江金益
- 作品数：8 被引量：86H指数：5
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 奶牛体外受精研究被引量：36
- 1989年
- 卵巢卵母细胞培养于A、B、C和D4种成熟液内的成熟率分别为83.3％,8.3％,55.8％。和100％。在A、C和D中培养成熟的卵母细胞,体外受精率分别为44.4％,54.5％。和71.6％。授精卵中发育至2-细胞,4-细胞和8-细胞期者分别为32.4％,23.7％和14.0％。2-细胞期胚胎中发育到桑椹胚和囊胚者分别为56.8％和35.1％。移植鲜胚受体5头,妊娠2头,其中1头胚胎死亡,另1头流产;移植冻胚6头受体,其中1584号受体于1989年9月23日产一雄性牛犊,初生重36.5公斤。妊娠期为282天。
- 江金益钟声范必勤
- 关键词：奶牛体外受精
- 猪卵母细胞体外成熟与冷冻附睾精子的体外受精被引量：10
- 1991年
- 由屠宰母猪卵巢分离得到505枚卵母细胞,经成熟培养,其中468枚卵丘细胞扩张,成熟率为92.7％。采用冷冻的附睾精子授精,受精率为41.9％(57/136),其中单精受精率36.8％(50/136),多精受精率5.1％(7/136)。授精卵体外培养24和48小时后的卵裂率分别为5.3％(15/258)和12.9％(30/232)。把35枚早卵裂期胚胎和250枚未见卵裂的1-细胞期受精卵移入4头受体母猪的输卵管内,其中2头妊娠,分别于1990年4月10日和29日正常分娩,共生产仔猪21头。
- 江金益钟声熊慧卿范必勤
- 关键词：体外成熟体外受精冷冻精子
- 黑白花公牛冻精受精力的检测——穿透仓鼠卵的试验被引量：4
- 1989年
- 本试验用SPA法(Sperm Penetration Assay)即精子穿透分析法对8头黑白花公牛冻精的受精力进行检测,以预测各公牛精液受精力的水平。结果:每卵表面平均精子数为3.2～9.5个,每卵内精子数为1.6～3.4个,被穿透的卵子比例即穿透率为34.9～65.7％,具雄原核的卵子比例即原核卵率为16.0～32.4％。这些数值与各公牛冻精授精500多头母牛的效果作对照,8头公牛平均80(70～90)天的不返情率为56％(45.8～71.1％),不返情率与雄原核卵率,穿透率呈高度正相关,相关系数分别为+0.82和+0.92。 另一组试验结果表明:授精时间对穿透率特别是对雄原核形成有很大影响。授精2小时后观察,没有雄原核形成,只有附着于卵子表面的精子;授精4小时后,精子已通过卵黄膜进入卵内,并开始形成雄原核;授精6小时后形成发育良好的雄原核。 这些观察结果有助于利用这项技术在生产上对公牛精液的受精力进行客观评定,为选择后备公牛提供重要的生理指标,特别是对评定冷冻精液的品质具有一定的参考价值。并为精子顶体反应、受精机理、体外受精、遗传学和胚胎学等领域的研究提供新的手段。
- 江金益董伟
- 关键词：公牛精子受精力
- 猪瘟病毒石门株基因组cDNA片断的扩增与克隆测序被引量：9
- 1996年
- 以猪瘟病毒（ＨＣＶ）中国石门株强毒的血毒、细胞毒及Ｃ系兔化弱毒的细胞毒中提取的总ＲＮＡ为模板，应用逆转录─聚合酶链式反应（ＲＴ一ＰＣＲ），在合成的两对ＨＣＶ特异引物引导下，扩增出与预计大小一致的４４１和３００ｂｐ两个核酸片断。寡核苷酸探针杂交证实确为ＨＣＶＰ_８０和ｇｐ４４／４８蛋白编码区特异性的ｃＤＮＡ片断。扩增片断克隆入ｐＵＣ_１９和ｐＢＳＫ（＋）中，并对ＨＣＶ石门株Ｐ_８０区ｃＤＮＡ片断进行测序分析，其与国外Ａｌｆｏｒｔ、Ｂｒｅｓｃｉａ株同源性分别为９０．６％和９４．６％。氨基酸水平上同源性高达９８．４％。为抗猪瘟病毒Ｐ_８０区核酶的设计和应用提供了依据。
- 王敏华江金益范必勤赵启祖谢庆阁
- 关键词：猪瘟病毒CDNA扩增
- 试管猪技术研究
- 范必勤江金益熊惠卿钟声王斌
- 该项目研究成功中国第一批试管猪。国际上以体内成熟卵与鲜精(英)、体内成熟卵与冻精(日)以及体外成熟卵与鲜精(意)体外受精分别获得试管猪。该研究建立了卵泡卵母细胞体外成熟、冷冻精子体外受精，以及受精卵体外和体内发育的技术系...
- 关键词：
- 关键词：冷冻精子体外受精基因工程育种
- 水牛体外受精研究被引量：19
- 1990年
- 从屠宰场收集水牛卵巢223个,由2—8毫米直径的卵泡中回收卵母细胞302枚,择其卵丘细胞紧密、细胞质均匀者265枚用于试验,于不同条件下体外培养24—27小时,成熟率为16.7—80％。水牛冷冻精液经解冻作精子上游和获能处理,对卵母细胞授精后培养6小时,休外受精率10—60％,移入培养液中继续培养获得一枚4-细胞期胚胎。另将受精卵移入家兔输卵管中作体内培养60小时,回收23枚受精卵中有3枚发育为16—32-细胞胚。此即表明,水牛卵母细胞可体外培养成熟和受精,并在体外或异种动物体内进行卵裂。 卵母细胞成熟培养结果,在A成熟培养液中,5％CO_2空气比空气环境培养的成熟率高,分别为58.3％和16.7％;在B成熟培养液中,37.5℃的培养效果优于39℃,成热率分别为80％和65.7％;在不同培养液中培养的卵细胞成熟率无显著差异;直径大于5毫米的卵泡卵母细胞,成熟率高于直径小于5毫米卵泡的卵母细胞,分别为79.3％和58.5％,受精率则相反,分别为23.5％和60％。
- 江金益熊慧卿范必勤
- 关键词：水牛体外受精卵母细胞
- 猪体外受精研究被引量：18
- 1990年
- 猪体外受精技术对基础研究、生产应用和促进有关高技术的研究和发展均具重要意义。我国是养猪业最发达的国家,人们素以猪肉为主要肉食。猪的世代间隔短,可集约化生产,经济效益高,通过猪体外受精技术的研究与应用,有利于引种,促进猪的品种改良,提高肉品产量与质量;体外受精技术可促进基因导入、核移植、细胞融合等高技术的研究和发展;猪胚胎具独特性质,如对低温极度敏感,其冷冻长期保存问题迄今未得到解决。因此有必要对猪卵母细胞和胚胎的特性进行基础研究。体外受精技术可提供有利的体外操作和观察条件,作为研究手段可促进基础理论的研究和发展。
- 江金益钟声熊慧卿范必勤
- 关键词：体外受精体外成熟
- 显微注射导入生长激素基因产生转基因兔和鼠被引量：1
- 1995年
- 本研究旨在建立显微注射转基因系统；获得表达人生长激素和猪生长激素基因的转基因免和鼠；探索提高动物生长性能的可能性与可行性。家兔和小鼠作超数排卵和交配处理，收集原核胚。将小鼠金属巯因启动子与人生长激素和绵羊金属巯因启动子与猪生长激素融合的基因质粒注入雄原核，观察体外和体内发育结果。用斑点杂交、ＰＣＲ技术和放射免疫检测外源基因的整合和表达情况。试验结果，胚胎回收后立即作体外培养的囊胚发育率为９０％，基因质粒注入雄原核后体外培养者为７８％，注入细胞质后培养者为３８％；基因质粒注入雄原核后作体内培养者为４１％。注入基因的原核胚，按其移植至受体的胚胎数分为４组：１０～１５、１６～２０、２１～２５和２６～３５枚，结果受体妊娠率随移植胚胎数的增加而提高，胚胎存活率（产仔率）则以２１～２５组为最高。出生仔鼠的平均基因整合率为１４．９％（７／４７），表达率为５７．１％（４／７）；检测仔兔中的基因整合率为１０．８％（４／３７），表达率为１００％（１／１）。分别获转基因鼠７只，转基因兔４只，其中获生长显著加快的转基因兔和转基因鼠各１只。本研究为获得转基因动物提出了可行的技术路线。
- 范必勤王斌江金益
- 关键词：转基因生长激素基因转移
