王飞
- 作品数：244 被引量：273H指数：9
- 供职机构：南京林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：化学工程医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中的分泌型表达及酶学性质初探被引量：5
- 2014年
- 将南极假丝酵母脂肪酶B（CALB）基因克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA（含pAOX1启动子）和pGAPZαA（含pGAP启动子）中,转入毕赤酵母表达宿主KM71H,经三丁酸甘油酯平板活性筛选获得高效表达的酵母工程菌株.分泌型表达CLAB酵母工程菌的酶活较高,经摇瓶发酵96 h后,CLAB活力达到11.1 U/mL.经发酵罐高密度发酵84h后,CLAB活力达到179.2 U/mL,蛋白质量浓度为1.36 mg/mL.体积分数12％SDS-PAGE凝胶电泳显示重组CALB相对分子量为36 kDa.该酶最适温度为40℃,最适pH值为8.0.在pH7.5 -9.5较稳定,经55℃保温1h,残余酶活还有48.5％.5 mmol/L Mg^2＋、Ni^＋、Co^2＋和体积分数0.10％ SDS对CALB酶活影响很小,而Zn2强烈抑制酶催化反应,体积分数0.05％ Triton X-100对CALB稍有激活作用。
- 李迅邓若冰王飞
- 关键词：毕赤酵母分泌表达酶学性质
- 巨大芽孢杆菌细胞色素P450酶的表达纯化及定向进化研究
- 2014年
- 为了获得高效的重组来自巨大芽孢杆菌ALA2的细胞色素P450酶(CYPs),将CYPs基因(cyp)克隆到大肠杆菌表达载体p ET20b(含T7启动子)和p Trc99A(含trc启动子)中,转入大肠杆菌表达,发现trc启动子更适合CYPs的表达。优化了Ni-NTA纯化CYPs的条件,在p H值8.1时,用60 mmol/L的咪唑缓冲液洗脱得到电泳纯的重组CYPs,酶活达到2 095 U/mg,纯化回收率为31%,回收倍数为2.32。通过理性设计确定突变位点为269位苏氨酸(T)和394位苯丙氨酸(F),通过筛选获得了突变酶T269S和T269R,2种突变酶以软脂酸为底物,酶活提高32.0%和29.0%,以油酸为底物酶活提高11.6%和9.1%。
- 李迅王婷王亮亮王飞
- 关键词：巨大芽孢杆菌细胞色素P450酶定向进化软脂酸
- 一种多突变位点的檀香烯合酶突变体及其制备方法
- 本发明涉及檀香烯合酶突变酶及其在合成檀香烯中的应用。具体涉及的突变酶SanSyn(S533A)、SanSyn(S533Q)、SanSyn(Q527A&S533A)，它们分别是将第533位的丝氨酸突变为丙氨酸、谷氨...
- 李迅张佳王询王飞
- 银改性六方介孔硅的合成及其抗菌性能研究被引量：8
- 2009年
- 采用溶胶凝胶法合成了银改性六方介孔硅(Ag-HMS)抗菌材料,以X-射线衍射(XRD)、红外(FT-IR)、固体紫外漫反射(UV-Vis)、环境扫描(ESEM)、电子能谱(EDS)、热重(TG-DTA)及N2的吸附脱附技术对材料结构和特性进行了分析,通过浊度值测定法考察了材料的抗菌性能。结果表明:Ag-HMS具有较好的热稳定性,银在材料中以骨架和非骨架态两种形式存在并且分散均匀。银的引入会导致六方介孔硅(HMS)载体材料的结晶度、介孔有序度、比表面积及平均孔径等的变化,模板剂及脱模温度对Si-O的红外吸收峰峰位及强度也有显著影响。抗菌实验表明:银改性六方介孔材料具有优良的抗菌性能,对金黄色葡萄球菌、芽孢杆菌、大肠杆菌及枯草杆菌的抗菌性能依次增强。抗菌剂质量浓度为0.20 mg/L时对枯草杆菌的生长可起到抑制作用;当其质量浓度为1.00 mg/L,12 h后即可实现对枯草杆菌的彻底杀灭。
- 陈君华王飞丁志杰陈忠平张平伏再辉
- 关键词：改性抗菌性能
- 一种预制桥墩与承台的L型插槽式连接方法
- 本发明涉及一种预制桥墩与承台的L型插槽式连接方法，包括承台(1)、预制桥墩(4)。在所述承台(1)顶部设置四个L型凸槽(2)，同时在L型凸槽(2)上设有纵向凸槽预留孔洞(3)，横向凸槽预留孔洞(9)；在预制墩身时，所述预...
- 端茂军王飞宋粲魏洋李壮壮
- 一种300MPa级高强塑非热处理自强化压铸铝合金及制造方法
- 本发明公开一种300MPa级高强塑非热处理自强化压铸铝合金及制造方法，包括以下组成的质量百分比：7.5％～8.5％Si，1.0％～1.3％Cu，0.1％～0.3％Fe，0.7％～1.0％Mn，0.35％～0.5％Mg，0...
- 郭纯丁胜长辛锐王飞胡瑞章陈丰魏宝丽张华
- 文献传递
- 课程思政融入化工原理实验教学探索与实践被引量：2
- 2021年
- 课程思政作为高等教育的重要任务之一,能够发挥铸魂育人的主渠道作用。本文从“三全育人”的要求出发,分析课程思政在“化工原理实验”课程中实施的必要性。同时,从不同角度挖掘该课程的思政元素,举例阐述了课程思政教学改革的探索与实践。有效构建课程思政体系不仅能够全方位推进教育教学改革,同时也有利于人才培养质量的全面提升。
- 丁美丽陈慕华顾晓利冯艺张雄飞郑天然徐勇王飞姚建峰
- 关键词：化工原理实验教学改革
- 一种预制桥墩与承台的插槽式连接结构
- 本实用新型涉及一种预制桥墩与承台的插槽式连接结构，包括承台(2)、预制桥墩(1)。在所述承台(2)顶部中心位置用钢板(3)围成一个凹槽，且在钢板(3)上设有纵向预留孔洞(6)，横向预留孔洞(5)；所述预制桥墩(1)上设有...
- 王飞李壮壮宋粲端茂军朱俊天
- 文献传递
- 一种基于纤维小体的毕赤酵母表面共展示系统及其构建方法和应用
- 本发明提供了一种基于纤维小体的毕赤酵母表面共展示系统及其构建方法和应用，属于分子生物学、食品以及基因工程技术领域。本发明所述系统包括锚定蛋白和多蛋白展示底架蛋白，所述锚定蛋白为酿酒酵母细胞壁蛋白Sed1p；所述多蛋白展示...
- 李迅王亮亮王月皎李文谦王飞张瑜
- 文献传递
- 南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中的诱导表达
- 南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)是一种重要的脂肪酶,具有许多优良的特性,它对非水溶性和水溶性物质都有很强的催化活性,在水解和有机合成反应中具有高度的立体选择性。毕赤酵母表达系统因能高效表达外源蛋白以及蛋白易于纯化等优点而...
- 邓若冰李迅王飞
- 关键词：基因克隆毕赤酵母
