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盐酸奥布卡因对人角膜内皮细胞影响作用的实验研究被引量：8: 2012年; 目的:揭示眼科局部麻醉剂盐酸奥布卡因(oxybuprocaine hydrochloride,OBPC-HCl)对体外培养人角膜内皮(HCE)细胞的影响作用,为眼科临床安全用药提供实验依据。方法:用不同浓度OBPC-HCl处理体外培养的HCE细胞,在倒置显微镜下观察细胞的生长和形态变化,用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光双染色法检测质膜的通透性,用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的断片化,用透射电镜检测细胞的超微结构。结果:OBPC-HCl在62.5mg/L～4g/L的浓度范围内均能不同程度地引起HCE细胞出现细胞皱缩、胞内空泡化、质膜通透性增大、染色质凝缩、凋亡小体和DNA断片化等典型的细胞凋亡特征,并具有浓度和时间依赖性,临床使用浓度4g/LOBPC-HCl对HCE细胞的凋亡诱导作用最大,处理1h后HCE细胞的凋亡率已高达100%。结论:OBPC-HCl在62.5mg/L～4g/L的浓度范围内能显著诱导HCE细胞凋亡,在眼科临床应用中对HCE细胞的毒副作用极大。; 樊廷俊温茜于苗苗葛源苗莹王德平; 关键词：人角膜内皮细胞盐酸奥布卡因细胞凋亡凋亡小体

氧氟沙星对人角膜上皮细胞的毒性作用及其细胞与分子机理研究被引量：1: 2016年; 以非转染人角膜上皮(HCEP)细胞系为体外实验模型,研究了眼科常用抗生素药物氧氟沙星(ofloxacin,OFX)的细胞毒性及其细胞与分子机理。体外培养的HCEP细胞用不同浓度OFX处理后,分别利用光镜和M TT方法测定细胞病变效应和细胞活力,用流式细胞术、吖啶橙/溴化乙锭双染色、DNA凝胶电泳和透射电镜检测细胞周期阻滞和细胞凋亡,使用ELISA、Western杂交和流式细胞术鉴定胱天蛋白酶的激活、胞质中线粒体特有凋亡激活蛋白的含量和线粒体跨膜电位(MTP)的崩解。结果显示,OFX在质量浓度大于0.375 g/L时,可剂量和时间依赖性地引起HCEP细胞出现细胞病变效应、活力下降和质膜通透性升高,并引起细胞周期阻滞在S期,磷脂酰丝氨酸外翻,DNA断片化,凋亡小体形成,胱天蛋白酶-2、-9和-3的激活,胞质中细胞色素c和凋亡诱导因子含量的上调,以及MTP崩解。可见,OFX在质量浓度为其临床治疗质量浓度的1/8以上时,能通过诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡对HCEP细胞产生显著细胞毒性,其凋亡诱导作用要受到死亡受体介导的线粒体依赖性信号途径的调控。; 王德平樊文艺温茜樊廷俊; 关键词：氧氟沙星人角膜上皮细胞细胞毒性

体外培养人角膜内皮细胞的UVB损伤及抗坏血酸的抗氧化保护作用研究被引量：2: 2015年; 以非转染人角膜内皮（HCE）细胞系为体外实验模型系统研究了UVB氧化损伤、Asc抗氧化保护及其分子机理。体外培养的HCE细胞经UVB和/或Asc处理后,利用MTT和光镜对细胞的活力和形态进行了检测,利用8-羟基脱氧鸟苷免疫荧光染色对DNA的氧化损伤进行了检测,并利用二氢乙啶染色对胞内活性氧（ROS）的水平进行了检测。结果显示,100-800 mj/cm^2的UVB辐射能剂量和时间依赖性地损伤HCE细胞的活力;200 mj/cm^2UVB（自然太阳光中的平均辐射剂量）能引起HCE细胞发生皱缩,并显著增加细胞的DNA氧化损伤程度及胞内ROS水平;而1 mmol/L Asc不仅能显著增强HCE细胞的活力、促进细胞分裂,而且还能显著降低200 mj/cm^2UVB所引起的DNA氧化损伤及胞内ROS水平。综上所述,UVB通过诱导ROS的产生进而引起DNA氧化损伤,对HCE细胞具有显著的氧化损伤作用;而Asc能够通过降低UVB诱导的ROS水平进而保护DNA免受氧化损伤,对HCE细胞的UVB损伤具有一定的抗氧化保护作用。本文研究结果对于利用Asc等抗氧化保护剂保护HCE细胞免受UVB氧化损伤具有一定的理论指导价值。; 温茜樊廷俊; 关键词：人角膜内皮细胞 UVB 活性氧抗坏血酸

人角膜内皮细胞体外增殖的影响因素、分子机理及其激活途径研究: 现有研究结果显示，成年后已丧失增殖能力的HCE细胞虽然被拘留在细胞周期的G1期，但仍保留有激活后恢复增殖的潜能。许多研究证实，接触抑制和TGF-β2是体内抑制HCE细胞增殖的主要原因，解除其接触抑制状态和加入TGF-β2...; 温茜; 关键词：细胞增殖分子机理

噻吗心安对人角膜内皮细胞的影响作用研究被引量：7: 2013年; 目的:揭示抗青光眼药物噻吗心安(timolol maleate)对体外培养人角膜内皮(HCE)细胞的影响作用,为其眼科临床安全用药提供实验依据。方法:用不同浓度噻吗心安处理体外培养的HCE细胞,在倒置显微镜下观察细胞的生长、增殖和形态变化,利用吖啶橙/溴化乙锭荧光双染色法检测质膜的通透性,利用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的断片化,利用透射电镜观察细胞的超微结构。结果:噻吗心安在0.15625～5g/L的浓度范围内均能不同程度地引起HCE细胞出现不同程度的生长缓慢、数量减少、胞质皱缩、胞内空泡化、变圆脱落、质膜通透性增大、染色质凝缩、DNA断片化和出现凋亡小体等典型的细胞凋亡特征,并具有浓度和时间依赖性。临床使用浓度2.5～5g/L的噻吗心安对HCE细胞的凋亡诱导作用最大,处理28h的凋亡率高达83.23%～96.71%。结论:噻吗心安在0.15625～5g/L的浓度范围内能显著诱导HCE细胞凋亡,临床使用浓度时对HCE细胞的毒性作用极大,在眼科临床中应谨慎使用。; 樊廷俊随蓓蓓王清扬温茜孙倩于苗苗葛源; 关键词：人角膜内皮细胞噻吗心安细胞凋亡凋亡小体

眼科表面麻醉剂爱尔卡因和盐酸奥布卡因对人角膜内皮细胞的凋亡诱导作用研究: 眼科表面麻醉剂随着眼科手术技术和设备的发展得到了越来越广泛的应用，因此，其对角膜的毒副作用越来越得到大家的关注，其中，最常用的两种表面麻醉剂是爱尔卡因和盐酸奥布卡因。角膜主要由内皮、基质、上皮及其衍生物组成，而哺乳动物(...; 温茜; 关键词：人角膜内皮细胞爱尔卡因盐酸奥布卡因凋亡诱导

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温茜