张凯琳
- 作品数：16 被引量：39H指数：5
- 供职机构：贵阳医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢性氟中毒对大鼠神经细胞线粒体分裂蛋白Drp1表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的研究慢性氟中毒大鼠大脑皮质神经细胞线粒体分裂基因动态相关蛋白1（Drp1）表达的改变。方法将120只sD大鼠（1月龄、体重100—120g）以单纯随机法分为3组（对照组、低氟组和高氟组），每组40只，各组染毒剂量以饮水中加入氟剂量计算：分别为0、10和50mS／L；染毒3个月和6个月时，每组分别处死20只。采用免疫组织化学方法和免疫蛋白印迹法（western—blotting）检测线粒体分裂蛋白Drp1表达。结果3个月时，Drpl的蛋白免疫组织化学强阳性表达神经细胞个数发生了改变，与对照组[（36．3±5．8）个]相比较，低氟组[（34．7±4．1）个]的改变无统计学意义（t=1．5，P〉0．05），而高氟组[（45．0±d．7）个]表达增加（t=8．8，P〈0．05）；western—blotting法蛋白印迹平均灰度值也具有相同的改变，与对照组（0．59-t-O．03）相比，低氟组（0．62±0．03）和高氟组（0．71±0．02）的水平升高（t值分别为0．02、0．11，P值均〈0．05）。6个月时，Drpl的蛋白免疫组织化学强阳性表达神经细胞个数发生了改变，与对照组[（33．2±4．4）个]相比较，低氟组[（36．6±3．8）个]和高氟组[（39．4±4．2）个]升高（t值分别为3．5，6．3，P值均〈0．05）；western—blotting法蛋白印迹平均值也有改变，与对照组（0．65-t-O．06）相比，低氟组（0．804-0．09）和高氟组（0．764-0．08）的水平升高（t值分别为0．1、0．1，P值均〈0．05）。结论高剂量染氟可造成分裂基因Drp1表达改变，慢性氟中毒神经细胞损伤可能与线粒体分裂亢进有关。
- 楼迪栋张凯琳潘际刚秦双立刘燕斐于燕妮官志忠
- 关键词：氟中毒神经元
- 慢性氟中毒对大鼠大脑皮质神经细胞活性氧水平和线粒体融合的影响被引量：14
- 2011年
- 目的 观察慢性氟中毒对大鼠大脑皮质神经细胞活性氧（ROS）水平和线粒体融合的影响,并分析二者间的关系.方法 选择SD大鼠120只,按性别和体质量随机分为3组：对照组、低氟组、高氟组,每组40只.对照组大鼠自由饮用自来水（含氟量〈0.5 mg/L）;低、高氟组分别饮用氟化钠（NaF）配制的含氟量为10.0、50.0 mg/L的自来水.分别于3、6个月时处死大鼠,采集大脑组织制作冰冻切片,采用荧光测定法检测皮质神经细胞ROS水平和线粒体形态变化.结果 3、6个月时各组大鼠大脑皮质神经细胞ROS荧光计数和Ⅱ型线粒体计数水平比较,差异有统计学意义（F值分别为3.07、3.06,3.05、3.07,P均〈0.05）.3个月时,与对照组（10.43±5.98、4.12±3.86）比较,高氟组大鼠大脑皮质神经细胞ROS荧光计数（25.48±6.09）和Ⅱ型线粒体计数（20.47±6.09）明显升高（P均〈0.05）,而低氟组（11.67±3.49、6.68±3.48）未见明显改变（P均〉0.05）;6个月时,与对照组（25.26±6.41、20.26±6.41）比较,低、高氟组大鼠大脑皮质神经细胞ROS荧光计数和Ⅱ型线粒体计数（63.02±8.15、65.60±7.40,49.33±8.61、53.10±6.95）均明显增高（P均〈0.05）.ROS荧光计数与Ⅱ型线粒体计数间呈明显正相关（r值分别为0.93、0.81,P均〈0.05）.结论 摄入过量的氟导致大鼠大脑皮质神经细胞氧化应激水平升高,线粒体融合功能障碍,这些改变与染氟时间和剂量密切相关.线粒体异常改变的机制可能与慢性氟中毒引起的氧化应激水平升高有关.
- 楼迪栋刘燕斐张凯琳于燕妮官志忠
- 关键词：氟化物中毒活性氧线粒体
- 慢性氟中毒对大鼠神经细胞线粒体融合基因表达及线粒体形态的影响被引量：5
- 2013年
- 目的研究慢性氟中毒对大鼠神经细胞线粒体融合基因Mfnl表达及线粒体形态的影响。方法将60只1月龄清洁级SD大鼠以单纯随机法分为3组，每组20只，雌雄各半，分笼喂养。以饮水中加入氟剂量的不同，将大鼠分为对照组、低氟组、高氟组，染毒剂量分别为0、10和50mg／L，分别在饲养3、6个月后，观察氟斑牙程度。采用透射扫描电子显微镜观察线粒体形态。用western—blotting和免疫组织化学方法检测线粒体融合基因Mfnl表达。结果染氟组大鼠出现不同程度的氟斑牙，3个月时低氟组以I度氟斑牙为主（16只），高氟组发生I度、Ⅱ度氟斑牙分别为11、9只；6个月时低氟组发生I度、Ⅱ度、Ⅲ度氟斑牙分别为14、6、0只，高氟组为6、13、1只；对照组均未出现。低氟组、高氟组在3个月时尿氟分别为（3．30±1．18）、（5．10±0．35）mg／L（F=3．18，P〈0．05）；6个月时分别为（4．16±1．39）、（5．70±1．70）mg／L（F=3．17，P〈0．05）。3个月时，对照组大鼠大脑皮质神经细胞线粒体形态变化不明显，染氟组大鼠神经细胞线粒体均出现球状空泡状改变。Mfnl的蛋白免疫组织化学强阳性表达神经细胞数发生了改变，与对照组[（53．0±4．54）个]相比较，低氟组[（51．09±6．25）个]的改变无统计学意义（t=1．7，／9〉0．05），而高氟组[（59．71±5．64）个]增加，差异有统计学意义（t=2．1，P〈0．05）；weste．Flq-blotting法测得蛋白印迹平均吸光度值也具有相同的改变，与对照组（1．21±0．18）相比，低氟组（1．22±0．26）的改变无统计学意义（t=1．1，P〉0．05），高氟组（1．66±0．20）的水平升高，差异有统计学意义（t=2．1，P〈0．05）。6个月时低氟组、高氟组大鼠大脑皮质神经细胞线粒体出现嵴消失、球状空泡状改变，对照组无明显改变。Mfnl的蛋白免疫组织化学强阳性�
- 楼迪栋潘际刚张凯琳秦双立刘燕斐于燕妮官志忠
- 关键词：氟中毒
- 慢性氟中毒大鼠肝脏中P-糖蛋白和细胞核因子-κB的表达水平被引量：1
- 2014年
- 目的:研究慢性氟中毒大鼠肝脏中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和细胞核因子κB(Nuclear factorκB,NF-κB)的表达变化,探讨氟中毒肝脏损害的发病机理。方法:将60只SD大鼠随机分为3组,即对照组、小剂量染氟组和大剂量染氟组,分别给予自来水、加10 mg/L和50 mg/L氟(Na F)的的自来水喂养6个月观察3组大鼠氟斑牙程度及尿氟,同时取大鼠肝脏;采用蛋白印迹方法检测P-gp和NF-κB的蛋白表达水平,实时荧光定量PCR方法检测NF-κB mRNA表达水平。结果:6个月后,小剂量染氟组、大剂量染氟组大鼠氟斑牙程度及尿氟含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);小剂量染氟组、大剂量染氟组大鼠肝脏中P-gp和NF-κB蛋白和mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);小剂量染氟组、大剂量染氟组NF-κB mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:慢性氟中毒引起大鼠肝脏中P-gp和NF-κB表达明显升高,这可能与氟中毒性肝脏损伤的发生机制有关。
- 张凯琳吴昌学官志忠
- 关键词：氟中毒P-糖蛋白细胞核因子ΚB
- 慢性氟中毒大鼠肾脏跨膜转运蛋白多糖-4和细胞核因子-κB改变被引量：1
- 2013年
- 目的观察慢性氟中毒大鼠肾脏中跨膜转运蛋白多糖（Syndecan）-4和细胞核因子（NF）-KB的表达变化，探讨氟中毒肾损害的发病机制。方法60只SD大鼠按体质量和性别随机分为3组：对照组，小、大剂量染氟组，自由饮用含氟化钠（NaF）〈0．5、10．0、50．0mg／L的自来水，实验期为6个月。采用蛋白印迹方法和实时荧光定量PCR方法检测肾脏Syndecan-4和NF—KB的蛋白和mRNA表达。结果与对照组大鼠肾脏中Syndecan--4蛋白表达水平和NF—KB蛋白表达水平[（100．0±8．1）％、（100．0±10．7）％]相比，小、大剂量染氟组大鼠肾脏的Syndecan-4蛋白表达水平[（198．5±5．6）％、（209．2．4±13．O）％]和NF—KB蛋白表达水平[（284．4±11．1）％、（343．2±2．9）％]均明显升高（P均〈0．05）；小、大剂量染氟组大鼠肾脏中Syndecan-4mRNA表达（0．431±0．058、0．453±O．065）均高于对照组（0．128±0．026，P均〈0．05）。结论慢性氟中毒大鼠肾脏Syndecan-4的表达上调增加肾内NF-KB表达，从而引发肾脏损伤，该过程可能参与慢性氟中毒肾损伤的发生。
- 张凯琳楼迪栋官志忠
- 关键词：氟化物中毒
- 晚期糖基化终末产物及其受体信号传导通路在慢性氟中毒神经损伤中的作用
- 慢性氟中毒不仅损害牙齿和骨骼,同时还能引起神经系统等全身各组织器官的广泛损伤。但是,关于慢性氟中毒引起神经系统损伤的发生机制尚未完全阐明清楚。近年来,发现神经信号转导通路的改变可能是慢性氟中毒致神经损伤的机制之一。为了深...
- 张凯琳
- 关键词：慢性氟中毒SH-SY5Y细胞
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- 慢性氟中毒大鼠大脑皮质神经细胞线粒体融合分裂基因转录水平观察被引量：6
- 2012年
- 目的观察慢性氟中毒大鼠大脑皮质神经细胞线粒体融合分裂基因mRNA含量和活性氧（ROS）水平，探讨其在氟中毒线粒体损伤中的作用。方法选取SD大鼠120只，按体重随机分为3组：对照组、低氟组、高氟组j每组40只。在饮水中加入不同剂量的氟化钠，含氟量分别为〈0．5、10、50mg／L，饲养3、6个月。采用线粒体ROS荧光探针法检测大鼠大脑皮质神经细胞线粒体ROS水平，实时荧光定量PCR法检测线粒体融合基因Mfnl及分裂基因Fisl、Drpl转录水平。结果3个月时，与对照组[10．434-5．98、（3．4±0．6）×10。、（8．8±1_4）×10、（1．24-0．2）×10。]比较，低氟组大鼠大脑皮质神经细胞线粒体ROS水平（11．674-3．49）未见明显改变（P〉0．05），线粒体融合分裂基因Mfnl、Drpl、FislmRNA表达水平未见明显改变[（3．1±0．3）×104、（6．7±2．7）×10、（5．0±0．9）×10，P均〉0．05]；而高氟组大鼠大脑皮质神经细胞线粒体ROS水平（25．48±6．09）显著升高（P〈0．05），线粒体融合分裂基因Mfnl、Drpl、FislmRNA表达水平[（1｜0-4-0．2）×10“、（3．04-1．6）×100、（8．9±3．6）×10。]明显升高（P均〈0．05）。6个月时，与对照组[25．264-6．41、（3．0±0．8）×10。、（5．14-0．8）×10’、（2．8±0．7）×10。]比较，低、高氟组大鼠大脑皮质神经细胞线粒体ROS水平（63．024-8．15、65．60±7．40）明显升高，线粒体融合基因MfnlmRNA表达水平[（3．04-0．4）×10‘、（4．0±0．9）×10。]显著降低，分裂基因Fisl、DrplmRNA表达水平[（2．0±0．8）×106、（4．0±0．6）×100，（3．8-I-1．3）×100、（1．3-t-O．2）×10。]明显升高（P均〈0．05）。结论摄人过量的氟导致大鼠大脑皮质神经细胞ROS水平升高，线粒体融合基因转录降低、分裂基因转录升高，这种改变与染氟时间和剂量呈正相关。线粒体融合分裂基
- 楼迪栋刘燕斐秦双立张凯琳于燕妮官志忠
- 关键词：氟化物中毒基因线粒体
- 慢性氟中毒大鼠大脑皮质神经细胞线粒体损伤及其分裂基因表达改变
- 本研究检测慢性氟中毒大鼠皮质神经细胞线粒体形态改变和线粒体分裂基因Fis1的表达，为深入阐明氟中毒性神经细胞损伤机制提供依据。据研究结果推测可知：摄入过量的氟可能通过诱导高ROS产生过多，引起分裂基因Fis1表达升高，从...
- 楼迪栋张凯琳秦双立刘燕斐于燕妮官志忠
- 关键词：慢性氟中毒线粒体
- 氟对SH-SY5Y细胞活性氧水平和线粒体融合影响被引量：2
- 2014年
- 目的观察氟对人脑神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y细胞)体外培养细胞活性氧水平和线粒体融合的影响。方法在SH-SY5Y细胞中加入0.4、4 mmol/L NaF,孵育6、12、24和48 h;利用MitoTracker和ROS荧光染色试剂盒对线粒体和氧自由基进行染色。结果 NaF作用6、12、24、48 h时,与对照组比较,0.4、4 mmol/L氟处理组SH-SY5Y细胞内ROS染色强阳性细胞计数[分别为(15.1±1.4)、(12.8±2.5)、(22.6±2.4)、(30±3.1)和(32.5±1.9)、(38.1±2.2)、(69.3±3.1)、(84.3±3.5)个/100细胞]和II型线粒体细胞计数[分别为(13±1.4)、(15±1.7)、(22.9±1.9)、(23.7±1.6)和(15.2±2.3)、(23.8±1.8)、(29.1±4)、(47.7±3.3)个/100细胞]明显升高(P<0.05)。结论摄入过量的氟导致SH-SY5Y细胞氧自由基水平升高,线粒体呈分裂状,呈时间和剂量效应关系。
- 楼迪栋郑丹潘际刚张凯琳罗亚于燕妮官志忠
- 关键词：氟化物中毒活性氧线粒体
- 慢性氟中毒对大鼠肝、肾和脑皮质细胞线粒体DNA4．8kb的影响被引量：7
- 2013年
- 目的观察慢性氟中毒对大鼠肝、肾和脑皮质细胞线粒体DNA4．8kb大片段的影响，探讨线粒体氧化呼吸链在慢性氟中毒发病机制中的作用。方法将60只SD大鼠按体质量随机分为3组（每组20只）：对照组、低氟组和高氟组，分别饮用加入0、10、50mg／L氟化钠的自来水。6个月时．采用实时荧光定量PCR方法检测大鼠肝、肾、脑皮质细胞线粒体DNA4．8kb存在水平。结果低、高氟组大鼠肝脏（2．1X10-3、1．6×10-3）、肾脏（1．7×10-3、1．4×10-4）和脑皮质（1．5×10-5、1．3×10-5）细胞线粒体DNA4．8kb存在水平较对照组（2．9×10-3、2．0×10-3、1．1×10-4）明显下降（P均〈0．05），且高氟组肾脏DNA4．8kb存在水平较低氟组明显降低（P〈0．05）。结论慢性氟中毒可导致大鼠肝、肾和脑皮质细胞线粒体DNA4，8kb大片段缺失，造成线粒体DNA结构受损，引起线粒体氧化呼吸链障碍。
- 楼迪栋张凯琳秦双立刘燕斐刘艳洁官志忠
- 关键词：氟中毒线粒体DNA
