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李卉
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4
被引量:4
H指数:1
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周智广
中南大学湘雅二医院
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黄干
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李卉
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3篇
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Ghrelin对棕榈酸诱导的THP-1巨噬细胞上TLR4/NF-κB信号通路活化的作用
被引量:3
2012年
目的探讨酰基化Ghrelin对棕榈酸(PA)诱导的人源单核巨噬细胞(THP-1巨噬细胞)上TLR4-NF-κB信号通路的作用。方法用不同浓度的PA孵育THP-1巨噬细胞株12h;用不同浓度的酰基化Ghrelin孵育THP-1巨噬细胞株4h后,再加入PA(200μmol/L)孵育12h。用实时定量PCR检测THP-1巨噬细胞上TLR4mRNA的表达水平;用Western印记检测TLR4蛋白和细胞内NF-κB p65磷酸化蛋白水平;用ELISA方法检测细胞上清液中IL-1β和TNF-α的浓度。结果与对照组比较,PA呈剂量依赖性增强THP-1巨噬细胞TLR4mRNA和蛋白的表达水平,以及NF-κB p65磷酸化蛋白水平和分泌TNF-α、IL-1β的能力(P均<0.05)。与PA(200μmol/L)组比较,酰基化Ghrelin呈剂量依赖性抑制THP-1巨噬细胞TLR4mRNA(P均<0.05)、TLR4蛋白和NF-κB p65磷酸化蛋白的水平(P均<0.01),以及降低THP-1巨噬细胞分泌TNF-α水平(P均<0.05)和IL-1β的水平(P均<0.01)。结论PA可剂量依赖性诱导THP-1巨噬细胞TLR4/NF-κB信号通路的活化;酰基化Ghrelin可剂量依赖性抑制PA诱导的THP-1巨噬细胞TLR4/NF-κB信号通路的活化。
李欣颖
刘石平
姚岚
肖扬
李卉
周智广
关键词:
GHRELIN
棕榈酸
TOLL样受体
1型糖尿病患者酪氨酸磷酸酶2β抗体检测的临床意义
被引量:1
2008年
目的探讨1型糖尿病(T1DM)患者中蛋白酪氨酸磷酸酶2B抗体(IA-2βA)的分布规律及阳性患者的临床特征。方法采用放射配体法检测401例T1DM患者、200例正常对照血清中IA-2βA、IA-2A和谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)水平,并分析抗体阳性患者的临床特征。结果(1)T1DM组IA-2βA阳性率8.7%(35/401),显著高于正常对照组(1.0%,P〈0.05);(2)35例IA-2βA阳性患者中,同时合并IA-2A阳性的患者16例,阳性重叠率45.7%。IA-2BA与IA-2A指数无相关性(r=0.021,P=0.780);(3)T1DM患者中,IA-2A、IA-2βA阳性率在0~9岁组最高,二者阳性率显著高于10岁以上的T1DM患者(62.8%vs 19.7%,Χ^2=31.41,P〈0.001;20.0%vs 7.6%,Χ^2=6.11,P〈0.05)。而GADA阳性率在各年龄组中差异无统计学意义;(4)与单独IA-2A阳性患者比较。单独IA-2βA阳性患者年龄和起病年龄较大(IA-2A阳性患者平均年龄24.2岁,平均起病年龄21.6岁;IA-2βA阳性患者平均年龄35.5岁,平均起病年龄34.0岁,均P〈0.05)。结论IA-2βA在儿童T1DM患者中阳性率较高,且随年龄增长阳性率下降。IA-2βA是糖尿病患者自身免疫检测的一项实用指标。
李卉
黄干
张松
王霞
金河来
周智广
关键词:
糖尿病
蛋白酪氨酸磷酸酶
自身抗体
谷氨酸脱羧酶抗体
蛋白酪氨酸磷酸酶-2自身抗体放射配体检测法的影响因素分析
2008年
目的对蛋白酪氨酸磷酸酶-2自身抗体(IA-2A)放射配体检测法的影响因素进行分析。方法采用放射配体法检测186批IA-2A,对其检测结果进行回顾性分析和总结,并通过参加国际第4次糖尿病自身抗体检测标准化评估(DASP 2005)验证方法的灵敏度和特异度。结果该方法批内变异系数(CV)为3.1%-9.5%,批间CV为5.5%-11.7%;以信/噪比(S/N)≥50作为检测IA-2A的理想标准,186批次检测中合格161批(86.6%),失败25批(13.4%)。其中高温操作环境[(32.7±6.3)℃]检测失败率(占失败总批次的60%)显著高于低温操作环境[(11.8±5.7)℃,占失败总批次的16%],且高温操作环境S/N(55.1±6.9)明显低于低温操作环境(68.5±6.2,P〈0.01)。在失败批次中,由三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲盐溶液引起的占68%(17/25),其他原因有标记失败等。DASP 2005反馈结果显示,我室IA-2A检测灵敏度72%,特异度99%,受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,曲线下面积0.825±0.048(0.730-0.919)。结论放射配体法检测IA-2A的影响因素,特别是Tris缓冲盐溶液应引起操作者重视并加以控制,以确保结果稳定可靠。
黄干
周智广
金河来
王霞
李卉
关键词:
蛋白酪氨酸磷酸酶
自身抗体
放射配体法
影响因素
谷氨酸脱羧酶抗体微量平板放射结合检测法的建立与初步应用
2008年
目的建立谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)的微量平板放射结合检测(RBA)法并评价其临床价值。方法采用^35S-GAD65抗原与血清在96孔平板中保温24h,而后转入已包被蛋白A的Millipore平板中,平板经洗涤后进行放射性计数,GAD—Ab结果以WHO标准单位(U/ml)表示。检测224名健康人、162例1型糖尿病(T1DM)和210例初诊2型糖尿病(T2DM)患者GAD—Ab浓度,评价其临床应用效果。并分别选择经典放射配体(RLA)法检测GAD—Ab指数呈梯度排列的T1DM患者和健康人共119名,比较RBA法和RLA法检测结果的一致率和相关性。对32名健康人、35例TIDM患者、24例T2DM患者同时采集静脉血和手指血,探索该方法检测手指血GAD—Ab浓度的可行性,同时也与RLA法比较。分别采用直线相关分析、t检验、方差分析、受试者工作特征(ROC)曲线等方法进行统计学处理。结果(1)优化的检测条件包括采用2μl血清与3×10^4计数·min^-1的标记抗原缓慢振荡保温24h,采用4℃PBS缓冲液洗涤沉淀物10次,采用Optiphase Supermix型闪烁液测量放射性计数。(2)该法检测GAD—Ab批内CV为3.8%~10.2%,批间CV5.6%~11.9%;GAD—Ab浓度在40.3~664U/ml范围内线性良好,检测限为3.6U/ml;该方法灵敏度78%,特异性98%,与经典RLA法结果判定一致率97.5%,Kappa值0.95,两者检测值呈显著正相关(r=0.915,P〈0.001)。(3)GAD—Ab在TIDM和T2DM患者阳性率分别为46.9%(76/162)和5.2%(11/210),明显高于健康人的n89%(χ^2值为123.5和10.1,P〈0.001和〈0.01)。(4)该方法检测手指血GAD—Ab与经典RLA法检测静脉血结果判定一致率96.7%,Kappa值0.905,检测结果呈显著正相关(r=0.946,P〈0.001)。结论建立的微量平板RBA法灵敏度、特异性、重复性好,能适用于末梢血GAD—Ab检测,具有较好的临床应用价�
黄干
金河来
王霞
李卉
张松
周智广
关键词:
谷氨酸脱羧酶
抗体
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