王春光
- 作品数：42 被引量：177H指数：8
- 供职机构：重庆医科大学附属永川医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家中医药管理局基金资助项目国家中医药管理局中医药科学技术研究专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 抑制JTV1基因表达对大黄素引起的K562细胞凋亡的影响及其机制被引量：4
- 2011年
- 目的探讨抑制JTV1基因表达对大黄素引起的人白血病K562细胞系凋亡的影响及其机制。方法将pGene-Sil-1-JTV1-1.1 siRNA重组质粒、pGeneSil-1-N.1阴性对照质粒及pGeneSil-1空载体分别转染人K562细胞,通过集落形成试验检测细胞的增殖能力;各组转染K562细胞经80μmol/L大黄素处理后,流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡率,RT-PCR法检测细胞中凋亡相关基因Bcl-2、Bax、C-myc转录水平的变化,Western blot法检测Bcl-2、Bax、C-myc翻译水平的变化。结果抑制JTV1基因的表达后,K562细胞的增殖能力明显提高;抑制JTV1基因表达可使经80μmol/L大黄素处理的K562细胞G1期细胞比例下降,并减轻大黄素引起的细胞凋亡,同时,细胞Bax基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平均明显下降,而Bcl-2基因和C-myc基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平则明显上调。结论抑制JTV1基因表达可能通过上调Bcl-2和C-myc基因的表达,下调Bax基因的表达,促进K562细胞的增殖,并阻止细胞凋亡。
- 吴燕刘北忠王翀朱丹王春光金丹婷高艳军黎亮
- 关键词：K562细胞细胞凋亡BCL-2基因C-MYC基因BAX基因
- 蜂毒素对人K562细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨蜂毒素对K562细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其与Bax和Bc l-2表达变化的关系。方法 BALB/C裸鼠皮下接种K562细胞,成瘤后随机分为低(30μg/kg)、中(60μg/kg)、高浓度(120μg/kg)蜂毒素组以及阴性对照组、羟基脲阳性对照组5个实验组。观察各组肿瘤生长情况。采用HE染色光镜和透射电镜方法观察肿瘤细胞的凋亡情况,W estern B lot方法观察肿瘤组织中Bax和Bc l-2蛋白表达情况,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤组织中促凋亡基因(Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bc l-2)mRNA水平。结果各用药组抑瘤作用与阴性对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),高浓度蜂毒素组与羟基脲阳性对照组具有同等的抑瘤效应(P>0.05),光镜和电镜检测发现低、中、高浓度蜂毒素组均可见瘤细胞凋亡和坏死,其中以高浓度组最为显著,羟基脲组部分瘤细胞以坏死为主。W estern B lot结果表明蜂毒素处理后肿瘤组织中Bax蛋白表达上调,Bc l-2蛋白表达下调。RT-PCR结果显示蜂毒素处理后肿瘤组织中Bax mRNA表达上调,Bc l-2mRNA表达下调。结论蜂毒素可以明显抑制K562细胞在裸鼠体内的生长。蜂毒素通过上调Bax的表达、下调Bc l-2的表达,进而促进肿瘤细胞凋亡,这可能是其发挥抗瘤作用的机制之一。
- 秦进王春光
- 关键词：蜂毒素移植瘤裸鼠BAX
- 大黄素诱导裸鼠体内白血病K562细胞凋亡过程中PI3K/AKT通路相关分子表达的变化被引量：12
- 2011年
- 目的:观察大黄素作用后裸鼠体内白血病K562细胞PI3K/AKT信号通路的分子变化,以探讨大黄素是否依赖PI3K/AKT信号通路参与K562细胞凋亡发生。方法:建立裸鼠K562细胞皮下移植瘤模型,腹腔连续给药12d后,处死裸鼠,称取瘤体质量,计算抑瘤率。采用HE染色和透射电子显微镜观察肿瘤细胞的凋亡情况。应用RT-PCR法检测肿瘤组织中PI3K、AKT和FoxO3a的mRNA表达水平。蛋白质印迹法检测肿瘤组织中PI3K、AKT和FoxO3a蛋白的表达水平。结果:低、中、高剂量组大黄素作用后肿瘤相对体积(V/V0)分别为8.90±0.24、5.62±0.17和2.06±0.31,与0.9%氯化钠溶液对照组(V/V0为11.83±0.47)相比,大黄素处理组的肿瘤体积明显缩小,差异具有统计学意义(P<0.01)。光学显微镜和电子显微镜观察发现,大黄素能够诱导K562细胞发生明显的凋亡。RT-PCR结果表明,不同剂量的大黄素能够引起PI3K和AKT mRNA的表达下调,而FoxO3a mRNA表达上调,且有剂量依赖性。蛋白质印迹法结果表明,大黄素处理组移植瘤组织中PI3K、AKT蛋白表达水平明显降低,而FoxO3a蛋白水平明显升高。结论:大黄素能够明显抑制人白血病K562细胞裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与其抑制PI3K/AKT信号转导通路有关。
- 王春光刘北忠曾丽刘永立刘俊霞刘谢添王维
- 关键词：白血病大黄素异种移植模型抗肿瘤试验近交BALBPI3K/AKT信号转导通路
- JTV1对K562细胞增殖和凋亡的影响及其机制被引量：4
- 2011年
- 目的观察上调JTV1基因的表达对人白血病K562细胞系增殖与凋亡的影响并探讨其机制。方法将携带有JTV1基因的pcDNA3.1-JTV1载体转染人K562细胞作为阳性转染组,转染pcDNA3.1空载体作为空载体转染组,未转染的K562细胞为未转染组。通过集落形成实验检测各组K562细胞的增殖能力,采用流式细胞术与Annexin-PI双染色结合分析细胞周期和细胞凋亡率,同时采用RT-PCR法检测JTV1基因及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、C-myc mRNA水平的变化,采用Western blotting检测基因JTV1及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、C-myc蛋白水平的变化。结果集落形成实验结果显示上调JTV1基因表达后K562细胞的增殖能力明显降低。流式细胞术与Annexin-PI双染色检测结果显示,与空载体转染组及未转染组相比,阳性转染组K562细胞的G期细胞比例明显升高(P<0.05);阳性转染组中Bax基因的mRNA水平和蛋白水平较空载体转染组及未转染组均明显上升,而Bcl-2基因和C-myc基因的mRNA水平和蛋白水平则明显下调(P<0.05)。结论 JTV1基因过表达可能通过抑制基因Bcl-2和C-myc的表达增强基因Bax的表达,从而抑制K562细胞系的增殖并促进其凋亡。
- 吴燕刘北忠王翀钟梁朱丹王春光金丹婷高艳军黎亮
- 关键词：基因基因BCL-2基因C-MYC基因BAXK562细胞
- 大黄素诱导白血病K562细胞凋亡的实验研究被引量：8
- 2009年
- 目的:探讨大黄素对人白血病K562细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用。方法:采用MTT法检测大黄素对K562细胞的增殖抑制作用;通过Wight-Giemsa染色(W-G染色),在普通光镜下观察细胞的形态学变化;运用AnnexinV/PI双标记法检测大黄素对K562细胞的凋亡效应;采用流式细胞技术检测细胞周期变化与凋亡情况;通过比色法检测Caspase-3、8、9的相对活性,分析大黄素诱导K562细胞凋亡的信号途径。结果:大黄素能显著抑制K562细胞的增殖,作用24、48、72h后的半数抑制率浓度分别为80、50、40μmol/L;处理组细胞在普通光镜下可见典型的凋亡形态学改变;AnnexinV/PI双标记法检测到K562细胞在大黄素的诱导下出现早期凋亡并呈剂量依赖性(P<0.01);流式细胞仪结果分析发现,处理组的K562细胞被阻滞于G0/G1期,与对照组相比,凋亡率明显升高并呈现剂量依赖性(P<0.01);大黄素可触发Caspase-3、8、9的活性增高(P<0.01)。结论:大黄素能有效地抑制K562细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制和Caspase信号途径的活化有关。
- 金丹婷刘北忠刘畅王春光王翀王东生郝坡钟梁
- 关键词：大黄素K562细胞细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- NLS-RARα蛋白相互作用蛋白的筛选与验证(英文)被引量：6
- 2009年
- 急性早幼粒细胞白血病(APL)具有特征性染色体易位,产生的PML-RARα融合基因在其发生发展中有重要作用.PML-RARα融合蛋白在细胞内被中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)切割为PML突变蛋白(核定位信号NLS缺失)和RARα突变体(NLS-RARα,包含有PML的核定位信号),这两段蛋白质在APL的发生中可能具有重要作用.为进一步研究NLS-RARα的生物学功能,运用酵母双杂交技术在白血病cDNA文库中筛选与其作用的蛋白质.首先PCR技术扩增NLS-RARα编码序列,克隆至诱饵载体pGBKT7,测序鉴定后将其转化酵母AH109.免疫印迹检测到诱饵蛋白表达后,将含有诱饵载体的AH109与含有白血病cDNA文库的酵母Y187交配,在含有X-α-gal的营养缺陷性培养基上选择和筛选二倍体酵母.经回转实验和测序分析验证得到8个与NLS-RARα相互作用的蛋白质.为进一步验证这些相互作用,克隆其中的JTV-1蛋白,利用间接免疫荧光,GSTpull-down和免疫共沉淀技术成功验证了它与NLS-RARα的相互作用.为进一步探讨APL的发生机制提供了新的线索.
- 王翀钟梁王东生刘北忠廖飞郝坡刘畅金丹婷王春光
- 关键词：白血病酵母双杂交蛋白质相互作用
- 贝伐珠单抗联合化疗治疗晚期乳腺癌疗效及安全性的Meta分析被引量：10
- 2021年
- 目的:系统评价贝伐珠单抗联合化疗治疗晚期乳腺癌的疗效及安全性。方法:计算机检索PubMed、The Cochrane Library、EMbase、维普、中国知网和万方等数据库,检索时间为建库至2020年9月,按照严格的纳入和排除标准筛选文献和提取资料后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。最终纳入10篇包括5210例患者。主要研究终点为中位无进展生存期(median progression free survival,mPFS)、中位总生存期(median overvall survival,mOS)、客观缓解率(objective response rate,ORR)及安全性。结果:系统评价结果显示,贝伐珠单抗联合化疗较单纯化疗能有效改善晚期乳腺癌的ORR[比值比(odds ratio,OR)=1.79,95%可信区间(confidence interval,CI)为1.56~2.05,P<0.00001]和mPFS[风险比(hazard ratio,HR)=0.70,95%CI为0.63~0.78,P<0.00001],但在mOS中并未表现出优势,差异无统计学意义(HR=0.94,95%CI为0.84~1.05,P=0.28)。安全性方面,Ⅲ级及以上不良反应,联合治疗组中蛋白尿(OR=10.87,95%CI为4.68~25.22,P<0.00001)、高血压(OR=8.39,95%CI为3.56~19.78,P<0.00001)和神经毒性(OR=1.36,95%CI为1.03~1.79,P=0.03)的发生率均高于单纯化疗组,差异有统计学意义;而粒细胞减少(OR=1.25,95%CI为0.95~1.65,P=0.11)及出血事件(OR=1.95,95%CI为0.96~3.95,P=0.07)的发生率差异无统计学意义。结论:相较于单纯化疗,联合贝伐珠单抗能有效改善晚期乳腺癌患者ORR及mPFS,但高血压、蛋白尿和神经毒性不良反应发生率较高。
- 杜林娟刘霜李明王春光
- 关键词：抗肿瘤联合化疗方案分子靶向治疗META分析
- 带核定位信号的维甲酸受体α与Ubiquilin 1蛋白相互作用的验证(英文)被引量：2
- 2010年
- 目的:验证带有核定位信号的维甲酸受体α(nuclear localization signal-retinoic acid receptorα,NLS-RARα)与Ubiquilin 1(UBQLN1)蛋白之间的相互作用。方法:将表达NLS-RARα诱饵蛋白和UBQLN1靶蛋白的两种重组表达质粒pGBKT7-NLS-RARα及pACT2-UBQLN1共转化AH109酵母菌,通过酵母双杂交技术验证两者在活细胞内的相互作用;构建真核细胞表达载体pCMV-HA-NLS-RARα和pCMV-Myc-UBQLN1,经酶切鉴定后,共转染HEK293细胞,利用抗HA多克隆抗体沉淀,抗Myc单克隆抗体检测验证他们之间的相互作用。结果:pGBKT7-NLS-RARα及pACT2-UBQLN1质粒共转化AH109酵母菌后,可见蓝色阳性克隆;构建的重组表达载体pCMV-HA-NLS-RARα和pCMV-Myc-UBQLN1经酶切鉴定成功,转染HEK293细胞后,用免疫共沉淀技术检测到Myc-UBQLN1蛋白的表达。结论:酵母双杂交和免疫共沉淀技术可验证NLS-RARα与UBQLN1之间存在相互作用。
- 朱丹王翀刘北忠吴燕钟梁王春光
- 关键词：免疫共沉淀蛋白质相互作用
- 地塞米松对K562细胞增殖抑制作用及诱导凋亡机制的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:研究地塞米松对K562细胞的增殖抑制作用及诱导细胞凋亡的机制。方法:用不同浓度的地塞米松对K562细胞进行处理,检测细胞增殖抑制率,观察细胞凋亡的形态学变化,测定细胞端粒酶活性,Fas表达及NO产生情况。结果:地塞米松能抑制K562细胞的增殖,降低端粒酶活性,使Fas表达上调,诱导细胞凋亡。但对NO的生成不具有显著性差异。结论:地塞米松可能通过抑制端粒酶的活性而诱导K562细胞的凋亡。同时,Fas也可能参与了凋亡的调节。
- 刘畅金丹婷钟梁刘北忠王东生郝坡王翀王春光
- 关键词：地塞米松凋亡端粒酶K562细胞
- 安罗替尼对晚期恶性肿瘤疗效和安全性的Meta分析被引量：1
- 2021年
- 目的探讨安罗替尼治疗晚期非小细胞肺癌、乳腺癌、胃癌、软组织肉瘤和结直肠癌等晚期恶性肿瘤的疗效和安全性。方法计算机检索Pubmed、The Cochrane Library、EMbase、VIP、CKNI、万方数据库,按照纳入和排除标准筛选文献和提取资料后,使用RevMan 5.3软件对数据行Meta分析。结果共纳入11项随机对照试验,共947例患者。Meta分析结果显示,与对照组相比,试验组患者客观缓解率(OR=4.21,95%CI:2.62~6.75,P<0.01)、疾病控制率(OR=6.06,95%CI:4.46~8.23,P<0.01)均明显提高;总生存期(HR=0.70,95%CI:0.57~0.87,P<0.01)、无进展生存期(HR=0.26,95%CI:0.21~0.33,P<0.01)均明显延长。亚组分析中,安罗替尼单药或化疗联合安罗替尼治疗均可提高患者客观缓解率、疾病控制率,且安罗替尼单药疗效更佳;对于非小细胞肺癌和其他肿瘤,安罗替尼治疗均可提高患者客观缓解率、疾病控制率,且安罗替尼治疗非小细胞肺癌效果更好。安全性方面:试验组高血压(RR=4.55,95%CI:3.28~6.30,P<0.01)、手足综合征(RR=5.09,95%CI:3.24~8.00,P<0.01)、咯血(RR=2.43,95%CI:1.50~3.94,P<0.01)发生率均高于对照组;其余不良反应如WBC减少、粒细胞减少、贫血、高甘油三酯血症、恶心、呕吐、腹泻,两组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论安罗替尼可提高晚期恶性肿瘤临床疗效,同时需注意高血压、手足综合征、咯血等不良反应。
- 郭雪石学军王春光
- 关键词：晚期恶性肿瘤META分析
