杨波
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
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- 人转化生长因子-β_1基因克隆、测序及真核表达载体的构建
- 2008年
- 目的:克隆人转化生长因子-β1(TGF-β1)基因编码区cDNA序列,构建并鉴定TGF-β1真核表达载体。方法:设计含有EcoRⅠ和XholⅠ酶切位点的TGF-β1cDNA引物,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,以人白细胞mRNA为模版,扩增TGF-β1基因,纯化PCR产物,TA克隆,双酶切与pcDNA3质粒表达载体连接,转化感受态大肠杆菌JM109,酶切鉴定阳性重组子,并进行序列测定。结果:琼脂糖凝胶电泳显示,用双酶切后形成分子量1.2kb的条带,符合物理图谱,表明表达载体构建成功,序列测定结果与预测结果完全一致。结论:成功克隆了TGF-β1基因,并成功地构建了真核表达载体pcDNA3-TGF-β1。
- 金善爱柴红梅崔极哲杨波吴宏柳忠辉张晓光
- 关键词:转化生长因子-Β1基因克隆逆转录聚合酶链反应真核表达载体