张鑫
- 作品数：68 被引量：309H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学社会学更多>>
- 猪地方流行性坏死杆菌病的诊断与防治被引量：1
- 2004年
- 张波张鑫
- 关键词：症状剖检变化坏死梭杆菌
- 猪丁型冠状病毒S1-CTD相互作用宿主蛋白的筛选和鉴定
- 2022年
- 猪丁型冠状病毒纤突蛋白S1亚基C端结合域(S1-CTD)是诱导中和抗体产生的主要区域,为研究与其相互作用的宿主蛋白,采用HEK-293T真核表达系统表达并纯化了S1-CTD,提取了猪回肠上皮细胞膜蛋白,通过免疫共沉淀筛选了可能与S1-CTD相互作用的蛋白并进行质谱分析,发现32个疑似相互作用的宿主蛋白。构建其中可能与S1-CTD互作的蛋白KIF1 binding protein(KIFBP)的真核表达质粒,通过免疫共沉淀和激光共聚焦验证上述宿主蛋白与S1-CTD是否存在相互作用,结果表明KIFBP和S1-CTD之间存在相互作用,共同转染时在细胞质共定位。进一步研究表明,过表达KIFBP能够有效降低病毒RNA水平和病毒滴度,其中mRNA水平降低了约70%,病毒滴度降低了10^(1.6)TCID_(50)。综上,本研究筛选并鉴定出一种与PDCoV S1-CTD相互作用的宿主蛋白KIFBP,为了解PDCoV的致病机制提供了理论基础。
- 汤荣锋范前进郭龙军张鑫石达时洪艳陈建飞冯力
- 关键词：相互作用
- 美国研究型大学图书馆年度报告调研及启示被引量：11
- 2015年
- 通过对56所美国研究型大学图书馆网站的调研,对其发布年度报告的时间范围、形式等进行了梳理和总结,分析年度报告的内容,并探讨年度报告的作用及对于我国高校图书馆的启示。
- 张鑫王荣坤
- 关键词：图书馆
- 猪氨基肽酶N病毒结合受体核心区对TGEV在ST细胞中复制影响的研究
- 2023年
- 为研究与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)结合的猪氨基肽酶N(pAPN)受体核心区对TGEV复制以及细胞功能的影响,本研究检索并分析pAPN与TGEV的结合位点,结果显示,敲除pAPN aa668~aa963对其酶活性无影响。因此,利用CRISPR/Cas9技术构建pAPN与TGEV结合位点敲除细胞系,经PCR和western blot鉴定结果显示,正确构建一株敲除pAPN aa668~aa963的ST细胞系,即敲除pAPN 15-21外显子,命名为KO-ST-15。采用CCK-8和细胞划痕方法检测KO-ST-15细胞的增殖和细胞迁移活性,结果显示,敲除pAPN 15-21外显子对ST细胞增殖和迁移活性均无显著影响。利用RT-qPCR和IFA检测KO-ST-15感染TGEV后病毒复制拷贝数和N蛋白的表达,结果显示,敲除pAPN 15-21外显子可极显著抑制TGEV在ST细胞系中的复制(P<0.001)。利用RT-qPCR检测KO-ST-15感染TGEV后炎症相关基因转录水平变化,结果显示,TGEV感染后KO-ST-15中的IL-6、IL-8和NLRP3(NOD-like receptor protein 3)mRNA转录水平无显著变化,但RIG-I和MDA5的转录水平显著上调(P<0.05)。上述结果首次表明,敲除pAPN15-21外显子能够极显著抑制TGEV在ST细胞中的复制,但细胞KO-ST-15的正常生理功能无变化,TGEV不能进入敲除pAPN 15-21外显子的细胞中引起炎症反应,该结果为进一步培育抗病育种猪提供参考依据和候选方案。
- 史鑫琪季朝阳陈晓彤张子博张鑫郭慧娟田璐王洪峰陈洪岩王靖飞冯力夏长友孟庆文
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒ST细胞
- 猪瘟病毒衣壳蛋白的细胞核定位研究被引量：9
- 2014年
- 为了解猪瘟病毒(CSFV)衣壳(C)蛋白在ST细胞中的定位情况,本研究将CSFV C蛋白基因克隆于真核表达载体pEGFP-C2中,构建重组质粒pEGFP-CSFV-C。将该重组质粒转染ST细胞,转染2 h、4 h和6 h后利用激光共聚焦显微镜分析C表达蛋白在细胞中的定位情况。结果表明,CSFV表达蛋白在ST细胞中主要定位于细胞质和核仁。本研究为进一步分析CSFV的复制机理提供依据。
- 刘宁时洪艳陈建飞冯力张鑫胡桂学
- 关键词：猪瘟病毒衣壳蛋白ST细胞
- 内质网应激抑制冠状病毒TGEV复制的分子机制研究
- 传染性胃肠炎病毒（Transmissible Gastroenteritis Virus,TGEV）属于alpha冠状病毒家族成员,其感染导致新生仔猪的水泻和脱水,是引起规模化养猪场新生仔猪腹泻性死亡的重要原因,给我国养...
- 薛美符芳马艳龙张鑫李亮冯力刘平黄
- 关键词：未折叠蛋白反应传染性胃肠炎病毒
- 文献传递
- 抗猪传染性胃肠炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位的鉴定被引量：6
- 2014年
- 为制备抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达重组N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,通过间接ELISA方法筛选阳性克隆,经4次细胞克隆纯化后,获得两株稳定分泌抗重组TGEV N蛋白的MAb,命名为3D7和5E8。通过western blot和间接免疫荧光试验对MAb的免疫活性和特异性进行鉴定,结果表明两株MAb均能够与TGEV全病毒反应并且特异性良好。利用合成的多肽对N蛋白抗原表位进行鉴定,初步确定MAb 3D7识别的表位为241AGKGDVTRFYGARSSSANFG260;5E8为184NKKDDSVEQAVLAALKKLGV203。本研究制备了两株MAb并对其表位进行鉴定,为TGEV检测方法的建立和N蛋白功能的分析奠定了基础。
- 赵鑫张鑫时红艳陈建飞迟延彬韩斆李长龙刘宁胡桂学冯力
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体抗原表位
- 高校图书馆知识产权信息服务模式与实践--以东北大学图书馆为例
- 2023年
- 高校知识产权信息服务中心的建立,对我国高校图书馆开展知识产权信息服务起到了关键性的助推作用。东北大学作为高校国家知识产权信息服务中心,开展了多样化的知识产权信息服务。概述了东北大学知识产权信息服务发展历程,并在东北大学图书馆开展知识产权信息服务创新实践的基础上,构建了知识产权信息服务模式,以期加强为高校国家知识产权信息服务中心建设、创新服务模式、拓展服务内容、构建服务体系提供参考。
- 陈艳梅张鑫宋丽梅郭文希刘一伟
- 关键词：知识产权信息服务
- 猪急性腹泻综合征冠状病毒诱导细胞自噬并增强病毒复制的研究
- 2024年
- 为研究猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)感染细胞是否诱导自噬及自噬对病毒复制的影响,本研究将SADS-CoV(MOI 0.1)接种Vero E6细胞培养36 h后,经透射电子显微镜观察可见,SADS-CoV感染的细胞中出现了包裹胞浆的自噬体样双层膜结构,证实SADS-CoV可以诱导Vero E6细胞发生自噬。构建pEGFP-LC3的真核表达质粒并经双酶切及测序鉴定正确后转染Vero E6细胞,24 h后以SADS-CoV感染,24 h后经激光共聚焦显微镜观察可见,与阴性对照组细胞相比,感染SADS-CoV的细胞出现绿色荧光的点状聚集。进一步将SADS-CoV(MOI 0.1)感染Vero E6细胞不同时间后通过western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62表达水平的变化,结果显示,与阴性对照组相比,SADS-CoV感染组LC3-Ⅱ的表达水平升高,LC3-Ⅱ/GAPDH比值呈上升趋势,而p62蛋白表达水平则显著降低(P<0.05),表明SADS-CoV感染能够诱导Vero E6细胞产生完整的自噬应答。为了探究自噬对病毒复制的影响,本研究分别采用自噬抑制剂3-MA和自噬诱导剂Rapamycin处理Vero E6细胞后以SADS-CoV感染,于感染后不同时间收获细胞,通过western blot和病毒滴度(TCID_(50))测定检测SADS-CoV N蛋白表达水平的变化。结果显示,与仅感染病毒的对照组相比,采用3-MA处理Vero E6细胞后SADS-CoV N蛋白的表达水平及TCID_(50)均显著降低(P<0.05),而采用Rapamycin处理后SADS-CoV N蛋白的表达水平及TCID_(50)则均显著升高(P<0.05)。针对ATG5基因设计3条特异性的ATG5 si RNA(siATG5-1/2/3),将干扰效率较好的siATG5-1转染Vero E6细胞后再以SADS-CoV感染,24 h后检测病毒滴度并利用western blot检测SADS-CoV N蛋白表达水平的变化。结果显示,与未转染siATG5的3组阴性细胞相比,转染细胞中SADS-CoV N蛋白的表达水平及病毒滴度均显著降低(P<0.05)。本研究首次表明SADS-CoV感染可以诱导宿主细胞自噬并促进病毒的复制,该结果为深入研究SADS-CoV感染与其致病机理以及�
- 曾苗苗刘大凯张记宇张燎原冯廷帅杨小曼时洪艳张鑫陈建飞石达冯力
- 关键词：病毒复制
- 宿主蛋白EB3和HSP47对PEDV复制的影响
- PED是由套式病毒目(Nidovirales)、冠状病毒科(Coronaviridae)、冠状病毒亚科(Coroavirinae)α-冠状病毒属(Alphacoronavirus)的猪流行性腹泻病毒(Porcine ep...
- 石达陈建飞时洪艳张鑫冯力
