宋维威
- 作品数：9 被引量：19H指数：2
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划教育部长江学者奖励计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 建立多发骨折-脂多糖两次打击急性肺损伤动物模型及其相关研究被引量：11
- 2006年
- 目的:建立多发骨折-脂多糖两次打击急性肺损伤小鼠动物模型并观察其组织病理学、血气各项指标的变化,进而对多发骨折并发感染后诱发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的病理生理机制进行初步探讨。方法:实验于2005-01/09在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤中心实验室完成。选择昆明种小鼠62只随机分为5组(空白对照组2只、脂多糖5mg组15只、脂多糖16mg组15只、双侧股骨骨折组15只、双侧股骨骨折复合脂多糖5mg组15只)。再按3,6,12,24,48h时间点将每组分为5个时相点,每时相点3只。空白对照组:麻醉后先行腹主动脉抽血做血气分析,动脉放血处死小鼠开胸取肺脏分别做组织病理学变化分析。脂多糖5mg组和脂多糖16mg组:腹腔内注射脂多糖(5mg/kg和16mg/kg),分别于注射后3,6,12,24,48h时做上述各指标检测。双侧股骨骨折组:麻醉后钳夹法双侧股骨中段闭合骨折造模,按相同时相点做上述各指标检测。双侧股骨骨折复合脂多糖5mg组:在骨折造模后6h腹腔注射脂多糖(5mg/kg)此后于相同时相点检测上述指标。结果:纳入动物62只,均进入结果分析。①各组肺组织病理学结构变化评分的比较:空白对照组(0.00±0.00)分,脂多糖5mg组(4.60±3.36)分,脂多糖16mg组(7.60±3.36)分,双侧股骨骨折组(2.00±2.55)分,双侧股骨骨折复合脂多糖5mg组(8.40±3.91)分。各组间评分有明显差异(F=4.48,P<0.05)。其中脂多糖16mg组和双侧股骨骨折复合脂多糖5mg组与空白对照组、双侧股骨骨折组和脂多糖5mg组比较差异显著(P<0.05)。②各组动脉血气指标变化比较:脂多糖5mg组主要改变为轻度代谢性酸中度,少数合并呼吸性酸中度或低氧;脂多糖16mg组和双侧股骨骨折复合脂多糖5mg组为明显代谢性酸中度,多数合并呼吸性酸中度或低氧改变,与空白对照组、双侧股骨骨折组、脂多糖5mg组各组的组间比较表明,脂多糖16mg
- 王晋王建民王爱民赵玲王燕宋维威
- 关键词：骨折脂多糖类肺损伤动物
- Fgfr3基因374点突变致软骨发育不全小鼠模型的建立与分析被引量：1
- 2004年
- 目的建立模拟人成纤维细胞生长因子3型受体(fibroblastgrowthfactorreceptor3,Fgfr3)374号甘氨酸至精氨酸点突变小鼠模型并进行初步表型分析。方法应用双重PCR法及分子克隆技术构建小鼠Fgfr3-Gly374Arg点突变打靶载体,对胚胎干细胞(embryonicstemcells,ES细胞)进行打靶后,采用G418、Ganciclovir正负双向选择和Southern杂交对打靶ES细胞进行筛选,选发生正确同源重组的ES细胞进行胚泡显微注射,携带Neo基因的Fgfr3-Gly374Arg点突变鼠与EIIa-Cre转基因鼠杂交后,得到只含Fgfr3-Gly374Arg点突变鼠。用PCR法进行了基因型鉴定,并应用骨骼染色、组织学等技术对其表型进行了初步分析。结果Fgfr3-Gly374Arg点突变小鼠体小尾短、头大,前额圆凸,骨骺生长板区明显缩短、结构紊乱,肥大软骨细胞区也有明显减少。同时伴有多数雌性小鼠不孕、子宫、卵巢变小、乳腺发育不良等变化。结论成功地建立了模拟人Fgfr3-Gly374Arg点突变所致软骨发育不全的小鼠模型。
- 王建民杜晓兰李翠玲尹良军陈波孙晶苏楠赵玲宋瑞华宋维威陈林邓初夏
- 关键词：点突变FGFR3软骨发育不全ES细胞打靶载体
- 低温脑保护仪对失血性休克家兔的保护效应
- 2004年
- 目的 探讨低温脑保护仪对失血性休克的保护作用。方法 采用改良Wigger’s休克模型 ,观察自行研制的低温脑保护仪对休克动物的存活时间及生命功能指标的影响。结果 与对照组相比 ,低温脑保护仪能降低脑组织 60 %脂质过氧化物的产生 ,减缓心率和呼吸 ,从而降低氧耗。结论 低温脑保护仪能有效减轻脑组织损伤 ,显著延长休克动物存活时间。
- 宋维威陆松敏王建民
- 关键词：脑保护失血性休克存活时间脑组织损伤家兔
- 角质细胞生长因子受体腺病毒表达载体在脂多糖所致肺泡上皮细胞损伤修复中的应用被引量：3
- 2005年
- 目的观察KGFR腺病毒表达载体在脂多糖(LPS)致A549细胞损伤模型中转基因表达KGFR的情况及其促使A549细胞对抗LPS损伤的效果,为基因治疗急性肺损伤探索有效途径。方法KGFR腺病毒表达载体感染LPS致伤前后的A549细胞,通过形态学观察转基因作用对LPS致伤前后A549细胞的影响,并运用western blot检测KGFR腺病毒表达载体在LPS致伤前后的A549细胞中转基因表达KGFR蛋白情况。结果KGFR腺病毒表达载体感染LPS致伤前后的A549细胞,转基因组对抗LPS致伤作用明显,western blot检测表明KGFR腺病毒表达载体转基因表达KGFR蛋白效果显著(P<0.05)。结论KGFR腺病毒表达载体能够转基因表达KGFR蛋白,并具备转基因治疗急性肺损伤的能力。
- 刘斌剑王建民陈林宋瑞华赵玲宋维威苟元彬
- 关键词：腺病毒载体急性肺损伤脂多糖
- 低氧诱导因子-1α条件性敲除载体的构建被引量：1
- 2004年
- 目的 通过建立低氧诱导因子 1α(hypoxiainduciblefactor 1α ,HIF 1α)条件性敲除载体 ,并在体外验证引入的LoxP介导的同源重组等情况 ,为最终建立HIF 1α条件性敲除小鼠模型奠定基础。方法 以含有neo、tk基因的pLoxPneo载体为基本骨架 ,用涵盖 3、4、5、6号外显子的HIF 1α基因组片段 ( 7.6kb)为构建载体的同源DNA片段 ,通过引入LoxP等步骤 ,最终建立旨在条件性敲除HIF 1α第 5号外显子的条件性敲除载体。结果 经酶切 ,测序和在体外细菌中用cre介导的重组等方法证明成功地构建了HIF 1α的条件性敲除载体。结论 成功地构建了HIF 1α的条件性敲除载体 ,为今后进一步获得HIF
- 赵玲宋瑞华孙晶苏楠苟元彬宋维威王建民陈林
- 关键词：低氧诱导因子-1Α同源重组CRE基因
- 脂多糖致小鼠急性肺损伤组织病理变化与角质细胞生长因子受体表达的关系被引量：1
- 2004年
- 目的 :观察急性肺损伤 (ALI)时小鼠肺组织损伤程度与角质细胞生长因子受体 (KGFR)表达水平的关系 ,为基因治疗急性肺损伤提供依据。方法 :建立脂多糖 (LPS)造成的小鼠肺损伤模型和Ⅱ型肺泡上皮细胞 (A5 49细胞 )损伤模型 ,通过病理分析、反转录聚合酶链反应 (RT PCR)和荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)观察肺组织损伤程度与KGFR表达水平的关系。结果 :LPS造成轻度、中度和重度肺损伤时肺组织KGFR表达水平逐步下降 ,各种损伤程度之间KGFR表达存在显著差异 (P <0 .0 5 )。A5 49细胞的KGFR表达变化不明显 (P >0 .0 5 )。结论 :随着肺损伤程度的加重 ,肺组织KGFR表达水平逐次减低 。
- 刘斌剑王建民陈林宋瑞华赵玲宋维威
- 关键词：脂多糖小鼠急性肺损伤角质细胞受体表达
- KGFR腺病毒表达载体在LPS所致肺泡上皮细胞损伤修复中的应用
- 目的观察K GFR腺病毒表达载体在LPS致A549细胞损伤模型中转基因表达KGFR的情况及其促使A549细胞对抗LPS损伤的效果,为基因治疗急性肺损伤探索有效途径。方法KGFR腺病毒表达载体感染LPS致伤前后的A549细...
- 刘斌剑王建民陈林宋瑞华赵玲宋维威苟元彬
- 文献传递
- fgfr3基因敲除载体的构建及中靶ES细胞的筛选与鉴定
- 2005年
- 目的构建成纤维细胞生长因子3型受体(nbroblast growth factor receptor-3,FGFR3)基因敲除载体,并对中靶ES细胞进行筛选与鉴定,为最终建立FGFR3条件性敲除小鼠模型或FGFR3功能减低小鼠,研究FGFR3在小鼠骨骼等器官发育、损伤修复过程中的作用打下基础。方法在分析小鼠fgfr3基因组DNA序列结构的基础上,设计并构建了针对小鼠fgfr3外显子9、10的条件性基因敲除载体,采用电穿孔法转染ES细胞,用G418与Gancyclovir对电转的ES细胞进行正负筛选,最后对ES细胞克隆做Southern与PCR鉴定。结果对ES细胞正负筛选后共挑取180个克隆；用5′端探针进行Southern杂交鉴定后发现2株阳性克隆；经PCR检测发现这两株克隆fgfr3的8号内含子内的LoxP序列丢失。结论得到两株fgfr3基因中只含有neo基因的ES细胞克隆,fgfr3的表达是降低的,可用来建立FGFR3功能降低的小鼠。
- 苏楠宋维威王建民宋瑞华刘志君苟元彬杜晓兰陈林
- 关键词：同源重组ES细胞
- Bek腺病毒表达载体的构建及其在哺乳类动物细胞中的表达被引量：2
- 2006年
- 目的构建Bek腺病毒表达载体并观察该载体在成纤维细胞中转基因表达FGFR2-Ⅲc的情况,为研究骨骼发育打下基础。方法利用AdEasy-1腺病毒载体系统构建Bek腺病毒表达载体;该载体感染成纤维细胞后,通过荧光定量PCR(FQ-PCR)检测Bek腺病毒表达载体转基因表达FGFR2-ⅢcmRNA情况。结果Bek腺病毒表达载体感染成纤维细胞后,成纤维细胞有绿色荧光表达,荧光定量PCR检测表明Bek腺病毒表达载体转基因表达FGFR2-ⅢcmRNA效果明显(P<0·05)。结论Bek腺病毒表达载体构建成功,能够转基因表达FGFR2-ⅢcmRNA,为研究骨骼发育和成骨机制提供了基础。
- 刘斌剑王建民陈林宋瑞华赵玲宋维威苟元彬
- 关键词：成纤维细胞生长因子受体腺病毒载体
