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王洁

作品数:74 被引量:253H指数:11
供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技攻关计划国家科技重大专项更多>>
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作者

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  • 3篇2005
  • 2篇2004
  • 1篇2003
74 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
H-NS蛋白对副溶血弧菌hcp1的转录调控被引量:4
2016年
【目的】研究调控子H-NS对副溶血弧菌T6SS1结构蛋白基因hcp1的转录调控机制。【方法】利用Western blot检测Hcp1蛋白在野生株(WT)和hns基因敲除株(Δhns)中表达水平的差异。提取WT和Δhns的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS对hcp1的转录调控关系。进而采用引物延伸实验研究hcp1的转录起始位点,并根据产物的丰度判断H-NS对hcp1的调控关系。PCR扩增hcp1的整个启动子区DNA序列,并纯化His-H-NS蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)验证His-H-NS对hcp1启动子区是否具有直接的结合作用。【结果】Western blot和实时定量RT-PCR结果显示H-NS能抑制hcp1的表达;引物延伸结果显示hcp1只有一个转录起始位点T(–62)(翻译起始位点为+1),且其转录活性是H-NS和σ54依赖性的;EMSA实验表明H-NS对hcp1的启动子区具有直接的结合作用。【结论】H-NS能直接结合到hcp1启动子区而抑制其转录表达。
王洁董新波高丽晓周冬生殷喆张义全
关键词:副溶血弧菌H-NS转录调控
金黄色葡萄球菌法检测医用外科口罩的细菌过滤效率
目的 测试不同厂商生产的医用外科口罩细菌过滤效率。 方法 发生金黄色葡萄球菌气溶胶,并对通过口罩滤材前后的气溶胶进行采样及定量,从而检测出口罩滤材对细菌气溶胶的过滤效率。结果 2009年2~7月测试的17个厂商送检的22...
杨文慧李劲松温占波王洁于龙杨文惠胡凌飞刘克洋
关键词:金黄色葡萄球菌气溶胶
个人防护装备高效过滤罐微生物气溶胶防护效果的检测及评价被引量:1
2007年
为了测试个人防护装备中使用的高效过滤罐的微生物气溶胶过滤效率,本研究以粘质沙雷氏菌8039为指示微生物,在实验室中发生气溶胶,分别采集过滤前后的空气样本,根据培养长出的菌落数计算过滤效率。在对该生物防护装备对微生物气溶胶的防护效果做出评价的同时为相应国家标准的建立提供数据资料。
王洁温占波赵建军李娜鹿建春李劲松
关键词:粘质沙雷氏菌微生物气溶胶
生物安全三级实验室废弃物处置的环境风险评价检测
目的:通过对生物安全三级实验室的感染性'三废'无害化处置设备的生物学检测评价,确保生物安全三级实验室外环境生物安全. 方法:建立微生物评价高压灭菌器和高效粒子空气隔离器对微生物灭菌和净化处置性能的检测方法,并在...
李劲松张柯李娜王洁胡凌飞曹杰温占波殷喆
关键词:生物安全实验室废弃物处置环境风险评价
文献传递
应用于结核病治疗的分枝杆菌噬菌体D29的免疫原性研究
2012年
目的观察分枝杆菌噬菌体D29采用不同给药途径在豚鼠模型中的免疫原性,为噬菌体应用于结核病治疗奠定基础。方法Hartley豚鼠分别以吸入、滴鼻、皮下注射3种途径分组,在35d内给予分枝杆菌噬菌体D296次,设7H9培养基溶剂为对照组和0.85%氯化钠溶液为阴性对照组,通过噬斑减少中和实验(PRNT)检测每周豚鼠血清的中和抗体效价,通过ELISA测定第35天血清中IL-2、IL4、IFN-7水平。统计学处理采用方差分析和非参数检验。结果两对照组均未测出中和抗体;吸入组和滴鼻组仅在第7、14天检出-过性低效价中和抗体(〈1:100);皮下注射组持续产生中和抗体,第35天效价高达1:16365.6。给予分枝杆菌噬菌体D2935d后,各实验组及对照组豚鼠血清中IL-2(X^2-2.7605,P〉0.05)、IL-4(F-2.17,P〉0.05)、IFN-γ(F=0.75,P〉0.05)浓度均差异无统计学意义。结论吸人、滴鼻给药产生的抗噬菌体D29中和抗体效价明显低于皮下注射给药;噬菌体D29未引起细胞因子浓度的变化,提示不会破坏机体Thl/Th2免疫平衡。
杨文慧温占波李劲松胡凌飞于龙刘克洋王洁李娜董晓凯
关键词:分枝杆菌噬菌体结核生物因子
登革2型病毒NS5蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化被引量:1
2003年
目的 :构建登革 2型病毒 (DEN_2 )NS5表达体系 ,摸索适宜的诱导表达条件 ,克服大分子蛋白难以表达的瓶颈 ,获得DEN2_2NS5 (相对分子质量 10 4× 10 3)表达产物 ,为以后对其活性、抑制剂等方面的研究奠定基础。方法 :自DEN_2感染组织提取总RNA ,RT_PCR扩增NS5基因片段 (2 .7kb) ,插入质粒pQE30 ,转化XL1Blue大肠杆菌得表达菌株XL1Blue QENS5。同时优化诱导表达和目的蛋白的纯化条件。结果 :表达菌株XL1Blue QENS5增菌培养后更换新的培养基 ,在一定温度范围条件下诱导可以表达出最高占菌体总蛋白 2 2 .8%的NS5蛋白 ,在较低温度下诱导目的蛋白能以可溶性形式表达 ,经过纯化后的NS5蛋白纯度可达 90 %以上。结论 :在国内首次实现了DEN_2NS5蛋白的表达 ,获得的诱导表达条件可能对于其他大分子蛋白的表达有一定的借鉴意义。
王明连刘波王洁李劲松
关键词:登革病毒原核表达蛋白纯化大肠杆菌
过滤罐微生物气溶胶过滤效率及其评价方法的研究被引量:1
2009年
目的建立防护面具高效过滤罐微生物气溶胶测试评价方法,对过滤罐的实际防护效果进行测试评价。方法Serratia marcescens作为模式细菌繁殖体气溶胶、Bacillus subtilis var niger芽孢作为模式芽孢气溶胶、噬菌体f2作为模式病毒气溶胶,使用实验室建立的微生物气溶胶检测技术平台,人工发生模式微生物气溶胶,分别在过滤罐过滤前后使用空气微生物采样器进行定量采样,根据过滤前后模式微生物气溶胶的浓度分别计算细菌、芽孢、病毒气溶胶过滤效率。1—1、1—2、1-3、1-44个只含有高效过滤材料的过滤罐分别测试了Serratia marcescens、Bacillus subtilis var niger、噬菌体f2气溶胶的过滤效率。543、5442个装有活性炭的高效过滤罐测试了对Serratia marcescens气溶胶的过滤效率。结果1—1、1—2、1-33个高效过滤罐对Serratia marcesceus、Bacillus subtilis var niger芽孢、噬菌体f2的气溶胶的过滤效率为100.000%,1-4高效过滤罐对Bacillus subtilis var niger芽孢气溶胶的过滤效率为99.997%、Serratia marcescens和噬菌体f2气溶胶的过滤效率均为100.000%。加入活性炭后543、5442个过滤罐对Serratia marcescens气溶胶的过滤效率均为100.000%。结论建立的检测方法可以用于高效过滤罐微生物气溶胶防护效果的评价,高效过滤罐(包括装有活性炭者)微生物气溶胶防护效果均佳。
温占波赵建军李劲松王洁鹿建春李娜
关键词:防护装置空气微生物学
一株粘质沙雷氏菌烈性噬菌体污水分离及特性被引量:14
2008年
【目的】以粘质沙雷氏菌(8039)为宿主菌从医院污水中分离噬菌体并对其基本生物学特点进行研究。【方法】四步法污水分离噬菌体;单、双层平板噬菌斑实验筛选烈性噬菌体并观察噬菌斑形态;纯化后2%磷钨酸染色电镜观察;手工法提取噬菌体核酸酶切后琼脂糖凝胶电泳分析;利用双层平板噬菌斑实验测定最佳感染复数和完成一步生长实验。【结果】从医院污水中成功分离出粘质沙雷氏菌烈性噬菌体一株(SM701),该噬菌体有一个正多面体立体对称的头部,头径约64nm,无囊膜,有一长尾,无收缩尾鞘,尾长约143nm;基因组核酸能被双链DNA内切酶BamHⅠ及HindⅢ切开,大小约57kb;噬菌斑圆形透明,直径1mm左右(培养12h),边界清楚;当感染复数(multiplicity of infection,MOI)为10时,子代噬菌体滴度较高;按照一步生长实验结果绘制出一步生长曲线,可知感染宿主菌的潜伏期是约为30min,爆发期约100min,平均爆发量约为63。【结论】按照国际病毒分类委员会分类标准,该噬菌体属于长尾噬菌体科(siphoviridae)烈性噬菌体,按照Bradley和Ackermann形态分类法属于B1亚群;噬菌斑与周围红色细菌生长区,颜色差异明显,非常便于观察和计数;噬菌体头部大小和形态与呼吸道病毒中的呼肠病毒和腺病毒最为接近;国内尚未见粘质沙雷氏菌噬菌体相关报道。
于龙温占波杨文慧李娜王洁鹿建春李劲松
关键词:粘质沙雷氏菌噬菌体生物学形态学
生物气溶胶侦察技术和装备的研制与定型
外军生物战剂侦察系统的研制和装备都较早,美军在这方面一直处于国际领先地位,不仅技术领先,而且部队装备也是较为系统的。美军目前拥有三种生物战剂侦察系统:核化生狐式侦察车、生物综合检测系统和联合生物点检测系统。M93A1狐式...
李劲松鹿建春李娜赵建军温占波王洁
关键词:生物气溶胶侦察系统生物战剂侦察车
文献传递
用粘质沙雷菌试验评价Ⅱ级生物安全柜的研究被引量:9
2007年
目的改进完善Ⅱ级生物安全柜生物测试的方法,观察两种指示微生物的空气生物学特性。方法采用改良美国NF-49标准方法,以粘质沙雷菌为指标菌检测生物安全柜防护性能。结果枯草杆菌黑色变种芽孢经过porton采样器冲击30 m in,其相对存活率只有37%;而粘质沙雷菌经30 m in冲击,其相对存活率为88%。枯草杆菌黑色变种芽孢经30 m in雾化,其相对存活率为53%;粘质沙雷菌雾化30 m in,其相对存活率为89%。实验环境中粘质沙雷菌本底检测结果菌落数均为0,粘质沙雷菌在自然界空气中不是优势菌株,不会对检测产生干扰。两台生物安全柜在不同风速下防护性能检测结果全部合格且与该安全柜出厂检测结果一致。结论粘质沙雷菌具有良好的雾化和冲击耐受性,受检的安全柜的人员、样品和环境防护作用合格,本研究建立的检测验证方法灵敏性和重复性与美国标准(NF-49)一致。
毕建军温占波赵建军王洁李劲松
关键词:生物安全柜粘质沙雷菌枯草杆菌黑色变种芽孢耐受性保护性能
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