王中南
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：东北师范大学更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金吉林省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Pkm2-shRNA真核表达载体的构建和对急性早幼粒细胞白血病耐药细胞株的作用研究被引量：1
- 2010年
- 本研究旨在构建M2型丙酮酸激酶(M2-pyruvate kinase;PKM2)的小发夹结构RNA(shRNA)的真核表达载体,研究特异性沉默pkm2基因对急性早幼粒细胞白血病(APL)耐药性的影响。设计pkm2基因的3个特异shRNA序列,利用基因重组技术将其克隆到含有U6启动子的PBSU6载体上,通过酶切和测序等方法鉴定重组质粒的正确性。利用Western blot方法检测了pkm2-shRNA对急性早幼粒细胞白血病耐药细胞株NB4R2细胞内源性M2-PK蛋白表达的影响,通过NBT还原实验检测了pkm2基因沉默后NB4R2细胞分化情况。结果表明:成功构建了3个有效特异的pkm2-shRNA,在蛋白水平上证明了其对NB4R2细胞M2-PK基因沉默的有效性。发现干涉M2-PK基因后,可显著地促进耐药细胞NB4R2细胞的分化。结论:DNA载体途径的pkm2-shRNA能促进早幼粒细胞白血病细胞的分化,具有基因靶向药物开发前景。
- 孙明莉王冠军李江崔久嵬张爱丽王中南李晓萌李薇
- 关键词：M2型丙酮酸激酶急性早幼粒细胞白血病
- pEGFP-N1-Cameleons质粒稳定转染前列腺癌pc3细胞系的建立及其ZnSO4诱导下Ca2+浓度变化的研究
- Ca作为细胞内的信息传递物质,在很多生理、病理过程中都发挥了重要的作用,如细胞分化、细胞跨膜信号传导、受精,还介导多种可兴奋细胞的兴奋—偶联,同时通过钙调蛋白(Calmodulin,CaM)参与细胞生长和分化的调控。近期...
- 王中南李江张俊方甄园丽李晓萌
- 文献传递
- 前列腺癌激素非依赖性转变和细胞凋亡过程中PIASy与hZimp10启动子甲基化修饰变化的对比研究
- DNA甲基化(DNA mcthylation)是真核生物基因组最常见的一种DNA共价修饰形式,是表观遗传学的一个重要方面。这一修饰现象广泛存在于多种生物体中,且与肿瘤的进展密切相关。肿瘤中普遍存在DNA甲基化状态的改变,...
- 王中南
- 关键词：PIASY前列腺癌甲基化修饰
- 文献传递
- PIAS3的Myc融合蛋白真核表达重组质粒的构建
- 2009年
- 目的:构建PIAS3(活化型STAT3抑制蛋白)的Myc融合蛋白真核表达重组质粒,并表达融合蛋白Myc-PIAS3。方法:采用PCR方法,扩增鼠PIAS3基因全长cDNA编码区序列。将该1851bp的特异性片段连接到T载体上,将其亚克隆至pCMV-Myc真核表达载体的SalⅠ和NotⅠ位点之间。将pCMV-Myc-PIAS3重组质粒转染前列腺癌PC3细胞,利用Myc抗体通过Western blotting法检测融合蛋白Myc-PIAS3的表达。结果:重组pCMV-Myc-PIAS3质粒通过酶切和测序鉴定了其正确性。EcoRⅠ酶切鉴定时有4357和1318bp2条带,XbaⅠ酶切鉴定时有3291bp和2384bp2条带,与预期结果一致。测序结果显示,13个氨基酸Myc在N端,然后是阅读框架正确的PIAS3的基因序列。pCMV-Myc-PIAS3重组质粒转染PC3细胞,利用Myc抗体通过Western blotting法检测融合蛋白Myc-PIAS3的表达,在相对分子质量68000处检测到特异的蛋白表达条带。结论:成功构建pCMV-Myc-PIAS3重组质粒,并表达融合蛋白Myc-PIAS3。
- 李江甄园丽杨南扬张俊芳王中南李晓萌
- 关键词：PIAS3重组质粒
