张利
- 作品数：41 被引量：151H指数：7
- 供职机构：大连市中心医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金大连市卫生局课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 地塞米松对重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响被引量：8
- 2012年
- 目的研究地塞米松对重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡凋亡的作用。方法通过胆胰管注入脱氧胆酸钠制备重症急性胰腺炎大鼠模型,设立对照组、模型组和地塞米松治疗组。显微镜观察并进行胰腺组织病理学评分;TUNEL方法测定胰腺腺泡细胞凋亡指数;RT-PCR技术检测胰腺组织Bax与Caspase-8 mRNA水平表达;免疫组织化学检测Bax与Caspase-8蛋白水平的表达。结果同模型组比较,地塞米松组大鼠胰腺组织病理损伤明显减轻;腺泡细胞凋亡指数显著升高[(11.10±2.42)vs(6.50±1.58),P<0.05];Bax mRNA与Bax蛋白水平显著升高分别为[(1.370±0.297)vs(1.046±0.337),P<0.05;(457.20±36.56)vs(339.40±26.73),P<0.05]。结论地塞米松可上调促凋亡基因Bax表达而诱导腺泡细胞凋亡,使胰腺组织病理学改变减轻,改善了病情。
- 张桂信陈海龙纪军张利尚东
- 关键词：地塞米松重症急性胰腺炎
- 成人自体心肌干细胞体外高效扩增及特异性鉴定
- 2012年
- [目的]建立一种稳定、高效的成人自体心肌干细胞体外培养扩增及特异性鉴定方法。[方法]手术中取下的心脏组织标本,通过胶原酶消化的方法获得细胞,使用自体血清进行贴壁培养和传代的方法纯化细胞,细胞增殖至3代后进行RT-PCR基因表达检测,流式细胞表面标记检测及染色体核型分析的鉴定。[结果]通过本实验的方法可以在成人心肌组织中分离和纯化心肌干细胞,并在体外可大量增殖,至3代细胞可增殖至5×107。RT-PCR鉴定其具有全能干细胞因子Nanog、Oct-4、Sox-2、Rex-1的mRNA表达,及心肌转录因子Nkx2.5和GATA4的mRNA和蛋白表达;表达间质干细胞表面标记CD29、CD90、CD105;不表达造血干细胞表面标记CD45和人免疫抗原HLA-DR;且培养后46条染色体无移位和缺失等染色体突变。[结论]通过本研究确立了一种稳定、高效的成人自体心肌干细胞体外培养,扩增和特异性鉴定的方法,为自体心肌干细胞移植技术的临床应用奠定重要的基础。
- 纪军张利桑丽敏林海龙何学志吴园园颜培实孙喜琢
- 关键词：自体组织心肌干细胞流式细胞术核型分析
- 黏蛋白1基因转染DC对乳腺癌细胞MCF-7裸鼠移植瘤的免疫抑制作用被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨黏蛋白1(mucin 1,MUC1)基因转染DC对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:体外诱导培养健康成人DC,应用脂质体转染法将pc DNA3.1-MUC1转染DC,ELISA法检测转染后DC分泌细胞因子IL-12和TNF-α的能力,LDH释放法检测基因转染后DC诱导特异性CTL对乳腺癌MCF-7细胞的杀伤活性。应用MUC1基因转染DC、空质粒转染DC、及生理盐水皮下注射治疗人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤,观测其对肿瘤生长的抑制作用。结果:转染pc DNA3.1-MUC1的DC分泌IL-12、TNF-α的能力较转染空质粒DC明显增强[IL-12:(202.52±29.61)vs(10.83±1.02)pg/ml;TNF-α:(349.07±79.42)vs(9.26±1.52)pg/ml,均P<0.01];转染pc DNA3.1-MUC1的DC诱导产生特异性CTL,对人乳腺癌MCF-7细胞具有更明显的杀伤活性,效靶比为10∶1、5∶1和2.5∶1时的杀伤率分别达到56.2%、38.9%和25.8%,显著高于对照组CTL(均P<0.01)。MUC1基因转染DC对乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤生长抑制作用明显强于空质粒转染DC组(P<0.05)。结论:MUC1基因转染DC可以诱导特异性CTL,对乳腺癌MCF-7细胞具有更强的抗肿瘤免疫效应。
- 尹良伟马海英张利王贺双刘宇于环祝艳华伍建林
- 关键词：MUC1基因乳腺癌免疫效应
- 肿瘤坏死因子mRNA与细胞角蛋白20mRNA在结肠癌淋巴微转移中表达关联性的研究
- 贾友鹏王玉杰史炼钢张利于镜泊徐晧孙琳
- 课题背景：结肠癌的复发、转移是结肠癌患者生存率无法得到有效提高的主要方面，尤其是淋巴微转移，直接与结肠癌患者的术后辅助治疗和预后判定密切相关。细胞因子失衡被认为是恶性肿瘤生长、浸润、转移过程中必要的条件之一，肿瘤坏死因子...
- 关键词：
- 关键词：结肠癌微转移
- PTEN基因的克隆及其在HepG2细胞中的表达被引量：2
- 2006年
- 目的克隆人抑癌基因PTEN全长cDNA,构建其真核表达载体并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达。方法采用RT-PCR法从人正常肝组织中扩增PTEN全长cDNA,将之与pMD18-T Simple Vector连接、测序,获得PTEN基因。将该基因与pcDNA3·1(+)载体连接,构建pcDNA3.1-PTEN真核表达载体。用该载体转染HepG2细胞,RT-PCR检测PTEN的表达。结果酶切和测序证实PTEN基因克隆和真核表达载体构建成功。HepG2-PTEN细胞中PTEN mRNA的表达显著高于未转染的HepG2细胞。结论人抑癌基因PTEN在人肝癌细胞系HepG2细胞中能够高效、稳定地表达,为其在肝癌基因治疗研究中的应用奠定了基础。
- 吴园园张利肖继贤朱晓钰纪军孙喜琢张众
- 关键词：肿瘤抑制基因PTEN基因分子克隆真核表达载体
- 胃癌术后辅助化疗疗效及预后因素分析
- 目的:评估胃癌根治术后辅助化疗的疗效，同时筛选胃癌根治术后与预后有关的临床病理因素，以期在临床中指导胃癌术后辅助化疗及预后，提高生存率。
方法:回顾性分析2002年8月～2006年12月期间在大连医科大学附属第一医...
- 张利
- 关键词：胃癌根治手术辅助化疗生存率预后评估临床病理
- Rho激酶在小型猪白介素-1β介导的冠状动脉痉挛中的作用机制被引量：20
- 2006年
- 目的探讨Rho激酶途径在冠状动脉痉挛发病中的作用机制。方法小型雄性家猪随机分为对照组(n=8)和模型组(n=8),冠状动脉外膜分别包裹吸附含生理盐水和白介素(IL)-1β琼脂糖微粒悬液的纸巾。2周后,采用冠状动脉造影观察管腔狭窄程度及5-羟色胺诱发冠状动脉痉挛情况。测定冠状动脉包裹血管段Rho激酶mRNA表达、肌球蛋白结合亚基磷酸化表达及光镜病理学改变。结果冠状动脉外膜包裹IL-1β血管段发生不同程度的管腔狭窄,5-羟色胺可诱发病变血管段痉挛。模型组与对照组相比,Rho激酶的mRNA表达病变血管段明显上调[(98·20±7·66)%对(63·70±4·26)%,P<0·05];肌球蛋白轻链磷酸酶的肌球蛋白结合亚基磷酸化表达升高(25485±4745对6510±779,P<0·05)。光镜可见病变血管段内膜增殖及炎症细胞聚集现象。结论Rho激酶参与IL-1β介导的冠状动脉痉挛的发生,其可能是通过增加肌球蛋白结合亚基磷酸化水平,抑制肌球蛋白轻链磷酸酶活性及加强钙增敏途径所致。
- 关启刚曾定尹孙喜琢苗志林周旭晨何学志韩凤桐程颖张利
- 关键词：冠状血管痉挛白细胞介素1
- 慢性酒精中毒性肌病线粒体损伤的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的研究在慢性酒精中毒性肌病中的线粒体损伤情况并探讨受损原因。方法建立大鼠慢性酒精中毒性肌病模型,采用分光光度计法、Western Blot和流式细胞仪检测实验组大鼠骨骼肌各抗氧化指标(SOD、GSH-Px、MDA)、线粒体膜蛋白细胞色素C、线粒体膜流动性和线粒体膜电位的变化。结果实验组大鼠骨骼肌中MDA含量升高,SOD、GSH-Px活性降低,细胞色素C的表达减少,线粒体膜流动性下降,线粒体膜电位降低。结论慢性酒精中毒性肌病中线粒体发生损伤,提示与活性氧(ROS)增多有关。
- 王剑锋齐珊珊王永平钟丽珍张利初海鹰
- 关键词：慢性酒精中毒性肌病线粒体膜流动性线粒体膜电位细胞色素C
- 不同胆汁酸诱导AR42J细胞凋亡与坏死的作用被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨7种不同胆汁酸对AR42J胰腺腺泡细胞的损伤作用,检测在各种胆汁酸作用下胰腺腺泡细胞的存活率和凋亡/坏死的改变.方法:以大鼠AR42J胰腺腺泡细胞系为研究对象,应用MTT法检测7种不同胆汁酸对细胞存活率的影响和剂量与时间依赖性,采用光学显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学改变与凋亡/坏死的变化,流式细胞术AV/PI双染法检测细胞的凋亡/坏死率.结果:CA,GCA和GDCA在0.1-1.0mmol/L内对AR42J细胞不具有损伤作用;而DCACDCA和LCA分别从0.3mmol/L开始,TDCA从0.4mmol/L开始,呈剂量依赖性对AR42J细胞产生损伤作用.0.8mmol/LCA组细胞凋亡率与坏死率同CON组无明显区别(1.2%vs0.9%;1.0%vs1.0%,均P>0.05);0.4mmol/LDCA组细胞凋亡率和坏死率分别为45.2%和8.9%;0.8mmol/LDCA组细胞凋亡率和坏死率分别为18.6%和45.4%.
- 张桂信陈海龙纪军张利吴圆圆王永鹏尚东
- 不同的风湿免疫性疾病患者免疫功能差异分析被引量：5
- 2020年
- 目的探讨分析不同风湿免疫性疾病患者的免疫功能差异。方法选取2016年1月至2017年9月大连市中心医院风湿免疫病房收治的类风湿性关节炎(RA)、强直性脊柱炎(AS)、骨关节炎(OA)和痛风性关节炎(AG)患者62例为研究对象,另选取同期25例健康人作为对照组。比较不同风湿免疫性疾病患者外周血T淋巴细胞亚群、Treg细胞数量和PD-1表达的差异。结果与对照组比较,RA、AS、AG组患者CD4^+T细胞明显升高,CD8^+T细胞所有组均明显下降,所有组CD4^+/CD8^+比值与对照组比较均明显升高。发现Treg细胞在每组中变化也不同,与对照组比较,RA组患者Treg细胞没有变化,AS、OA、AG组患者Treg细胞明显升高。还检测了CD4^+T细胞和CD8^+T细胞上PD-1的表达。与对照组比较,AS组和OA组CD4^+T细胞上PD-1表达明显升高,而RA组和AG组无明显变化,而每一组患者CD8^+T细胞上PD-1表达均出现明显降低。结论不同风湿免疫性疾病的免疫病理损伤及组织器官类型不一样,其自身免疫特点也不尽相同,但共同点为免疫功能紊乱,不同的风湿免疫性疾病中T淋巴细胞亚群、Treg和PD-1均存在明显的不同,免疫调节异常是风湿免疫性疾病发生发展的重要因素。
- 潘艳艳吴园园蔡红娇纪军张利
- 关键词：风湿免疫性疾病PD-1TREG淋巴细胞亚群
