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肝细胞极性与肝脏脂代谢调节的关系: 目的:建立三明治模型培养小鼠原代肝细胞,检测肝细胞极性形成和维持过程中极性蛋白Par,Scribble和Crumb复合体的作用.运用高脂动物模型,探讨肝细胞中细胞极性和脂代谢调节机制之间的相互关系.方法:使用两步原位灌流...; 聂萌王林

胆汁酸及受体TGR5/FXR参与肝细胞癌和胆管细胞癌的发生与发展被引量：2: 2017年; 目的探讨胆汁酸与胆汁酸受体TGR5/FXR在肝细胞癌和胆管癌发生、发展中的作用和可能的机制。方法通过免疫组化检测胆汁酸受体FXR与TGR5在癌旁组织、肝细胞癌组织和胆管细胞癌组织中的表达水平;采用MTS实验检测不同胆汁酸(石胆酸、鹅脱氧胆酸、牛磺胆酸钠、熊去氧胆酸及胆酸)对人胆管癌细胞系HCCC-9810以及人肝癌细胞系Hep G2的增殖凋亡影响;采用流式细胞检测石胆酸和鹅脱氧胆酸对人胆管癌细胞系HCCC-9810和人肝癌细胞系Hep G2凋亡的影响。结果TGR5在肝细胞肝癌和胆管细胞癌组织中呈高表达,与之相反,FXR在肝细胞肝癌和胆管细胞癌中呈现低表达水平;胆汁酸能够促进癌细胞的凋亡,而不同种类的胆汁酸其抑制细胞增殖的效力不同。结论胆汁酸受体FXR和TGR5参与肝细胞癌和胆管细胞癌的发生、发展;胆汁酸能够抑制Hep G2和HCCC-9810增殖与促进Hep G2和HCCC-9810凋亡,为研究胆汁酸抗肿瘤作用机制奠定了基础。; 林跃军张楠聂萌王林; 关键词：胆汁酸肝细胞癌胆管细胞癌

抗人SUMO1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定: 2008年; 目的表达重组人SUMO1(small ubiquitin-related modifier 1)蛋白并制备单克隆抗体。方法构建含人SUMO1基因的重组表达质粒pET32a-HIS-SUMO1,在大肠杆菌中表达重组蛋白HIS-SUMO1;以纯化后的HIS-SUMO1蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术,通过ELISA和Western blot方法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,用免疫双向扩散法鉴定抗体Ig的类型及亚类;取一株筛选细胞按照常规方法制备腹水,利用Millipore抗体纯化试剂盒进行抗体纯化,Western blot方法检测抗体效价。结果表达纯化了重组人HIS-SUMO1蛋白;3株稳定分泌特异性抗人SUMO1的单克隆抗体杂交瘤细胞株被筛选出,其免疫球蛋白类型均为IgG1类;通过腹水制备和纯化获得效价较高的鼠抗人SUMO1单克隆抗体。结论通过表达纯化人SUMO1重组蛋白,制备出高效价鼠抗人SUMO1的单克隆抗体,该抗体可用于蛋白质SUMO化的研究。; 王林谭锋维陈实平陆丽芳龚燕华彭小忠; 关键词：SUMO 蛋白表达纯化单克隆抗体

内质网相关降解通路小分子抑制剂与传统抗癌药物联合运用对肿瘤细胞的抑制作用: 2016年; 目的探究内质网相关降解通路(endoplasmic reticulum-associated degradation,ERAD)小分子抑制剂EeyarestatinⅠ(EerⅠ)与传统抗癌药物联合运用对肿瘤细胞的抑制作用。方法不同剂量的EerⅠ处理结肠癌SW480和胰腺癌PANC-1细胞,MTS法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率;EerⅠ单独或与抗癌药物顺铂(cisplatin,CDDP)和硼替佐米(bortezomib,BTZ)联用处理SW480和PANC-1细胞,Western blot法检测细胞中Poly ADP-ribose polymerase(PARP)及其剪切体和糖调节蛋白(GRP78/Bi P)的蛋白表达。结果 EerⅠ抑制SW480和PANC-1细胞增殖,促进细胞凋亡(P<0.01),且呈剂量-效应关系;联合用药的实验结果显示EerⅠ提高了SW480和PANC-1细胞对CDDP和BTZ的敏感度(P<0.01);Western blot法检测结果表明,联合用药促进了PARP在SW480和PANC-1细胞中的剪切,同时BTZ处理可提高Bi P蛋白的表达,提示激活内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)反应。结论 ERAD通路抑制剂EerⅠ可明显增强传统抗癌药物CDDP和BTZ的抗癌活性,这为抗癌新药研发及肿瘤耐药性逆转剂的研究提供了新的线索。; 樊倩倩李闯王林; 关键词：化疗治疗

低浓度胆酸的降脂及护肝作用探索: 背景及目的脂肪肝是一种多病因导致的肝脏内脂肪过度沉积临床病理综合征。脂肪肝的发生日渐增加,成为危害国民健康的第二大肝病。目前尚无治疗脂肪肝的特效药物,一般主要用护肝及去脂药物等辅助治疗。胆酸(CA)由肝脏合成,随胆汁排入...; 王林周岚樊倩倩聂萌全弘扬张楠李闯; 关键词：胆酸降脂总胆固醇甘油三酯; 文献传递

小鼠胚胎成纤维细胞内质网应激反应中的长链非编码RNA表达谱及生物信息学研究被引量：1: 2015年; 目的探究内质网应激反应也称为未折叠蛋白效应(unfolded protein response,UPR)激活后小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)表达谱。方法分离13天的小鼠胚胎获得并培养MEFs,采用内质网应激反应诱导剂衣霉素(tunicamycin)处理细胞16h后发生UPR;以未处理的MEFs作为阴性对照,采用基因芯片技术检测lncRNA表达谱,实时荧光定量PCR(real-time PCR)验证lncRNA芯片结果并进行生物信息学分析。结果与未使用衣霉素处理的MEFs相比,衣霉素处理的MEFs有411个lncRNAs表达量出现显著上调,790个lncRNAs出现显著下调;实时荧光定量PCR验证部分lncRNAs表达结果与芯片一致;高级生物信息学分析分析了显著变化的lncRNAs并提示它们可能参与了细胞内许多生物学过程的调控。结论 lncRNA表达谱及生物信息学分析提示lncRNA在UPR激活后的细胞功能中可能发挥重要作用。; 全弘扬樊倩倩王林; 关键词：长链非编码RNA 内质网应激反应基因芯片生物信息学

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王林