汪存利
- 作品数：42 被引量：134H指数：7
- 供职机构：中国人民解放军第105医院更多>>
- 发文基金：南京军区医学科技创新课题安徽省自然科学基金安徽省“十五”重大科技专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 促性腺激素释放激素类似肽主动免疫对公猪生殖机能的影响被引量：4
- 2005年
- 10头公猪在3月龄时用促性腺激素并列体二聚体(GnRHTD)主动免疫,观测内源GnRH被免疫中和所产生的内分泌和生殖机能的变化。注射GnRHTD与卵清蛋白(OVA)的偶联物2次,结果发现GnRHTD主动免疫能降低外周血清睾酮浓度,睾丸重量也明显下降。组织切片显示,曲细精管有少数退化的精原细胞。这些变化表明:公猪接种GnRHTDOVA能诱发免疫反应,中和内源GnRH的生物活性,且抑制睾酮的合成,从而导致性器官发育受阻。
- 方富贵章孝荣汪存利汪宏云吴义师
- 关键词：畜牧学主动免疫公猪
- 卵母细胞第一极体形态与女性年龄及ICSI结局的相关性研究被引量：1
- 2011年
- 目的探讨卵母细胞第一极体形态与女性年龄及ICSI结局的相关性。方法回顾性分析了2008年3月至2009年11月在我院行ICSI治疗的146个周期的临床资料,按MⅡ期卵母细胞第一极体形态分为完整极体组(1、2级极体)和异常极体组(3、4级极体),比较不同形态第一极体与年龄及ICSI结局的相关性。结果 35岁以上女性1级和2级极体的卵母细胞比例显著低于小于35岁患者(P<0.01);极体完整组的受精率、卵裂率、早裂率、优胚率均显著高于极体异常组(P<0.01);移植完整极体胚胎组的着床率和临床妊娠率显著高于移植混合胚胎(含完整极体和异常极体胚胎)组(P<0.01)。结论卵母细胞第一极体形态与年龄间存在一定的相关性,第一极体形态可作为选择移植胚胎的指标之一。
- 何瑞冰汪存利姜宏袁韦娜
- 关键词：第一极体卵母细胞ICSI年龄
- 细胞外信号调节激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶的表达水平对人精子活动力的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:比较细胞外信号调节激酶(ERK)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)的磷酸化和蛋白表达水平在正常精子和弱精子症患者精子中的差异,旨在探讨ERK和P38MAPK表达水平与精子活动力的相关性。方法:收集正常精液(精子浓度≥20×106/ml,a级精子≥25%或a+b级精子≥50%)和弱精子症患者精液(精子浓度≥20×106/ml,a级精子<25%或a+b级精子≤40%)各20份,洗涤后提取精子总蛋白,采用Western印迹方法分别检测ERK、P38MAPK的磷酸化和蛋白表达水平。结果:ERK和P38MAPK在正常精子和弱精子症患者精子中均有表达,ERK、P38MAPK蛋白表达水平和P38MAPK磷酸化水平在弱精子症患者组显著升高(P<0.05),而两组间ERK磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:人精子ERK、P38MAPK蛋白表达水平和P38MAPK磷酸化水平升高可能是精子活动力低下的原因之一。
- 丁玉芹姜宏汪存利
- 关键词：弱精子症胞外信号调节激酶P38丝裂原激活蛋白激酶
- 线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ和Ⅱ mRNA的表达与精子活动力的相关性研究被引量：1
- 2008年
- 目的比较线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COXⅠ)和Ⅱ(COXⅡ)在正常精子和弱精子症患者精子中的表达差异。方法对48份精液进行常规检查,收集活动力正常的精子和(a+b)级≤40%的弱精子症患者的精子,提取精子总RNA,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测COXⅠ,COXⅡ亚型mRNA的表达水平。结果与活动力正常的精子比较,COXⅠ和COXⅡmRNA在弱精子症患者精子中表达水平显著降低(P<0.05);精子密度与COXⅠ和COXⅡmRNA表达水平无相关性(r1=0.268,r2=0.042,P均>0.05)。结论人精子线粒体COXⅠ,COXⅡmRNA表达减少可能是精子活动力低下的原因之一。
- 周秀芬姜宏朱杰汪存利何瑞冰
- 关键词：精子能动性
- 波尔山羊及黄牛耳部成纤维细胞的体外培养被引量：18
- 2002年
- 为了获得丰富的核移植供核体细胞 ,通过活体采集波尔山羊及黄牛耳部皮肤 ,利用组织块和消化法开展原代培养 ,并进行传代培养和培养细胞的冷藏、冷冻保存实验。建立了简易的波尔山羊和黄牛成纤维细胞体外培养程序。
- 张运海章孝荣刘亚金仁桃琚书存章美玲汪存利
- 关键词：耳部成纤维细胞体外培养波尔山羊黄牛体细胞核移植技术
- DNA损伤精子对卵胞质内单精子注射结局的影响被引量：5
- 2011年
- 目的探讨精子DNA损伤对卵胞质内单精子注射(ICSI)结局的影响。方法采用DNA吖啶橙染色方法(AOT)对接受ICSI治疗的63例男方精液进行精子DNA完整性分析。按精子DNA碎片指数(DFI)分为DFI>27%组与DFI≤27%组,比较两组间的受精率、早期卵裂率、优质胚胎率、胚胎着床率和妊娠率。按有无早期卵裂胚进行分组,比较两组间的优质胚胎率。结果 DFI≤27%组的早期卵裂率、优质胚胎率、胚胎着床率和妊娠率均显著高于DFI>27%组(P<0.01),但受精率在两组间差异无统计学意义;DFI与早期卵裂率、优质胚胎率、胚胎着床率和妊娠率间呈显著负相关(P<0.05)。早期卵裂组的优质胚胎率(85.3%)显著高于早期无卵裂组(65.6%)(P<0.01)。结论 ICSI过程中,精子DNA损伤并不影响受精率,但对早期卵裂率、胚胎发育和临床结局有负面影响;早期卵裂是预测胚胎发育和胚胎质量的重要指标。建议行ICSI前进行精子DNA完整性评估。
- 丁玉芹姜宏何瑞冰汪存利
- 关键词：精子DNA损伤
- 诱导骨髓SSEA-1^+干细胞向卵母细胞分化的初步研究被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨骨髓SSEA-1+干细胞向卵母细胞分化的潜能。方法:采用免疫磁珠分选系统(MACS)分选骨髓中SSEA-1+干细胞,接种于小鼠成纤维细胞(mE Fs)饲养层上,在含1 000 U/ml白血病抑制因子(LIF)的DMEM/F12培养液中将SSEA-1+干细胞传代培养至第2代(P2),撤去饲养层,在含20 ng/ml骨形成蛋白4(BMP4)的培养液中进行定向诱导,并分阶段加入体积分数10%人卵泡液、0.005 IU/ml卵泡刺激素(FSH)和0.003 IU/ml黄体生成素(LH)。光学显微镜下观察细胞形态学变化,检测不同发育阶段生殖细胞相关特异性基因Dazl、Fragilis、Mvh、Nobox、Oct4、Stella、STRA8、Gdf9的表达。结果:骨髓SSEA-1+干细胞生殖细胞相关特异性基因表达水平均显著高于骨髓单个核细胞和SSEA-1-细胞(P<0.05)。小鼠骨髓SSEA-1+干细胞与m EFs共培养后呈圆形,碱性磷酸酶染色阳性,显示细胞处于未分化状态。BMP4诱导7 d SSEA-1+干细胞形成细胞集落,14 d可见类胚体(EB)样结构形成,21 d可观察到卵母细胞样结构,且随诱导时间的延长生殖细胞相关特异性基因尤其卵母细胞减数分裂基因Stra8和Gdf9表达水平显著升高。结论:骨髓SSEA-1+干细胞具备向类卵母细胞样细胞分化的潜能。
- 范静姜宏殷慧群汪存利何瑞冰
- 关键词：细胞分化QRT-PCR
- 不同稀释介质及方式对化学发光免疫法测定血清雌二醇浓度的影响被引量：5
- 2015年
- 目的探讨不同稀释介质及方式对血清雌二醇浓度(estradiol,E2)的影响。方法采用化学发光免疫法进行血清雌二醇浓度测定,以60例仪器报告结果覆盖线性范围内外的患者血清作为样本,每例等分为若干份,分别使用厂商指定稀释液S0、低值血清和生理盐水作为稀释介质,进行手工1∶1及1∶4稀释后上机检测,换算最终浓度;同时每管均设3组平行管取其均值,并进行统计分析。结果用厂商指定稀释液S0、低值血清进行组间和组内不同比例稀释后雌二醇的最终浓度的差异无统计学意义(P>0.05),使用生理盐水进行不同比例稀释后雌二醇的最终浓度与原始值的差异有统计学意义(P<0.01)。结论低值血清可作为化学发光免疫法测定高浓度雌二醇的替代型稀释液,而生理盐水则不适宜作为化学发光免疫法测定高浓度雌二醇的稀释介质。
- 李洋何瑞冰曹振毅殷慧群汪存利朱杰姜宏
- 关键词：化学发光免疫法雌二醇
- 表皮生长因子和干细胞因子对小鼠生精细胞增殖与分化的作用被引量：1
- 2014年
- 目的：观察表皮生长因子（EGF）和干细胞因子（SCF）体外促小鼠生精细胞增殖、分化的效应。方法：对7~8日龄雄性昆明小鼠生精细胞进行混合细胞体外培养,在培养液中分别添加不同浓度（5、10、20、40、100 ng/ml）的EGF和SCF,并进行EGF和SCF的交互实验,观察生精细胞的存活率和形态学变化,并对粗线期精母细胞特异性磷蛋白基因（P19）、单倍体精子细胞特异性转化蛋白基因（TP1）及染色体倍性进行检测。结果：加入EGF或SCF 2-4 d,各组均可见不同程度的细胞增殖,细胞呈团或族状,以20 ng/ml EGF组和40 ng/ml SCF组最为明显;培养第7天,单一添加20 ng/ml EGF或40 ng/ml SCF组生精细胞数和存活率显著高于与其它各组（P〈0.05）,且40 ng/ml SCF组P19/TP1基因表达显著低于其它各组,单倍体细胞率显著高于其它各组（P〈0.05）。EGF与SCF配伍时,可显著增加体外培养后生精细胞数（P〈0.05）。结论：在混合生精细胞体外培养体系中,添加一定浓度的EGF和SCF可显著提高生精细胞数和存活率,而且SCF可提高单倍体精子的形成率;两者交互实验时,对细胞增殖有一定的叠加效应。
- 汪存利姜宏孙静波
- 关键词：生精细胞表皮生长因子干细胞因子体外培养RT-PCR流式细胞术
- 早期补救卵胞浆内单精子注射在常规体外受精不受精或低受精周期中的应用
- 2012年
- 常规体外受精一胚胎移植（in vitro fertilizationembryo transfer，IVF—ET）周期中，卵母细胞受精低下或不受精的发生率约为10％～20％。补救性卵胞浆内单精子注射（rescue intracytoplasmic sperm injection，rescueICSI）作为受精失败的一种补救措施已在许多生殖中心实施，早期多行晚期补救，一般在受精后16～20h观察原核形成情况，
- 殷慧群姜宏何瑞冰汪存利
- 关键词：受精失败补救ICSI短时受精
