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一种表层脱碳WC-Co梯度硬质合金预制体的制备工艺: 一种表层脱碳WC-Co梯度硬质合金预制体的制备工艺，是将常规WC-Co硬质合金压坯脱蜡预烧后，浸泡在偏钨酸铵溶液中，干燥后于真空炉中进行烧结，制得表层脱碳的WC-Co梯度硬质合金预制体。该工艺先将正常WC-Co硬质合金压...; 刘咏李亚林李昆; 文献传递

一种表层钴含量呈梯度变化的硬质合金的制备工艺: 本发明公开了一种表层钴含量呈梯度变化的硬质合金的制备工艺，该方法包括将正常硬质合金在氢气气氛保护下，通过渗钨先制备表层脱碳而芯部具有正常相组成的硬质合金，然后将该硬质合金在氢气保护下进行渗碳处理，即制得钴含量呈梯度分布的...; 刘咏李昆李亚林李荣付

鼻咽癌双特异性抗独特型抗体体外抗肿瘤免疫机制初探(英文): 2010年; 目的:比较鼻咽癌双价双特异性抗独特型抗体G22-I50与单价的抗独特型抗体G22,I50在体外抗肿瘤免疫情况,并对其可能的机制作初步探讨。方法:诱导表达G22-I50,G22,I50 3种蛋白并用Western印迹及ELISA方法进行活性鉴定。常规分离人外周血单个核细胞(PBMC),分别用G22-I50,G22,I50抗独特型抗体刺激并培养,采用MTT法、LDH释放法分别观察淋巴细胞增殖情况和细胞毒作用,ELISA法测定各抗独特型抗体刺激后培养上清液中IFN-γ,IL-2,IL-4的水平,流式细胞术检测刺激后淋巴细胞表型的改变。结果:Western印迹分析表明表达的G22-I50,G22,I50蛋白均可与FC2(Ab1)特异性地结合;直接ELISA结果表明复性后的蛋白已恢复活性,可用于体外实验研究。与G22、I50组相比,G22-I50刺激后的PBMC增殖明显,且对鼻咽癌细胞HNE2有特异的杀伤作用。G22-I50刺激后的PBMC培养上清液中IFN-γ,IL-2水平均比G22,I50组有所增加,而对IL-4水平没有明显影响。流式细胞术显示刺激后的PBMC中CD4+,CD8+T细胞比例增加,CD4+/CD8+比率增加,而CD4+CD25+T细胞的比例有所减少,其中以G22-I50组最为明显。结论:G22-I50具有更强的免疫原性并能增强PBMC的特异性杀瘤作用,其机制可能与促进PBMC的增殖,诱导具有抗肿瘤作用的Th1细胞因子的分泌并活化CD8+T细胞,抑制CD4+CD25+T细胞的表达有关。; 王甲甲李亚林李跃辉李官成; 关键词：抗独特型抗体鼻咽癌免疫机制

STC1过表达抑制人宫颈癌CaSki细胞增殖被引量：1: 2011年; 目的研究STC1基因对人宫颈癌CaSki细胞增殖及周期的影响。方法 CaSki细胞分为3组:实验组转染pcDNA3.1(+)-STC1质粒;空载体转染pcDNA3.1(+)空载体;空白对照组不加任何干扰。挑选稳定表达克隆,用RT-PCR及Western blot检测细胞中STC1基因表达水平;MTT法检测转染STC1基因对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测转染STC1基因后细胞周期的变化。结果稳定转染后,与空载体组相比,实验组STC1基因的表达水平显著提高(P﹤0.01),CaSki细胞存活率下降(P﹤0.05),G1期细胞比例显著上升(P﹤0.05),细胞出现G1期阻滞。结论 STC1基因与CaSki细胞增殖相关,其高表达引起的宫颈癌细胞增殖速度降低可能与其所致的细胞G1期延长有关。; 李亚林郭锋杰王甲甲宋婕刘艳红李峰李跃辉; 关键词：CASKI细胞细胞增殖细胞周期

肝癌相关基因HTA的重组表达及蛋白功能研究: 2011年; 目的:将肝癌相关基因HTA基因(hepatoma associated gene)进行重组表达,并对HTA蛋白功能进行初步研究。方法:从肝癌细胞系HepG2细胞中扩增得到HTA338-616cDNA,再将其克隆到原核表达载体pET21a(+)-MBP内,诱导表达MBP-HTA融合蛋白及MBP蛋白,His-tag磁珠纯化试剂盒纯化2种蛋白,并用Western印迹及ELISA方法进行活性鉴定。分别用MBP,MBP-HTA蛋白刺激并培养HepG2细胞,采用MTT法、平板克隆形成实验观察细胞增殖情况,流式细胞术检测刺激前后细胞周期分布的改变。结果:成功地构建了表达分子质量约为52 kD的MBP-HTA融合蛋白的原核表达质粒pET21a(+)-MBP-HTA。与MBP刺激后的HepG2细胞及阴性对照组相比,MBP-HTA刺激后的HepG2细胞增殖明显;流式细胞术显示MBP-HTA刺激后的HepG2细胞G1期细胞减少,S期细胞增多,细胞增殖活性增强。结论:HTA蛋白可以明显地促进HepG2细胞增殖,这可能与其促进细胞从G1期过渡到S期有关。; 宋婕刘艳红李亚林李官成; 关键词：肝细胞癌肝癌相关基因原核表达细胞增殖

一种表层钴含量呈梯度变化的硬质合金的制备工艺: 本发明公开了一种表层钴含量呈梯度变化的硬质合金的制备工艺，该方法包括将正常硬质合金在氢气气氛保护下，通过渗钨先制备表层脱碳而芯部具有正常相组成的硬质合金，然后将该硬质合金在氢气保护下进行渗碳处理，即制得钴含量呈梯度分布的...; 刘咏李昆李亚林李荣付; 文献传递

全人源鼻咽癌抗独特型抗体I50的原核表达及活性鉴定(英文): 2011年; 目的:用基因工程手段获得有活性的抗独特型抗体I50,并在体外鉴定其活性。方法:以fuse5-I50为模板,用PCR方法扩增出抗独特型抗体I50基因,并将其插入到pET25b(+)中构建原核表达载体pET25b-I50。含有重组质粒pET25b-I50的菌株E.coli BL21(DE3)经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导能够得到有效表达。采用Western印迹鉴定I50蛋白的表达,采用透析复性方法恢复I50蛋白的活性,并用Dot-ELISA法,淋巴细胞增殖实验鉴定其活性。结果:成功的构建了原核表达载体pET25b-I50,并经IPTG诱导获得了I50蛋白,该蛋白以包涵体形式高效表达,经纯化后纯度达90%以上。Western印迹鉴定表达的蛋白相对分子质量约15000,与预期相符。Dot-ELISA法鉴定复性后的蛋白已恢复活性,并能够刺激淋巴细胞的增殖,且呈剂量依赖关系。结论:成功获得了有活性的I50抗独特型抗体,为其应用于鼻咽癌的治疗鉴定了基础。; 王甲甲李亚林郭锋杰周国华李官成; 关键词：抗独特型抗体鼻咽癌原核表达 DOT-ELISA

STCl过表达对宫颈癌CaSki细胞生物学行为的影响: 2011年; 【目的】研究转染STCl基因对人宫颈癌CaSki细胞生物学行为的影响。【方法】通过MTT、集落形成、划痕实验、Tranwell实验、裸鼠成瘤等方法检测STCl基因转染对宫颈癌CaSki细胞增殖、迁移、侵袭、体内成瘤能力的影响。【结果1MTT和集落形成实验表明，与空载体组相比，CaSki／STCl细胞生长受到抑制，细胞存活率和集落形成率较低（P〈0．05）。划痕实验显示CaSki／STCl较CaSki／NC组细胞迁移率降低（35±3．2％ VS 64±4．5％，P〈0．05）。TranweⅡ实验显示CaSki／NC的85±5，而CaSki／STCl组穿膜细胞数较少为54±4（P〈0．05）。裸鼠成瘤实验显示，CaSki／STCl组和CaSki／NC组的肿瘤平均质量依次为（O．285士0．057）g、（0．523±0．154）g，差异具有统计学意义（P,0．01）。【结论】sTCl过表达抑制宫颈癌细胞增殖、转移及侵袭，STCl基因可用于宫颈癌的基因治疗。; 李亚林郭锋杰王甲甲宋婕刘艳红李官成

一种梯度结构硬质合金的制备方法: 一种梯度结构硬质合金的制备方法，先通过表面氧化的方法使硬质合金表面一定深度内脱碳得到梯度合金前驱体，即把标准硬质合金埋在一定比例的Mg(OH)2和Al2O3</Sub...; 刘咏李昆李亚林李荣付; 文献传递

人源抗肝癌全抗体基因库哺乳动物细胞表面展示载体的构建: 背景:完整的抗体通常是多价的,与靶分子有高特异性和高亲和力。它们同时结合到两个相邻的抗原表位或分子,从而增强了亲和功能,并使抗体存留在体内(如细胞表面)的时间延长。肿瘤研究和治疗的一个重要条件是建立可靠和多样的抗体制备平...; 李峰王甲甲刘艳红李亚林宋婕李跃辉李官成; 关键词：共转染肝癌; 文献传递

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李亚林

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