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稳定表达人GM-CSF和IL-4 EA.hy926细胞株建立及对DC诱导作用被引量：1: 2012年; 目的获得分别能稳定表达人白细胞介素4(IL-4)和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的内皮细胞株,并用于树突状细胞(DC)的体外诱导培养。方法构建重组的慢病毒表达载体,在293T细胞中进行慢病毒的包装,用获得的高滴度的慢病毒感染内皮细胞EA.hy926细胞株,建立能够高效、稳定表达IL-4和GM-CSF的EA.hy926细胞株。结果 EA.hy926细胞株感染效率达90%以上,长期传代仍能保持较高阳性率。RT-PCR在mRNA水平上检测目的基因有表达;ELISA和Western方法证实感染后细胞IL-4、GM-CSF在蛋白水平的表达分别是未感染细胞的80倍和143倍。感染后细胞的生长状态良好,能够长期在体外进行传代培养,可以用于DC诱导实验。结论构建的细胞系可以稳定表达细胞因子IL-4和GM-CSF。; 杨晓琮贺敏王璇琳李伟静于群葛银林; 关键词：树突细胞转染白细胞介素4 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子

稳定表达人GM-CSF、IL-4的EA.hy926细胞株建立: 树突状细胞/(Dendritic cell, DC/)是目前所知的功能最强、并且唯一能激活初始性T细胞/(NT cell/)的专职抗原提呈细胞/(Antigen-presenting cell, APC/),能摄取各类抗...; 杨晓琮; 关键词：树突状细胞基因重组白细胞介素4 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子; 文献传递

重组人抗凝血酶发酵条件的优化被引量：2: 2011年; 目的:通过实验室发酵条件优化工作,实现在巴斯德毕赤酵母中高效表达重组人抗凝血酶。方法:在摇瓶培养条件下,应用正交实验方法考查人抗凝血酶重组毕赤酵母菌pPIC9K-AT-02的培养温度、培养基pH值、接种比例、甲醇补加间隔时间及甲醇补加浓度等5种因素对重组人抗凝血酶活性的影响,确定最优发酵条件。结果与结论:筛选出的最终发酵条件为培养温度30℃、培养基pH6.0、接种比例20%、甲醇补加间隔时间24 h、甲醇补加浓度2%,重组人抗凝血酶在巴斯德毕赤酵母中表达活性为4098 U/L,比原始活性提高了150%。; 冯秋月李伟静贺敏石晓月乔志新杨晓琮程宏张公庆王婧宫宁王璇琳于群; 关键词：抗凝血酶毕赤酵母发酵条件

一种将单核细胞分化培养为成熟的树突状细胞的方法: 本发明提供了一种将CD 14+单核细胞分化培养为成熟的树突状细胞的方法，所述方法将CD 14+细胞分别与能分泌促进细胞成熟和分化的细胞因子的人脐静脉内皮细胞共培养，使CD 14...; 于群石晓月李伟静王璇琳贺敏乔志新冯秋月程宏张公庆王婧杨晓琮; 文献传递

一种将单核细胞分化培养为成熟的树突状细胞的方法: 本发明提供了一种将CD 14+单核细胞分化培养为成熟的树突状细胞的方法，所述方法将CD 14+细胞分别与能分泌促进细胞成熟和分化的细胞因子的人脐静脉内皮细胞共培养，使CD 14...; 于群石晓月李伟静王璇琳贺敏乔志新冯秋月程宏张公庆王婧杨晓琮

西达本胺对人前列腺癌DU145及PC3细胞凋亡的影响被引量：1: 2012年; 目的:研究西达本胺对前列腺癌DU145、PC3细胞生长抑制及凋亡调控的作用。方法:设置西达本胺浓度分别为4、8、16、32和64μmol/L的5个处理组和对照组(未加西达本胺),分别处理DU145、PC3细胞不同时间,采用MTT法检测细胞的增殖抑制情况,用倒置显微镜观察细胞形态,用流式细胞仪进行细胞凋亡分析,用免疫印迹法检测细胞内Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-9的表达水平。结果:与对照组比较,西达本胺处理组可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;MTT法检测显示,随着西达本胺浓度的增加和作用时间的延长,对DU145、PC3细胞的增殖抑制作用增强,并呈时间、剂量正相关(P<0.01);流式细胞术显示,对照组和16、64μmol/L西达本胺组细胞凋亡率分别为42.24%、50.23%;随着西达本胺浓度的增加,Bcl-2的表达呈下调趋势,Bax、caspase-3、caspase-9的表达呈上调趋势,呈剂量正相关。结论:西达本胺对前列腺癌DU145、PC3细胞生长具有明显的抑制作用,作用机制可能与Bax、Bcl-2、caspase-3及caspase-9凋亡信号通路有关。; 程宏王璇琳赵丽晶乔志新贺敏李伟静石晓月邵晨冯秋月张公庆杨晓琮谢楠赵丽娟于群; 关键词：西达本胺前列腺癌细胞凋亡

慢病毒介导的稳定表达人GM-CSF、IL-4的EA.hy926细胞株的建立: 2011年; 目的:获得能够稳定表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)的内皮细胞株。方法:构建重组慢病毒表达载体,在293FT细胞中进行病毒的包装,用获得的高滴度慢病毒感染EA.hy926细胞株,建立能够稳定、高效表达hGM-CSF、hIL-4的EA.hy926细胞株。结果:EA.hy926感染效率达90%以上,长期传代后阳性率仍维持在90%以上;实时定量PCR和ELISA方法证实感染后细胞hGM-CSF、hIL-4在mRNA水平的表达分别是未感染细胞的25倍和9946倍,在蛋白水平的表达分别是未感染细胞的145倍和23倍。结论:构建的细胞系可以稳定表达细胞因子GM-CSF、IL-4。; 石晓月贺敏任鹏宋丽雅乔志新杨晓琮程宏冯秋月张公庆王璇琳宫宁王字玲李伟静于群; 关键词：树突状细胞转染白细胞介素4 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

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杨晓琮