李碧春
- 作品数：330 被引量：1,431H指数：19
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 姜曲海猪A-FABP基因内含子1多态性与肉质性状的相关分析被引量：10
- 2013年
- 以姜曲海猪和苏姜猪为研究对象,采用PCR-RFLP方法检测了脂肪型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)基因内含子1的多态性,并将不同基因型与肉质性状进行相关性分析。结果表明:在内含子1区域存在BsmΙ酶切多态性,有BB、Bb、bb3种基因型。该位点的多态性对姜曲海猪和苏姜猪猪肉的大理石纹和肌内脂肪含量均有显著影响(P<0.05),大理石纹为BB型和Bb型均显著高于bb型(P<0.05),BB型和Bb型之间差异均不显著(P>0.05);肌内脂肪含量为BB型显著高于Bb型和bb型(P<0.05),Bb型和bb型之间差异均不显著(P>0.05);其他肉质性状的不同基因型之间差异均不显著(P>0.05)。结果显示,姜曲海猪和苏姜猪A-FABP基因内含子1的多态性对其肉质性状有重要的影响。
- 朱淑斌赵旭庭周春宝韩大勇倪黎纲李碧春
- 关键词：A-FABP基因PCR-RFLP肉质性状
- 禽类转基因生产及其应用的研究现状和进展(续完)被引量：2
- 2001年
- 李碧春钱菊汾
- 关键词：禽类
- 精子介导外源DNA转移的研究进展被引量：4
- 2000年
- 精子因在受精过程中的独特作用 ,而被认为是转移外源 DNA的理想载体。本文对精子作载体进行转基因动物制作的方法、外源 DNA与精子作用的分子机制、导入动物个体或胚胎的外源 DNA的存在形式、影响精子与外源 DNA结合的因素进行了论述 ,并对精子作为载体的研究方向和发展前景给予了预测。
- 李碧春钱菊汾
- 关键词：精子载体转基因
- 鸡胚胎性腺发生发育的研究被引量：12
- 2001年
- 由原始性腺分化为卵巢或睾丸的变化规律是：孵化３．５～５天，迁移入原始性腺内 ＰＧＣｓ，其胞质内的糖原颗粒逐渐崩解；孵化第６天，性腺显示为卵巢或睾丸的特征，ＰＧ Ｃｓ的糖原颗粒进一步崩解，鸡胚性腺开始分化；孵化第７天，性腺分化更为明显，ＰＧＣｓ胞质内糖原颗粒完全消失，细胞分化为卵原细胞或精原细胞；孵化第１０～ １１天，卵巢明显区分为皮、髓质部，皮质部外区有大量增殖的卵原细胞群，呈共质体──合胞体结构。卵原细胞已发育为初级卵母细胞的核网期。睾丸曲精细管索建立，数量逐渐增多，索内细胞呈单层排列，已分化出支持细胞，间质内有少量间质细胞；孵化第 １３天，卵巢皮质部变大，髓质部变小。睾丸曲精细胞索的支持细胞增多，孵化第１４～１５天，卵巢皮质部出现原始卵泡，数量逐渐增多。睾丸内支持细胞进一步增多，间质细胞数达最多，成群分布在间质内；孵化第 １６－１８天，雌性左侧卵巢皮质部外层的卵泡数量多，大小不一，呈有腔卵泡样结构；右侧性腺退化，似睾丸样结构。在雄性两侧睾丸，右侧稍大于左侧；精原细胞在曲精细索内数量增多达３层（１８天）支持细胞在进一步增多，间质细胞分布稀疏。
- 李碧春陈国宏王克华钱菊汾
- 关键词：胚胎性腺发育PGCS
- 鹿苑鸡核型及其与生产性能的相关性研究被引量：18
- 2003年
- 以鹿苑鸡为研究对象,采用外周血淋巴细胞培养-空气干燥法制备染色体标本,研究核型性别鉴定和染色体参数与生产性能的相关性。结果,前10对染色体核型参数(主要是染色体相对长度)与部分性状存在显著或极显著相关,尤其是7号染色体相对长度与开产日龄的相关系数达0.436。
- 王偕根陈国宏张学余傅筑荫徐琪李碧春
- 关键词：鹿苑鸡核型染色体
- 聚乙烯亚胺介导NIH-3T3细胞体外转染pEGFP-N1系统优化
- 2010年
- 目的优化聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)介导的细胞转染以提高目的基因在细胞中的表达强度。方法根据PEI/DNA不同的质量比(0:1、0.5:1、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1)利用凝胶阻滞分析结合的情况;不同质量比PEI/DNA形成的复合物对NIH-3T3细胞的转染通过细胞表达强度获得最佳PEI/DNA质量比;比较实验组1(PEI/DNA质量比2:1)、实验组2(重复PEI/DNA质量比2:1)及实验组3(PEI/DNA质量比4:2)3种转染方案,探讨重复转染的方法是否提高细胞表达强度。结果①通过凝胶阻滞分析PEI/DNA能够稳定结合的质量比是1:1～10:1;②PEI/DNA复合物对NIH-3T3细胞进行转染,其荧光表达强度当PEI/DNA(质量比)≤2时随着PEI的增加而提高,当PEI/DNA(质量比)>2时,荧光表达强度反而降低;③采用重复转染的方法实验组2细胞荧光表达强度(24.08±0.28)%明显高于实验组1(8.97±4.02)%和实验组3(14.24±2.68)%(P<0.05)。结论在PEI/DNA(质量比)=2的条件下,PEI/DNA复合物转化NIH-3T3细胞的效果比较理想,重复转染可以提高细胞转染后荧光表达强度。
- 丁爱军任丽伟许峰秦玉蓉傅德智李碧春
- 关键词：聚乙烯亚胺细胞转染
- 苏姜猪ESR基因和FSHβ基因的多态性与繁殖性能的相关性研究被引量：11
- 2008年
- [目的]从DNA水平上为苏姜猪的选育提供技术支持。[方法]对293头苏姜猪的ESR基因和FSHβ基因的多态性进行检测,分析不同多态性间繁殖性能(总产仔数、产活仔数和初生重)的差异,探讨将ESR基因和FSHβ基因作为标记辅助选择用于苏姜猪核心群选育的可行性。[结果]苏姜猪ESR基因位点上的3个基因型AA型、AB型、BB型的频率分别为38.25%5、7.54%和4.21%,而FSHβ基因位点上AA型、AB型和BB型的频率分别为21.33%、37.2%和60.07%。在ESR基因位点上BB型和AB型苏姜猪的总产仔数显著高于AA型,而BB型苏姜猪的产活仔数显著高于AA型和AB型。FSHβ基因位点上3个基因型苏姜猪的总产仔数、产活仔数和初生重差异均不显著。[结论]ESR基因可作为辅助标记选择用于苏姜猪核心群的选育,以提高其繁殖性状。
- 孙丽亚王宵燕宋成义赵芹谢飞吴晗李碧春
- 关键词：苏姜猪ESRFSHΒ繁殖性能
- 鸡睾丸细胞体外分离培养初探被引量：8
- 2007年
- 取孵化15d鸡胚及出壳7d内和7d后雏鸡的睾丸，分别采用二酶二步消化法（胶原蛋白酶＋胰蛋白酶）和三酶二步消化法（胶原蛋白酶＋透明质酸酶／胰蛋白酶）分离睾丸细胞。结果表明：同一时期睾丸细胞的分离效果，二酶二步消化法与三酶二步消化法差异显著；不同时期采用二酶二步消化法分离睾丸细胞，孵化15d的分离效果显著优于出壳7d内，极显著优于出壳7d后，出壳7d内极显著优于出壳7d后。Percoll离心法提纯结果表明：密度梯度为27％～35％的条带中睾丸细胞纯度较高。在体外无饲养层的条件下分别培养经提纯与未经提纯的睾丸细胞，结果表明未经提纯的细胞具有较高的存活力。
- 李碧春周冠月吴洪孙思宇
- 关键词：精原干细胞分离提纯
- 鸡抗病毒Mx蛋白基因在毕赤酵母GS115中的表达
- 2010年
- 为了利用酵母表达技术制备鸡抗病毒Mx蛋白,试验采用基因工程技术,将编码鸡抗病毒Mx蛋白基因亚克隆至含有分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体中,构建成分泌型重组表达载体pPIC9K-Mx;用电转化法将线性化的pPIC9K-Mx转化至毕赤酵母菌株GS115中,G418梯度筛选转化菌;再经MM与MD平板对比生长试验筛选,PCR鉴定目的片段,筛选出高拷贝重组子,该高拷贝菌株分别经0.5%、1%甲醇诱导,表达产物再经SDS-PAGE检测。结果表明:成功构建了鸡抗病毒Mx蛋白基因的毕赤酵母表达载体,经G418抗性筛选得到高拷贝菌株;在甲醇含量维持在1%时,鸡抗病毒Mx蛋白在毕赤酵母GS115中获得良好表达,表达产物大小约为75ku;表达蛋白约占表达上清液的39.2%。
- 田智泉杨海燕徐琪孙敏许峰任丽伟丁爱军秦玉蓉李碧春
- 关键词：毕赤酵母MX蛋白
- 山羊iPS细胞诱导及培养体系的优化
- 2014年
- 为了高效、持续的诱导获得并培养山羊诱导性多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPS),本研究从饲养层和培养液方面进行优化。将分离获得3代以内的小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast,MEF)、山羊胎儿成纤维细胞(Goat embryonic fibroblast,GEF)用丝裂霉素C处理后,分别按1×105 mL-1 MEF、1×105mL-1 GEF、5×104 mL-1 MEF+5×104 mL-1 GEF的密度接种,以高糖DMEM+20%胎牛血清(FBS)和KnockoutDMEM+20%血清替代物(KSR)为培养液,研究不同饲养层种类和培养液对山羊iPS细胞获得和培养的影响。结果显示,山羊iPS细胞在接种密度为5×104 mL-1 MEF+5×104 mL-1 GEF的饲养层上,使用KnockoutDMEM+20%KSR组合的培养液,山羊iPS细胞的诱导效率以及消化传代后的克隆形成率均极显著高于其他5组(P<0.01)。对该组培养的山羊iPS细胞进行碱性磷酸酶(AKP)染色呈阳性;Oct4、SSEA-1、Tra-1-60、Tra-1-81免疫荧光检测呈阳性;RT-PCR检测有Oct4、Sox2、Klf4和Nanog基因的表达;体外能分化形成类胚体。结果表明,将细胞接种在密度为5×104 mL-1 MEF+5×104 mL-1 GEF的饲养层上,使用KnockoutDMEM+20%KSR的培养液更适合山羊iPS细胞的获得和培养。本试验为山羊iPS细胞的体外研究、临床试验、动物基因组修饰和山羊胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES)的建系奠定基础。
- 邱峰龙左其生李东李伟陈庭锋韦光辉李碧春
- 关键词：饲养层培养液IPS细胞山羊
