明还提供一种具有免疫抑制功能的CD8<Su...
- 杨洁范华骅孙娟杨懿铭谢如锋蒋雪玉刘李栋
- 文献传递
- CD8+FOXP3+Treg细胞来源外泌体输注胶原诱导关节炎小鼠模型中的治疗作用及其机制
- 目的初步探讨CD8FOXP3Treg细胞来源外泌体在自身免疫动物模型中的作用及其机制。方法采用超速离心的方法对CD8Treg细胞培养上清进行分离获得外泌体成分。分别采用NTA、Western Blotting和透射电镜的...
- 杨懿铭杨洁谢如锋高跞孙娟蒋雪玉
- 文献传递
- TGF-β1对CD4＋CD25＋T细胞体外扩增与功能的影响被引量：2
- 2013年
- 本文探讨了提高体外大量扩增调节性T细胞(Treg)及其免疫抑制功能的方法。免疫磁珠分选的人的CD4+CD25+T细胞,用抗-CD3/CD28包被的免疫磁珠刺激,加入外源IL-2和免疫抑制剂雷帕霉素(Rapa),分为对照组(未加TGF-β1)和实验组(加TGF-β1),培养12d。结果显示,实验组表达HLA-DR与Foxp3的细胞百分比高于对照组,实验组的平均荧光强度也高于对照组;实验组的免疫抑制功能强于对照组;实验组分泌的炎症细胞因子显著减少。因此,人CD4+CD25+T细胞在抗CD3/CD28包被的免疫磁珠体外刺激扩增过程中加入TGF-β1可以上调CD4+CD25+T细胞Foxp3和HLA-DR表达量,提高其纯度和免疫抑制功能。
- 李振华杨燕杨懿铭霍小娜孙娟李玮杨洁任亚娜谢如锋范华骅
- 关键词：调节性T细胞转化生长因子人类白细胞抗原免疫抑制功能
