穆大帅
- 作品数：11 被引量：18H指数：2
- 供职机构：南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 一株解淀粉芽孢杆菌及其用途
- 本发明公开了一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)B43-1，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2012年6月8日，保藏号：CGMCC No.6212。本发...
- 赵明文刘青海师亮任昂韩琴邱乙伟穆大帅李梦娇吴凤礼李芮
- 文献传递
- 灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因的克隆及其表达特性被引量：9
- 2013年
- 灵芝三萜类化合物是灵芝的重要药用成分,具有多种重要的生理功能,灵芝中三萜含量的高低已成为衡量灵芝质量高低的重要指标。灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因(A hy-droxymethylglutary-l CoA synthase,GlHMGS)作为甲羟戊酸途径中的第一个催化酶,催化乙酰CoA与乙酰乙酰CoA生成羟甲基戊二酰CoA,对于灵芝三萜的合成起着十分重要的作用。分别以灵芝总基因组DNA和反转录的原基cDNA为模板,扩增得到GlHMGS基因的全长DNA和cD-NA序列,该基因DNA全长1 870 bp,其中ORF为1 413 bp,编码471个氨基酸,推测的分子量为51.14kD。通过比对获得的DNA和cDNA序列,发现GlHMGS由5个外显子和4个内含子构成。与NCBI数据库中HMGS的蛋白序列比对发现,GlHMGS与解脂耶罗威亚酵母的HMGS表现出最高的同源性(51%)。进化树分析也表明GlHMGS与真菌亲缘关系最近,这与灵芝的物种分类相吻合。通过酿酒酵母HMGS缺陷的菌株证实所得GlHMGS能够使HMGS缺陷的表型得到互补,证实GlHMGS的功能。利用SEFA-PCR技术扩增GlHMGS基因上游启动子序列,该序列长约1 561 bp,用Softberry等软件对启动子序列进行分析,发现GlHMGS基因启动子中包含有明显的TATA-box和CAAT-box,并发现了多个与甾醇、激素和环境压力等调节相关的顺式作用元件。进一步研究发现,茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸能够提高GlHMGS基因的转录水平。在研究不同发育阶段和不同碳源对GlHMGS基因的影响时,发现GlHMGS基因的表达水平分别在第16天和以麦芽糖为碳源时达到最大。通过过量表达GlHMGS基因能够显著提高灵芝三萜含量。
- 任昂欧阳翔师亮姜爱良穆大帅李梦娇韩琴赵明文
- 关键词：灵芝三萜表达谱
- 一株解淀粉芽孢杆菌及其用途
- 本发明公开了一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)B43-1，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2012年6月8日，保藏号：CGMCC No.6212。本发...
- 赵明文刘青海师亮任昂韩琴邱乙伟穆大帅李梦娇吴凤礼李芮
- 灵芝中基于内源ura3基因的多基因沉默系统的建立及其应用被引量：1
- 2013年
- 灵芝是一种重要的药用真菌,然而由于近几年缺乏有效的反向遗传体系研究,灵芝的分子遗传相关研究进展相对缓慢。该研究建立了一种更加简便快捷的灵芝电穿孔转基因方法,利用灵芝内源乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶基因(ura3)作为反向筛选标记,构建4种沉默载体(颈环结构沉默载体,正向沉默载体,反向沉默载体以及正反双向启动子沉默载体),并基于此转基因方法实现了对灵芝内源基因的沉默。通过系统比对以上4种沉默方法,发现4种沉默方法都不同程度地下调了ura3基因的表达,其中双向启动子沉默不仅载体构建方便并且能够获得最高的沉默效率(达到81.9%)。利用这种双向启动子沉默载体以及ura3的反向筛选特性,建立了灵芝的共沉默体系,发现共沉默下基因转录的下调有一定的相关性,提高了基因沉默的筛选效率。该反向遗传体系的建立有助于深入研究灵芝中单基因或多基因的功能,推动灵芝等大型担子菌的分子遗传研究进展。
- 穆大帅师亮任昂李梦娇吴凤礼姜爱良赵明文
- 关键词：灵芝基因沉默电击转化
- 灵芝中基于内源ura3基因的多基因沉默系统的建立及其应用
- 灵芝是一种重要的药用真菌，然而由于近几年缺乏有效的反向遗传体系研究，灵芝的分子遗传相关研究进展相对缓慢.该研究建立了一种更加简便快捷的灵芝电穿孔转基因方法，利用灵芝内源乳清酸核苷-5'-单磷酸脱羧酶基因(ura3...
- 穆大帅师亮任昂李梦娇吴凤礼姜爱良赵明文
- 关键词：灵芝基因沉默电击转化
- 茉莉酸甲酯对灵芝三萜生物合成的影响及其灵芝应答基因的差异表达被引量：7
- 2013年
- 灵芝三萜类化合物是灵芝的主要药用成分之一,灵芝三萜含量的多少是衡量灵芝质量高低的重要指标。经研究发现茉莉酸甲酯能显著提高灵芝三萜含量并上调灵芝三萜生物合成途径中的羟甲基戊二酰辅酶A还原酶、法尼酯焦磷酸合成酶和羊毛甾醇合成酶等基因的表达。通过在灵芝中建立的cDNA-AFLP体系,采用64对引物组合对灵芝的转录组进行分析。64对引物组合共产生3 910个TDFs。茉莉酸甲酯不同诱导条件下约有919个TDFs的表达谱发生了变化,占表达谱的23.5%,其中上调表达的有703个,下调表达的有216个。选择458个TDFs进行回收、TA克隆、测序后,获得390个高质量的TDFs片段。通过蛋白数据库同源性检索,并对蛋白功能进行GO分类,结果表明:390个高质量的TDFs中,BlastX比对后没有显著匹配的序列占77.1%。在有匹配蛋白的序列中,与碳代谢及能量相关的基因为最大一组,占35.2%,转录调控类及信号传导类基因分别占14.3%和11.0%。通过荧光定量PCR技术考察了茉莉酸甲酯对20个基因转录水平的影响,与cDNA-AFLP分析的结果相一致。并通过灵芝基因过量表达技术和基因沉默技术对筛选到的相关基因进行沉默和过量表达,研究筛选到的基因在灵芝三萜生物合成与调控中的作用,获得大量参与灵芝三萜生物合成与调控的候选基因,进一步阐明了茉莉酸甲酯诱导下灵芝基因表达的变化图。
- 任昂李梦娇师亮穆大帅姜爱良韩琴赵明文
- 关键词：灵芝茉莉酸甲酯均匀设计CDNA-AFLP分析基因沉默
- 茉莉酸甲酯对灵芝三萜生物合成的影响及其灵芝应答基因的差异表达
- 灵芝三萜类化合物是灵芝的主要药用成分之一,灵芝三萜含量的多少是衡量灵芝质量高低的重要指标.经研究发现茉莉酸甲酯能显著提高灵芝三萜含量并上调灵芝三萜生物合成途径中的羟甲基戊二酰辅酶A还原酶、法尼酯焦磷酸合成酶和羊毛甾醇合成...
- 任昂李梦娇师亮穆大帅姜爱良韩琴赵明文
- 关键词：灵芝茉莉酸甲酯均匀设计CDNA-AFLP分析基因沉默
- 茉莉酸甲酯对灵芝三萜合成诱导作用的研究
- 灵芝（Ganoderma lucidum）是一种药用真菌,在我国和东亚各国的传统医药学中应用历史悠久。现代药理研究证明灵芝具有抗肿瘤、调节免疫、降血糖、抗衰老等药理作用。目前已从灵芝中分离到160多种化合物,其中三萜类化...
- 任昂秦磊师亮穆大帅赵明文
- 关键词：灵芝三萜茉莉酸甲酯
- 文献传递
- 一种提高灵芝液体发酵菌丝体三萜产量的方法
- 本发明公开了一种利用中药提取物提高灵芝液体发酵菌丝体三萜产量的方法。本发明灵芝菌丝体的培养采用液体培养，在灵芝菌丝体液体发酵时，采用含中药提取物的培养基进行灵芝菌丝体液体发酵培养。将不同浓度的中药提取液(如板蓝根、连翘、...
- 赵明文任昂师亮穆大帅李梦娇林龙
- 文献传递
- 灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因的克隆及其表达特性
- 灵芝三萜类化合物是灵芝的重要药用成分,具有多种重要的生理功能,灵芝中三萜含量的高低已成为衡量灵芝质量高低的重要指标.灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因(Ahydroxymethylglutaryl-CoA synthase,...
- 任昂欧阳翔师亮姜爱良穆大帅李梦娇韩琴赵明文
- 关键词：灵芝三萜表达谱
