王顺友 作品数:10 被引量:13 H指数:2 供职机构: 上海第二医科大学基础医学院上海市免疫学研究所 更多>> 发文基金: 上海市科学技术委员会资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
转染CD80(B7-1)基因前后人肿瘤细胞系表面标志表达 1997年 动物实验证实协同刺激分子CD80(B7-1)是促进抗肿瘤免疫应答的重要分子.本文应用RT-PCR,FACS技术检测了人肿瘤细胞系及EBV转化的B细胞CD80的表达,结果表明除Raji细胞、EBV转化的B细胞CD80阳性外,3AO、MCF-7、MDA-453、MKN-45、Hela细胞均为阴性.用我室建立的CD80逆转录病毒载体转染包装细胞PA317,筛选高滴度病毒上情感染人肿瘤细胞,得到CD80阳性表达的肿瘤细胞克隆.利用转染前后的人乳腺癌细胞系MDA-453作ICAM-I、HLA class Ⅰ、classⅡ分子表达的分析,结果表明转染有CD80基因的MDA-453细胞ICAM-Ⅰ、HLA classⅠ分子表达上调,class Ⅱ分子的表达未见改变. 严俊 马宝骊 王顺友 孙雨 张继英 张汉明关键词:CD80 逆转录PCR 肿瘤细胞系 基因转染 人B细胞激活抗原B7(hB7)基因cDNA的克隆 被引量:2 1995年 我们采用NestedPCR的方法,成功地从Raji细胞中扩增出B7cDNA,通过单个碱基改变,在两端分别引入单酶切位点(5 ̄'端为HindⅢ,3 ̄'端为EcoRⅠ),经酶切后连入pBluescript克隆载体,测序证明所得序列与Freeman等报道的完全一致。我们所选用的两个酶切位点HindⅢ和EcoRⅠ恰好位于pBluescript多克隆位点的中央,克隆入pBluescript后,两端有多个单酶切位点,为进一步将基因转移至表达载体等提供了极大的方便。 王顺友 黄秋花 陈竺 马宝骊关键词:B7 PCR CDNA 克隆 RAJI细胞 热休克蛋白的产生及功能 被引量:8 1991年 热休克蛋白是细胞在某些环境因素,特别是热的刺激下合成的一组蛋白质。根据分子量的大小分为三大类。它广泛参与机体热耐受、炎症、自身免疫等生理、病理过程。 王顺友 朱忠勇关键词:热休克 蛋白 亲和层析法纯化人绒毛膜促性腺激素 被引量:1 1991年 本文介绍了一种应用抗hCG β亚单位单克隆抗体亲和层析提纯hCG的方法。结果表明,该法具有简便、快速、经济、产品活性高等优点。hCG回收率为96%,免疫学活性17000IU/mg蛋白,生物学活性(小鼠子宫称重法)达到10 000U/mg蛋白以上。 王顺友 戚少然 唐玉钗 朱忠勇关键词:HCG 提纯 吞噬细胞呼吸爆发的分子机制 被引量:1 1989年 吞噬细胞呼吸爆发是机体防御病原微生物的有效手段,也是许多疾病组织细胞损伤的原因之一。吞噬细胞呼吸爆发的分子机制一直是引人注目的问题。近年来的研究表明,细胞内蛋白激酶C(PKC)、鸟苷酸结合蛋白(G 蛋白)、磷脂酶C(PLC)以及Ca^(++)等在信息传递中具有重要作用。1,4,5-三磷酸肌醇(IP_3)、甘油二脂(DG)被认为是除cAMP、Ca^(++)外新的第二信使。本文拟就吞噬细胞呼吸爆发中Ca^(++)、PKC、G蛋白及PLC 等的作用及相互关系作一综述。一、吞噬细胞呼吸爆发的表现免疫复合物、补体、趋化三肽(fMLP)、 王顺友 朱锡华关键词:吞噬细胞 分子机制 应用巢式PCR扩增人B7cDNA 1995年 应用巢式PCR扩增人B7cDNA王顺友,黄秋花,陈竺,马宝骊上海市免疫学研究所上海200025自1982年Yokochi等发现特异性表达于激活B细胞表面的B细胞激活抗原B7后[1],随着对其性质及功能研究的深入,使B7分子成为当今肿瘤治疗方面最引人注... 王顺友 黄秋花 陈竺 马宝骊关键词:巢式PCR 肿瘤 免疫疗法 重组人pLXSN-CD80逆转录病毒载体的构建及在CHO和PA317细胞中的表达 被引量:1 1999年 CD80是表达于抗原提呈细胞表面的分化抗原,它提供T细胞活化的协同刺激信号,并在抗肿瘤免疫应答中起着重要作用。我们在克隆了CD80全长。cDNA的基础上,将其与逆转录病毒pLXSN表达载体连接,构建成表达质粒,并用磷酸钙沉淀法将其转染PA317和CHO细胞,经G_(418)筛选获得抗G_(418)的PA317和CHO细胞克隆。以RIA,FACs和Westernblot检测CD80分子在PA317和CHO细胞上的表达、分布和分子量,结果显示,pLXSN-CD80转染的CHO细胞可表达较高丰度的CD80分子,其表观分子量为40kD。pLXSN-CD80转染的PA317和CHO细胞经5个月连续传代培养,无论存在G_(418)的选择压力与否,仍然持续表达CD80分子,表明我们构建的pLXSN-CD80表达载体具有应用于试验性治疗的潜能。 王顺友 孙雨 马宝骊关键词:CD80 共刺激 逆转录病毒载体 抗人胎胰相关抗原单克隆抗体C1免疫组化研究 1994年 用人胎胰提取物免疫BALB/c小鼠,获得能稳定分泌IgG2a单抗的杂交瘤细胞C1。免疫组化染色表明,C1与胎胰、胰腺癌、胃癌和大肠癌等组织有较强结合反应,与正常胰腺、十二指肠、胃、大肠等处的消化腺上皮细胞有轻度结合反应。初步表明,通过定量分析单抗,C1对消化道癌肿的诊断有一定参考价值。 郑智勇 王顺友 朱忠勇关键词:单克隆抗体 胰腺肿瘤 B7/BB1分子的生物学特性及其在肿瘤基因治疗中的作用 1994年 B细胞激活抗原B7/BB1的基因导入黑色素瘤细胞株,传染的细胞失去了在体内形成肿瘤的能力。本文对B7/BB1分子的发现及生物学特性和在肿瘤免疫、基因治疗中的概况作一综述。 王顺友 马宝骊关键词:B细胞 抗原 肿瘤 基因治疗 地塞米松对家兔急性实验性血清病的调节作用 1989年 本实验观察了不同时间及剂量的地塞米松(DX)对家兔急性实验性血清病(AESS)的调节作用。结果发现DX并不抑制AESS家兔特异性抗体的产生。相反,早期给药组动物抗体水平还有增高趋势,循环免疫复合物(CIC)水平显著高于晚期给药及阳性对照组。晚期给药各组特异性抗体,CIC水平及肾组织超氧化物歧化酶活力与阳性对照组无显著差别,但肾组织非特异性酯酶染色及病理学改变明显减轻,提示DX可能是通过减少单核细胞在肾小球内的聚集而减轻AESS的病理改变。氧自由基在AESS发病中的作用尚待进一步探讨。 王顺友 朱锡华关键词:血清病 地塞米松 肾炎 免疫复合物