甘进锋
- 作品数:4 被引量:12H指数:2
- 供职机构:西南大学生物技术学院蚕学与系统生物学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 转植酸酶基因家蚕的制作及表达检测被引量:8
- 2009年
- 家蚕Bombyxmori丝腺具有高效合成蛋白质的特性,开发在丝腺特异表达外源蛋白质的生物反应器具有重要的意义。本研究利用piggyBac来源的两种载体pPIGA3GFP和pBac{3×P3-EGFPaf},建立了稳定的家蚕转基因技术体系;然后,利用一株黑曲霉来源的植酸酶基因,构建了在家蚕后部丝腺特异表达的融合表达载体pBac[3×P3-EGFP+FibLphyADsRed],注射蚕卵后,在53个G1蛾区中检测到3个有荧光蚕的蛾区。经Southern blot和反向PCR验证,转基因表达盒整合到家蚕染色体上。RT-PCR结果显示,植酸酶基因特异性地在后部丝腺表达,其表达模式与家蚕轻链丝素基因一致。结果表明我们成功获得了在后部丝腺特异表达植酸酶融合蛋白的转基因蚕,这为进一步开发家蚕生物反应器,利用转基因蚕生产各种重组蛋白具有积极的促进作用。
- 李春峰黄科甘进锋蒙炳超李智夏庆友周泽扬
- 关键词:家蚕转基因蚕PIGGYBAC转基因绿色荧光蛋白植酸酶
- 利用转基因RNA干涉提高家蚕对BmNPV的抗性初探被引量:4
- 2009年
- 基于探讨利用转基因RNA干涉技术使家蚕获得对核型多角体病毒抗性的目的,将家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的DNA聚合酶基因、蛋白激酶(PK1)基因以及bro-d和orf1629基因的部分编码片段,分别以其反向重复的形式与家蚕Actin3启动子连接,构建了基于piggyBac转座子载体的转基因表达载体,通过显微注射于家蚕卵,获得了36-107个G1蛾区,得到了20-23头转基因阳性家蚕。经Southern杂交及RT-PCR分析表明,BmNPV的4个反向重复片段都已经导入家蚕基因组中,并且可以进行转录。攻毒实验结果表明,BmNPV的DNA聚合酶基因和PK1基因反向重复片段对病毒的增殖有抑制作用,从而使家蚕对BmNPV具有一定抗性;而BmNPV的bro-d和orf1629基因反向重复片段对病毒的增殖没有抑制作用。针对特定病毒的转基因RNAi技术有望使家蚕获得对该病毒的抗性。
- 黄科李春峰甘进锋蒙炳超李智周泽扬
- 关键词:家蚕PIGGYBAC转座子RNA干涉转基因家蚕核型多角体病毒
- 几丁质酶抑制活性蛋白酶基因和类胡萝卜素结合蛋白基因转家蚕表达研究
- 随着化学农药的大量使用,对环境造成了严重的危害,迫切需要采用生物防治手段来替代。自然界中的农业害虫半数以上属鳞翅目昆虫,而家蚕作为鳞翅目昆虫的模式生物,以其为实验材料进行生物防治的研究无疑有着重要的意义。基于此,本实验室...
- 甘进锋
- 关键词:几丁质酶类胡萝卜素蛋白基因
- 文献传递
- 家蚕表皮基因BmGCP2的克隆及表达谱分析被引量:1
- 2009年
- 从家蚕(Bombyxmori)表皮中克隆了一个高丰度表达的基因,根据其编码的氨基酸序列特征,发现是一个富含甘氨酸的表皮蛋白,将该基因命名为BmGCP2(GenBank登录号:EU980611)。进一步对BmGCP2基因进行了组织表达谱和发育时期表达谱分析,发现该基因在家蚕表皮中特异高表达,并且这种高表达一直从家蚕的胚胎发育后期持续到蛾期,表明BmGCP2基因编码的表皮蛋白是家蚕外骨骼的重要组成成分之一。
- 李智甘进锋蒙炳超黄科李春峰何宁佳周泽扬
- 关键词:家蚕克隆