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焦涛
作品数:
2
被引量:4
H指数:1
供职机构:
中国医学科学院基础医学研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
常永生
中国医学科学院基础医学研究所
李静静
北京协和医院
何小东
北京协和医院
刘长征
中国医学科学院基础医学研究所
崔安芳
中国医学科学院基础医学研究所
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MicroRNA-29抑制胰岛素刺激的大鼠L6细胞葡萄糖吸收
被引量:4
2013年
目的研究microRNA-29(miR-29)在糖尿病模型大鼠(GK)骨骼肌组织中的表达,并探讨其对大鼠骨骼肌细胞L6葡萄糖吸收的影响。方法利用real-time PCR方法检测miR-29家族,miR-29a、miR-29b及miR-29c在GK大鼠骨骼肌组织中的表达特征。L6骨骼肌细胞诱导分化为肌管细胞,经葡萄糖与胰岛素处理后,利用real-time PCR与Northern blot分析miR-29家族的表达情况。选择腺病毒表达系统在L6分化的肌管细胞中过表达或抑制内源miR-29的功能,利用葡萄糖吸收实验检测胰岛素刺激的葡萄糖吸收情况。结果 miR-29a、miR-29b及miR-29c在GK大鼠骨骼肌组织中表达上调。L6分化的肌管细胞经葡萄糖与胰岛素处理,miR-29b和miR-29c的表达上调,而miR-29a表达无明显变化。在L6分化的肌管细胞中过表达miR-29可以明显抑制胰岛素刺激的葡萄糖吸收。结论miR-29参与了GK大鼠骨骼肌细胞葡萄糖耐受及胰岛素抵抗的产生,抑制其表达可能是治疗Ⅱ型糖尿病的一种新策略。
刘长征
李静静
焦涛
何小东
常永生
关键词:
胰岛素抵抗
KLF9基因腺病毒载体的构建及其抗ROS功能
2014年
目的构建及鉴定KLF9基因过表达的腺病毒载体,初步研究KLF9在对抗反应活性氧方而的功能。方法克隆KLF9过表达质粒,定向克隆人穿梭载体pAdTrack—CMV,PmeI酶切线性化,转化E.coli.BJ5183(含腺病毒载体pAdEasy-1)感受态细菌,产生重组腺病毒载体。重组载体经过卡那霉素抗性筛选和限制性内切酶分析确重组后,再用Pac I线性化重组质粒,同收,转染293A细胞,7—12d包装产生病毒颗粒。利用H2O2和过表达KLF9的腺病毒处理体外培养的C57BIJ6J小鼠原代肝脏细胞,实时定量PCR检测KLF9和抗ROS基因(CAT、SOD2和GPx1)的表达。结果H2O2可以刺激C57BIJ6J小鼠原代肝脏细胞KLF9和抗ROS基因的表达上调(P〈0.05)。定虽PCR以及Western blot结果显示成功包装过表达KLF9腺病毒,感染效率达90%以上。过表达KLF9可以上调抗ROS基因的表达水平(P〈0.05)。结论初步认定KLF9基因可参与C57BL/6J小鼠原代肝脏细胞中抗ROS基因的调节。
焦涛
崔安芳
常永生
关键词:
腺病毒
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