李峰生
- 作品数：60 被引量：81H指数：5
- 供职机构：中国人民解放军第二炮兵总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金江苏省高校重点实验室开放研究课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术环境科学与工程更多>>
- 扶正解毒中药对高氡暴露大鼠防护作用的研究
- 2011年
- 目的 探讨扶正解毒中药对高氡暴露大鼠的防护作用.方法 18只SD大鼠按随机数字表法分为3组.将12只SD大鼠放人氡浓度为40 000 Bq/m3氡室环境中,随机分为氡暴露组和扶正解毒中药组,每组6只,每只大鼠暴露总时间为1890 h,即120工作水平月(WLM),剂量率为0.056 WLM/h;另取6只SD大鼠为对照组,在本底氡浓度小于50 Bq/m3的室温环境中喂养.以酶联免疫( ELISA)法检测各组大鼠血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段( CYFRA21-1)浓度和p53抗体水平；以甲基化特异性PCR(MSP)法检测各组大鼠支气管肺灌洗液(BALF)细胞中p16基因的甲基化率.结果 氡暴露组大鼠血清CEA、NSE浓度分别为(396.62±148.74)和(9.09±0.90) μg/L,显著高于对照组的(12.35±4.43)、(1.47±0.15) μg/L(t =2.583、2.463,P＜0.05)；扶正解毒中药组CEA、NSE浓度分别为(70.89±44.71)和(4.31±1.37) μg/L,均显著低于氡暴露组,差异有统计学意义(t=2.921、2.526,P＜0.05)；氡暴露组大鼠血清CYFRA21-1水平和p53抗体浓度与对照组和防护剂组比较,差异无统计学意义(t=1.713、1.963,P＞0.05)；氡暴露组大鼠BALF细胞中出现p16基因甲基化,甲基化率为16.67％,而对照组和扶正解毒中药组没有出现pl6基因甲基化.结论 扶正解毒中药能显著降低高氡暴露大鼠CEA、NSE水平和p16基因甲基化率,有较理想的氡辐射防护作用.
- 江其生李志韧张蓉陈凤蔡鹏飞朱海静李峰生张智杰涂彧
- 关键词：氡基因甲基化肿瘤标志物
- 辐射诱导对小鼠巨噬细胞钙结合蛋白S100A8表达及调控影响的初步研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨辐射诱导后小鼠巨噬细胞中钙结合蛋白S100A8 mRNA的表达情况及其调控机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,按处置方法不同分为4组:A组正常培养48h;B组经10Gy射线照射后培养48h;C组用5g/ml LPS培养24h后,更换新鲜培养基继续培养24h;D组经10Gy射线照射后培养24h,然后添加5g/ml LPS继续培养24h。采用RT-PCR及定量PCR方法检测各组细胞S100A8 mRNA表达的变化。分别采用H2O2和喜树碱处理细胞,定量PCR检测S100A8 mRNA表达的变化。构建上游5′端系列报告基因表达载体并转染细胞,采用双荧光素酶法检测报告基因的表达水平。结果经γ射线或LPS刺激后,RAW264.7细胞S100A mRNA表达明显增加,二者联合作用后增加更为明显(P<0.05);H2O2处理后S100A8 mRNA表达增加,而喜树碱处理后其表达没有明显变化。单独经γ射线或LPS刺激后,报告基因的表达无明显变化,而二者联合作用后报告基因表达明显增加(P<0.05)。结论辐射诱导可促进RAW264.7细胞中钙结合蛋白S100A8 mRNA的表达。
- 丛悦饶亚岚陈肖华董波李峰生王治东高荣莲高玲罗庆良
- 关键词：RAW264.7细胞
- X射线对人肺癌A549细胞CCR7表达影响的研究
- 2011年
- 目的研究不同剂量X射线照射及照射后不同时间点对人肺癌A549细胞CC-趋化因子受体7（CCR7）表达的影响。方法体外培养A549细胞，实验组采用直线加速器X射线一次性照射，细胞吸收剂量分别为2、4、6和8Gy（源皮距100em；剂量率442．89cGy／min），照射后4、12、24、48和72h分别采用实时荧光定量PCR技术及Westernblot方法分别进行CCR7mRNA及蛋白质表达水平检测；对照组A549细胞除不接受X射线照射外，余处理同实验组。结果A549细胞经2、4、6和8Gy的X射线照射后，CCR7mRNA及蛋白质在照射4h后开始表达升高，达到高峰后相继出现下降；72h后6和8Gy组mRNA表达量仍高于对照组水平（t=6．75—7．26，P〈0．01），2和6Gy组蛋白质表达量高于对照组（t=11．13—14．17，P〈0．01），而4和8Gy组蛋白质表达量在48和72h已降至对照组水平。结论2、4、6和8Gy的X射线照射A549细胞后，A549细胞CCR7mRNA及蛋白质的表达量明显增加，可能与一定剂量X射线辐射促进A549细胞增殖和转移有关。
- 王翠兰江其生邹跃李峰生李伟宋秀军何蕊王璐
- 关键词：肺癌X射线
- 新型纳米转染试剂转染PNP自杀基因体外杀伤实验被引量：4
- 2003年
- 将壳聚糖纳米粒包裹的报告基因pEGFP-N1质粒转染至HEK293细胞,并在HEK293细胞中成功表达荧光蛋白的基础上,进一步将本室自行构建的PNP基因的真核高效表达载体质粒pcDNA3-PNP转染至HEK293细胞。转染72h后,对转染的HEK293细胞给予前体药6-MPDR至终浓度40μg/ml,一天后,采用MTT比色法测定药物对细胞增值的影响,并进行统计学处理。实验结果表明采用壳聚糖纳米粒转染试剂转染并给予前体药6-MPDR的实验组活细胞数,与用壳聚糖转染但不给前体药6-MPDR的对照组活细胞数相比,有显著差异(P<0.05),说明新筛选出的壳聚糖纳米粒转染试剂可以将PNP自杀基因递送至靶细胞中,并在细胞中进行表达,从而使PNP/6-MPDR自杀基因系统发挥杀伤细胞的作用。分别采用相同工作浓度的脂质体与壳聚糖纳米粒转染试剂转染相同浓度的基因质粒,壳聚糖纳米粒对靶细胞生长数量影响很小,说明的壳聚糖纳米粒细胞毒性大大低于阳离子脂质体的细胞毒性。
- 杜芝燕黄伟李峰生谢庆军陆应麟崔光华
- 关键词：基因转染绿色荧光蛋白
- 钙结合蛋白S100A8在辐射损伤小鼠骨髓细胞的表达及意义被引量：1
- 2008年
- 本文研究了钙结合蛋白S100A8在辐射损伤小鼠骨髓细胞中的表达,及其与细胞周期、凋亡的关系。运用蛋白/DNA双参数流式细胞技术,比较3.5、7Gy60Coγ射线照射后6h小鼠骨髓中S100A8蛋白的表达变化,及S100A8阳性(S100A8+)与S100A8阴性(S100A8-)细胞周期和凋亡的改变。正常小鼠骨髓中,S100A8+细胞主要是粒细胞;与S100A8-细胞相比,S100A8+细胞增殖不活跃。辐射损伤后早期,小鼠骨髓中S100A8+细胞数及S100A8蛋白表达量无明显改变,S100A8-细胞发生G2/M期阻滞及凋亡,而S100A8+细胞周期不改变,也不发生凋亡。结果表明,S100A8+细胞相对S100A8-细胞具有辐射抗性。
- 饶亚岚董波丛悦陈肖华张军权李峰生高玲毛秉智
- 关键词：S100A8骨髓小鼠
- 乙肝病毒血清标记物与血清HBV-DNA的关系被引量：14
- 2008年
- 目的:探讨不同乙肝感染模式的患者与HBV-DNA定量结果进行对比分析。方法:采用ELISA方法检测乙肝病毒血清标记物,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV-DNA,比较二者之间的关系。结果:HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组和HBsAg、HBeAg阳性组HBV-DNA检出率较高,分别为96.61%和100%。HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组HBV-DNA含量平均水平为3.86×108,HBsAg、HBeAg阳性组HBV-DNA含量平均水平为1.73×108;HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组和HBsAg、HBcAb阳性组检出率也较高,达45%以上,HBV-DNA含量平均水平分别为1.30×107和1.31×106。结论:FQ-PCR检测HBVDNA能准确地反映体内的HBV真实感染和复制情况,在乙肝的诊断和治疗中,不能单凭两对半的检测,同时应做HBV-DNA的定量测定。
- 李伟李峰生陈舒江其生
- 关键词：HBV-DNAELISAFQ-PCR
- 面向区域核与辐射应急管理信息系统的设计被引量：6
- 2009年
- 目的:探讨区域核与辐射应急管理信息系统的建设。方法:从核与辐射工作遇到的挑战入手,依据国家应急体系总体框架的要求,紧密结合核与辐射应急特点,策划核与辐射应急管理系统的总体架构,并针对核与辐射应急管理系统中数据库与业务应用系统等重点功能进行设计。结果:设计面向区域的核与辐射应急管理信息系统,为核与辐射事故的预测预警、监测监控、应急指挥、辅助决策等提供技术支持。结论:核与辐射应急是国家应急管理体系重要的组成部分,建立安全完善的核与辐射应急管理系统,是核能事业可持续发展的重要保证,也是关系到国家安全、社会稳定的关键问题。
- 李伟江其生李峰生
- 关键词：应急管理信息系统
- 电离辐射对肺腺癌A549细胞血管内皮生长因子C基因表达的影响
- 2009年
- 目的:探讨不同剂量电离辐射对人肺腺癌A549细胞表达血管内皮生长因子C(VEGF-C)的影响。方法:肺腺癌A549细胞接受不同剂量60Coγ射线照射后,培养12、48 h后提取细胞总RNA,RT-PCR测定VEGF-C基因表达变化,熔解曲线及琼脂糖凝胶电泳分析产物特异性,采用2(-ΔΔCT)法及SPSS 13.0软件进行相关分析。结果:肺腺癌A549细胞射线照射后12 h和48 h,与对照组比较,除0.5、2 Gy照射剂量外VEGF-C表达明显增高;48 h与12 h相比,0.5、1、5 Gy照射剂量组VEGF-C表达明显升高。结论:电离辐射可诱导A549细胞高表达VEGF-C,在放疗早期阶段联合应用抑制VEGF-C基因表达技术既可杀伤癌细胞又可抑制癌细胞远处转移,是一种值得深入研究的新模式。
- 宋秀军江其生李伟李峰生陈舒于慧杰
- 关键词：电离血管内皮生长因子CA549细胞
- S100A4 siRNA对人胰腺癌BxPc-3细胞增殖、迁移及侵袭的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察利用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)技术下调人胰腺癌BxPc-3细胞中钙结合蛋白S100A4表达后对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法设计合成针对S100A4的特异性siRNA,转染至人胰腺癌BxPc-3细胞,以Western印迹检测转染前后S100A4蛋白表达变化;克隆形成率实验检测转染前后BxPc-3细胞增殖能力;Transwell小室模型检测转染前后BxPc-3细胞迁移和侵袭能力变化。结果 Western印迹结果显示BxPc-3细胞转染S100A4siRNA48h后,S100A4蛋白表达明显下调;Transwell小室验证转染S100A4siRNA后细胞的迁移和侵袭能力明显降低。结论本研究结果表明,S100A4表达下调后可抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,提示S100A4可以作为一个潜在的肿瘤治疗靶标。
- 刘丽卉李峰生李娜董波周仕香陈肖华
- 关键词：胰腺肿瘤S100蛋白质类BXPC-3细胞
- 树突状细胞来源Exosomes治疗肿瘤的研究进展被引量：1
- 2013年
- 肿瘤免疫治疗可针对特定的抗原激发体内的免疫应答来提高免疫能力,破坏肿瘤细胞的免疫逃逸功能,杀伤或杀灭肿瘤细胞而不损伤正常细胞、组织,提高肿瘤患者的生存率以及提高生活质量。如何打破肿瘤的免疫耐受、激活机体免疫来杀伤肿瘤,是当前肿瘤免疫治疗研究的主要方向。
- 于慧杰李峰生何蕊江其生
- 关键词：肿瘤免疫治疗EXOSOMES细胞来源树突状杀伤肿瘤免疫能力
