张媛媛
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 供职机构：天津医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- p53基因治疗研究的新进展被引量：6
- 2006年
- 张媛媛付丽
- 关键词：P53基因治疗相对分子质量肿瘤基因治疗人类肿瘤内含子
- 个体性反义RNA对乳腺癌细胞突变p53基因表达的特异性封闭作用被引量：1
- 2007年
- 目的研究针对 p53基因突变的个体性反义 RNA 对乳腺癌突变 p53基因的特异性封闭作用。方法通过免疫细胞化学 LSAB 法染色、聚合酶链反应-单链构象多态性分析及测序确定人乳腺癌细胞系 MDA-MB-231中 p53突变位点,构建针对该突变点的反义表达载体并制备其反义RNA。原位杂交技术检测反义 RNA 与细胞内突变 p53基因的特异性结合;在阳离子脂质体介导下将反义 RNA 转染细胞;以免疫细胞化学 LSAB 法染色及细胞生长抑制率观测反义 RNA 作用时效;Western blot 检测 p53蛋白的表达;四甲基偶氮唑盐法检测转染细胞的生长活性;流式细胞术检测转染细胞的细胞周期分布;原位缺口末端标记法检测转染细胞的凋亡情况。结果人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的 p53第8外显子(exon8)有突变,据此位点构建反义表达载体[pGEM3zf(+/-)p53exon8]。原位杂交结果显示反义 RNA(ASp53exon8′RNA)在细胞质内有阳性杂交信号;于转染后48 h 反义 RNA 封闭效果最显著,突变 p53蛋白(mt-p53)的表达受抑制,细胞增殖能力下降,G_2/M 期阻滞。结论针对 p53基因突变位点制备的个体性反义 RNA 可特异性封闭乳腺癌细胞突变 p53基因的表达。
- 王亚红孙玉兰许少峰张媛媛张霖张彬冯玉梅牛瑞芳付丽
- 关键词：乳腺肿瘤DNA突变分析
- 突变p53基因的反义拯救研究
- 2008年
- 目的研究p53基因的个体性反义RNA联合野生型p53(wt-p53)对乳腺癌细胞的增殖抑制作用,探讨体外双重基因治疗的意义。方法将wt-p53重组质粒pC53-SN3转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,G418筛选稳定表达wt-p53的细胞克隆(WTp53-231细胞);体外构建针对MDA-MB-231细胞p53基因突变外显子8(exon8)的反义表达载体[pGEM3zf(+/-)p53exon8],并制备其反义RNA(ASp53exon8’RNA);以MDA-MB-231细胞为对照,阳离子脂质体介导下ASp53exon8’RNA转染WTp53-231细胞;转染48h后,用MTT法检测细胞生长活性,TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫细胞化学LSAB染色法检测p53蛋白的表达。结果ASp53exon8’RNA转染WTp53-231细胞与ASp53exon8’RNA转染MDA-MB-231细胞比较,前者可进一步抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡。结论p53基因的个体性反义RNA联合wt-p53共转染可协同抑制乳腺癌细胞增殖,达到"反义拯救"基因治疗目的。
- 孙玉兰王亚红张媛媛许少峰付丽
- 关键词：乳腺肿瘤P53基因基因治疗
- 反义核酸个体性治疗乳腺癌的P53基因药物研究
- 付丽许少峰张媛媛王亚红孙玉兰冯玉梅牛瑞芳孙惠
- 该项目成功制备了针对人乳腺癌细胞MDA-MB-231突变p53基因第8外显子的个体性反义表达载体，体外细胞实验从不同角度、层次显示了“反义拯救”双基因较单基因治疗乳腺癌的优势，应用体内动物实验进行了更深入的研究并尝试性的...
- 关键词：
- 关键词：乳腺癌反义核酸
