汪庆
- 作品数:6 被引量:10H指数:2
- 供职机构:常州大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 羟基乙腈水解酶菌株的筛选及其催化特性被引量:1
- 2011年
- 以羟基乙腈为唯一氮源,从土壤中筛选到一株腈水解酶产生菌CCZU-12,经形态观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析,鉴定该菌为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。对菌株CCZU-12产腈水解酶的培养条件及催化反应条件进行优化,最适产酶培养条件为:碳源为10 g/L乙酸钠,氮源为5 g/L酵母粉,金属离子为1.0 mmol/L Mg2+,培养温度30°C,pH值7.0,接种量4%,装液量50 mL/250 mL;最适催化反应温度35°C,pH值7.0,反应120 h,羟基乙腈转化率达到98.9%。
- 王利群陈萦慈孙晓慧蔡志强汪庆
- 关键词:羟基乙酸腈水解酶假单胞菌
- 一株脂肪酶产生菌及其脂肪酶催化性质的初步研究被引量:5
- 2012年
- 从各种含油脂的土壤中筛选分离到一株高选择性拆分(R,S)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯[(R,S)-HPBE]的产脂肪酶菌株CF-12,经形态观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析,鉴定该菌为沙雷氏菌属(Serratia sp.)。对菌株CF-12产脂肪酶的发酵条件进行了初步优化,确定最适产酶条件为:蔗糖5 g/L,酵母粉10 g/L,金属离子Mg2+0.75 mmol/L,发酵培养24 h,脂肪酶活性可达20.1 U/mL。该脂肪酶最适反应温度和pH值分别为40℃和7.0。利用冻干酶粉拆分(R,S)-HPBE 15 h,(R)-HPBE产率达39.6%,ee=90.8%。
- 王利群汪庆何玉财蔡志强汪云王明慧
- 关键词:脂肪酶(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯
- 截短人胱硫醚β-合成酶的可溶性表达、纯化及活性鉴定被引量:3
- 2012年
- 目的构建截短人胱硫醚β-合成酶(T-hCBS)基因原核表达载体,得到可溶性的T-hCBS蛋白,为同型半胱氨酸检测试剂盒的开发打下基础。方法通过优化T-hCBS基因,克隆并构建重组表达质粒pET15b/T-hCBS,转化大肠埃希菌BL21。使用Ni 2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,再通过HiTrap脱盐柱脱盐,采用比色法检测目的蛋白活性。结果重组蛋白在大肠埃希菌中可以高效表达,产量为44mg/L,比活约1 100U/mg。15%SDS-PAGE显示其相对分子质量为45kD,与预计大小一致。表达菌体超声破碎后上清及纯化的蛋白溶液均呈现红色。结论成功克隆和表达了T-hCBS蛋白,并得到高产高酶活性的可溶性蛋白,对同型半胱氨酸检测试剂盒的开发有一定的潜在应用价值。
- 王利群顾雅平曹利民汪庆于海燕奚学志孙培培沈关心
- 关键词:胱硫醚Β-合成酶可溶性蛋白
- 一种粘红酵母及其在不对称催化制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯中的应用
- 本发明涉及一种微生物新菌种粘红酵母CCZU-G5及其在生物催化2-氧代-4苯基丁酸乙酯制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯中的应用,所述的粘红酵母CCZU-G5保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为6328。...
- 王利群汪云汪庆何玉财卿青朱劼王明慧
- 一种粘红酵母及其在不对称催化制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯中的应用
- 本发明涉及一种微生物新菌种粘质红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)CCZU-G5及其在生物催化2-氧代-4苯基丁酸乙酯制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯中的应用,所述的粘质红酵母CCZU-G5保...
- 王利群汪云汪庆何玉财卿青朱劼王明慧
- 文献传递
- 固定化沙雷氏菌脂肪酶拆分(R,S)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯被引量:2
- 2012年
- 利用海藻酸钙-戊二醛交联法对本实验室筛选到的一株能选择性拆分(R,S)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯〔(R,S)-HPBE〕的沙雷氏菌脂肪酶进行固定化,并对固定化脂肪酶的酶活和拆分条件进行了研究。结果表明,最适反应温度为50℃,pH=7.0,底物浓度40 mmol/L,ρ(酶液)=200 g/L,在该条件下,反应10 h后,(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯〔(R)-HPBE〕产率达93.4%,光学纯度(e.e.)为96.2%。连续反应12批次,固定化脂肪酶仍可使(R)-HPBE产率维持在80%以上。
- 汪庆王利群何玉财顾雅平王明慧汪云
- 关键词:固定化脂肪酶手性拆分生物工程