景巍
- 作品数：6 被引量：47H指数：3
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- TBa多克隆抗体的制备及其重组蛋白免疫活性的鉴定
- 2006年
- 目的:TBa(tartary buckwheat allergen)是苦荞麦中的主要过敏原。为了研究TBa的结构与功能关系并鉴定其重组蛋白的特异性免疫活性。方法:采用之前从种子中分离纯化的天然TBa作为抗原免疫小鼠,制备抗血清,建立了类似竞争酶联免疫吸附检测TBa的分析方法。结果:对重组TBa的免疫活性鉴定表明,采用该方法制备的多克隆抗体能满足重组TBa的免疫活性鉴定,这为下一步研究其免疫学功能奠定了基础。
- 王岚景巍王转花
- 关键词：TBA多克隆抗体
- 苦荞过敏蛋白TB22的原核表达及纯化被引量：5
- 2003年
- 为了确定苦荞主要过敏原蛋白TB2 2的抗原决定簇 ,揭示其致敏机制 ,为以后的分子改造及育种改良打下基础 ,需要在体外微生物体系中获得大量的纯化蛋白。以pQE 31为表达载体 ,M1 5为表达菌株 ,使用IPTG诱导 ,在 37℃获得了以包涵体形式存在的表达产物。经WesternBlotting检测 ,证明表达条带N端带有Histidinetag。使用 8mol L尿素初步纯化后 ,目的蛋白含量达到 40 %以上。进一步HitrapChelatingHP亲和纯化 ,表达蛋白的纯度达到 90 %以上。建立了适合重组TB2 2纯化的基本方法 ,得到了纯化的包涵体 ,为抗TB2 2抗体的制备及其抗原决定簇的研究奠定了基础。
- 畅文军景巍侯晓军张政王转花
- 关键词：苦荞原核表达纯化
- 一种苦荞麦过敏性贮藏蛋白基因的克隆及其应用
- 本发明通过RT－PCR和RACE技术克隆和序列测定获得苦荞麦过敏性贮藏蛋白基因(TBc)，该基因全长1548核苷酸，开放阅读框可编码一个515个氨基酸组成的蛋白质，其中包含22个氨基酸的信号肽序列和493个氨基酸的成熟肽...
- 王转花张政李玉英景巍
- 文献传递
- 苦荞麦主要过敏蛋白N端基因片段的克隆及序列分析被引量：14
- 2006年
- 为了获得苦荞麦主要过敏蛋白全长基因并深入开展苦荞过敏蛋白的研究,本实验在先前获得的苦荞麦主要过敏蛋白C端(TBa)基因序列的基础上,设计不同的引物,以开花20d左右的苦荞麦果实为材料提取总RNA,并以此RNA为模板,通过RT-PCR和5'-RACE等方法,扩增,克隆获得苦荞麦主要过敏蛋白N端(命名为TBb)cDNA序列。序列分析结果表明,该序列由1005bp组成,开放阅读框为960bp,可编码一个由320个氨基酸残基组成的功能蛋白。同源性分析显示,此核苷酸序列与甜荞麦过敏性贮藏蛋白及豆球类蛋白的同源性达到90%。由此核苷酸序列推导出的氨基酸序列与甜荞麦13S贮藏蛋白有84%的同源性,与甜荞麦主要过敏蛋白有76%的同源性。苦荞麦主要过敏蛋白N端基因的获得为该蛋白的重组表达及其生物学活性等研究建立了前期基础。
- 赵小珍张政景巍李玉英王转花
- 关键词：苦荞麦克隆
- 一种苦荞过敏性贮藏蛋白的研究
- 荞麦具有较高的营养品质和药用价值,并富含多种生物活性物质,在防治现代文明病,诸如糖尿病、高血压等心脑血管疾病和风湿性关节炎等方面具有一定的功效。然而荞麦中含有的过敏性成份又能使许多接触或食用它的人产生过敏症状。近些年来,...
- 景巍
- 关键词：苦荞TBATBBTBC
- 文献传递
- 一种快速纯化蛋白的电洗脱方法被引量：29
- 2004年
- 以TB2 4kDa蛋白为例介绍了一种快速纯化蛋白的电洗脱方法。根据作者实验室先前建立的提取苦荞种子蛋白的方法制备TB2 4kDa蛋白粗提物 ,利用阴离子交换层析和改进的电泳洗脱方法对其进行纯化。结果显示 :经改进的电洗脱纯化 ,1mg粗蛋白可以回收得到 15 0 μg左右的目的蛋白 ,回收率为 15 .32 % ,纯化效果较理想。
- 景巍王转花
- 关键词：纯化蛋白电洗脱SDS-PAGE生物化学
