曲迪
- 作品数：6 被引量：38H指数：4
- 供职机构：华东师范大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 三种抗氧化剂对氯化镉所致河蟹精子DNA损伤的保护作用被引量：4
- 2007年
- 采用单细胞凝胶电泳技术与CASP软件检测和分析了3种抗氧化剂(VC,VE和Zn2SO4)对氯化镉所致河蟹离体精子DNA损伤保护作用的量效关系。以5mmol.L-1氯化镉处理河蟹精子DNA,表征DNA损伤程度的4个参数(L tail,TailDNA,TM,OTM)值与空白组相比显著增加,表明该氯化镉浓度下已对河蟹精子的DNA造成严重损伤。在此基础上,将河蟹精子加入到分别含有不同浓度抗氧化剂的氯化镉(5mmol.L-1)溶液中,研究不同浓度抗氧化剂对精子DNA的保护作用。其中VC的浓度分别为:400μmol.L-1,1mmol.L-1,3mmol.L-1,5mmol.L-1;VE的浓度分别为:50μmol.L-1,100μmol.L-1,200μmol.L-1,400μmol.L-1;Zn2+的浓度分别为:400μg.mL-1,1mg.mL-1,2mg.mL-1,4mg.mL-1。结果发现,上述3种抗氧化保护剂均对精子DNA具有一定的保护效果,其中VE和Zn2+添加组均随其浓度的增加,保护作用不断增强,当VE达到400μmol.L-1,Zn2+达到4mg.mL-1时,均表现出很好的保护效果;然而,VC在低浓度时保护作用随其浓度增加而加强,至3mmol.L-1时细胞拖尾率最低,即保护效果最佳,但在5mmol.L-1时细胞拖尾率又明显增加,即精子DNA又受到严重损伤,表明VC对精子DNA的保护作用具有一定的浓度范围。此外,与VC和Zn2+的保护作用相比,VE在400μmol.L-1浓度时表现出更好的保护效果。
- 范丽君曲迪贾林芝李艳东赵云龙王群
- 关键词：氯化镉彗星实验DNA损伤单细胞凝胶电泳技术
- 伊红、PI染色法检测中华绒螯蟹活精子率被引量：10
- 2007年
- 以伊红和PI两种染色法,结合光学显微镜和流式细胞仪对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子的存活率进行评价研究。将新鲜精子和60℃水浴处理致死精子以不同比例混合,配成含有死精子比例为0%、20%、40%、60%、80%、100%的6个浓度梯度,将其作为"理论死亡率",分别用上述两种染色法进行检测。结果表明:伊红能有效区分死、活精子,其实测精子死亡率与"理论死亡率"之间具有明显的相关性,相关系数为R=0.98(P<0.01);经PI染色后通过流式细胞仪分析发现,其实测精子死亡率与"理论死亡率"同样具有极好的相关性,相关系数为R=0.99(P<0.01)。对伊红和PI两种染色法进行相关性比较分析,认为PI染色流式细胞仪检测法在检测中华绒螯蟹精子活力方面更具灵敏性,结果更可靠。
- 孙菊香范丽君贾林芝厉小波陈东华曲迪王群
- 关键词：中华绒螯蟹精子活力碘化丙啶流式细胞仪
- 冷冻保护剂及预冷时间对河蟹精子体外冷冻保存的影响被引量：17
- 2008年
- 本文以甘油、二甲亚砜(DMSO)为冷冻保护剂,采用两步降温法,以精子存活率和DNA损伤程度为检验其冷冻效果的评价指标,研究了冷冻保护剂和预冷时间对河蟹Eriocheir sinensis精子冷冻保存效果的影响。胰蛋白酶消化法获得河蟹游离精子,液氮冷冻保存8h以上,精子保存密度为107个/mL,伊红染色法检测精子存活率,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测精子DNA损伤。实验共设置10个组,分别为不同浓度的单一冷冻保护剂(每种保护剂的体积百分比分别为5%、10%、12.5%、15%)和两种保护剂组合(两种保护剂在同一实验组中的体积百分比含量均为5%、10%)。结果显示,12.5%甘油的保存效果最佳,精子存活率达到62.60%。在此基础上,以10%甘油作为冷冻保护剂,设置5、10、20、30、40min 5个时间梯度,研究了预冷时间对精子冷冻保存效果的影响。结果显示预冷时间的长短对精子冷冻保存效果的影响显著,当预冷时间低于20min时,精子大量死亡,且精子DNA严重损伤;当预冷时间超过30min时,精子存活率明显提高,精子DNA损伤明显减弱。
- 陈东华李艳东贾林芝厉小波王立人曲迪王群
- 关键词：河蟹精子冷冻保存冷冻保护剂二甲亚砜单细胞凝胶电泳
- 中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）精荚破裂以及精子顶体酶活力研究
- 本文根据目前我国中华绒螯蟹养殖经济中的繁育质量问题和国内外对动物生殖系统的研究情况，围绕精荚变成精子的过程，对该蟹雌体纳精囊，雄体副性腺以及精子顶体酶活力进行必要的研究。一方面从科研的角度来为进一步研究甲壳动物生殖系统提...
- 曲迪
- 关键词：中华绒螯蟹纳精囊
- 文献传递
- 伊红、台盼蓝检测河蟹精子存活率的比较被引量：12
- 2007年
- 对台盼蓝和伊红染色法检测河蟹(Eriocheir sinensis)精子存活率的方法进行了评价研究。结果表明,两种染色法死、活精子分别呈现出明显不同的染色特征:活精子无色透明,顶体中央凸起呈圆锥状,光镜下辐射臂及细胞边界清晰;死亡精子顶体着色,且中央有一染色较深的圆斑,核杯染色不明显,细胞体积变大,边界模糊。通过不同染色时间和不同染料浓度的比较发现,两种染色法最适染液浓度分别是0·25%的伊红和0·5%的台盼蓝,染色时间均以15min为佳。在此基础上,将新鲜精子和60℃水浴处理致死精子以不同的体积比混合,配成含致死精子比例为10%～90%的9个梯度样品,用伊红和台盼蓝分别测定各样品精子死亡率,并进行相关性分析。结果发现,各样品实测精子死亡率均略高于样品的理论死亡率,同时两种染色法实测值与样品理论值呈显著正相关(P<0·05),两种染色法之间亦呈显著正相关(P<0·05)。上述结果表明,伊红和台盼蓝可用于河蟹精子的活体染色,且两种染色法在对河蟹精子染色中具有一定的稳定性和可比性。
- 马强丁银娣曲迪李嘉尧孙菊香王群
- 关键词：精子存活率
- 伊红、PI染色法检测中华绒螯蟹活精子率
- 以伊红和 PI 两种染色法,结合光学显微镜和流式细胞仪对中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）精子的存活率进行评价研究。将新鲜精子和60℃水浴处理致死精子以不同比例混合,配成含有死精子比例为0%、20%、40...
- 孙菊香范丽君贾林芝厉小波陈东华曲迪王群
- 关键词：中华绒螯蟹精子活力碘化丙啶流式细胞仪
