符纯锋
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目国家自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 前列腺素E_2对滑膜细胞基质金属蛋白酶-2活性的影响及其信号通路研究被引量：1
- 2012年
- 目的:观察前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)对滑膜细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)活性的影响及其信号通路的研究,从而探讨PGE2对前交叉韧带(Anterior cruciate ligament,ACL)的损伤或修复可能的影响。方法:用不同浓度的PGE2处理体外培养的滑膜细胞,处理后12、24、48 h和72 h明胶酶谱法检测培养液中MMP-2的活性;再用合适浓度的PGE2单独或分别与7种信号通路特异性抑制剂同时处理滑膜细胞,明胶酶谱法检测MMP-2的活性,并对其进行相对定量。结果:PGE2呈浓度和时间依赖性地增高滑膜细胞MMP-2的活性。p38、ERK、PKA通路抑制剂SB203850、PD98059、KT5720对PGE2诱导滑膜细胞MMP-2活性的增高无明显抑制作用;而JNK、AP-1和核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)通路抑制剂SP600125、姜黄素(Curcumin)和Bay11-7082/7085显著抑制了PGE2诱导MMP-2活性的增高,分别使72 h时MMP-2的活性降至43%、25%和16%、11%(P<0.01)。结论:PGE2诱导滑膜细胞MMP-2活性的增加可能是ACL损伤后难以自行修复的原因之一。JNK、AP-1和NF-κB通路可能参与调控PGE2对MMP-2活性的诱导;其中以NF-κB作用最显著,可能为ACL损伤的治疗提供一种新思路。
- 陈荣富黄伟梁熙谢静宋国立王春莉符纯锋
- 关键词：前列腺素E2滑膜细胞基质金属蛋白酶-2前交叉韧带
- β-catenin对骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨经典Wnt信号通路关键节点β-catenin对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的影响。方法用重组腺病毒介导BMP9在C3H10T1/2细胞中过表达,联用β-catenin重组腺病毒上调β-catenin的表达,并通过RNA干扰抑制β-catenin的表达。分析C3H10T1/2细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的变化;RT-PCR检测细胞成骨分化相关基因骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和骨钙蛋白(osteocalcin,OC)基因mRNA的转录水平;茜素红S染色检测细胞的钙盐沉积。结果 BMP9单独作用能诱导C3H10T1/2细胞向成骨方向分化,并增强细胞ALP活性;单独的β-catenin无成骨诱导作用,但可剂量依赖性地增强BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的ALP活性,并促进BMP9诱导的细胞OPN和OC基因mRNA的转录水平及钙盐沉积;抑制β-catenin表达可显著降低BMP9诱导的C3H1OT1/2细胞的ALP活性(P<0.05),下调OPN和OC基因mRNA的转录水平,并抑制钙盐沉积。结论经典Wnt信号通路可能通过β-catenin协同BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化,且BMP9诱导的成骨分化可能需要通过Wnt/β-catenin途径来实现。
- 林良波徐娇张晓符纯锋王志强周建武毕杨黄伟
- 关键词：WNTΒ-CATENIN间充质干细胞成骨分化
- 共培养下前交叉韧带成纤维细胞中LOXs与MMPs的基因表达情况被引量：3
- 2013年
- 前交叉韧带(ACL)损伤修复的研究进展表明,膝关节内覆在ACL上的滑膜组织对ACL损伤修复起到非常重要的作用。为探讨滑膜细胞对ACL成纤维细胞中影响组织修复的关键酶即赖氨酰氧化酶(LOXs)与基质金属蛋白酶(MMPs)表达及活性的影响,本文通过建立体外ACL成纤维细胞与滑膜细胞共培养体系,采用RT-PCR与明胶酶谱(zemography)技术定量分析比较单培养与共培养ACL成纤维细胞中LOXs与MMP-1、2、3基因的表达情况及MMP-2蛋白酶的活性。结果显示:(1)共培养促进ACL成纤维细胞中的LOXs与MMP-2的基因表达,但降低MMP-1、MMP-3的基因表达。(2)与单培养组相比,在不同时间点,共培养组都促进ACL成纤维细胞中MMP-2蛋白酶的表达及其活化程度。以上结果表明:ACL细胞和滑膜细胞之间存在密切的交流影响了LOXs与MMP-1、2、3的基因表达,为后续探索ACL损伤修复的机制及治疗方法提供了理论依据。
- 王春莉梅虎谢静蒋稼欢陈荣富尹琳符纯锋陈诚宋国立
- 关键词：前交叉韧带滑膜共培养赖氨酰氧化酶基质金属蛋白酶
- MAPK和NF-κB通路抑制剂对IL-1β诱导滑膜细胞MMP-2活性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)对人膝关节滑膜细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloprotein-ase-2,MMP-2)活性的影响及MAPK和NF-κB信号通路抑制剂对该过程的影响。方法用不同浓度的IL-1β处理体外培养的滑膜细胞72 h,明胶酶谱法检测细胞培养液中MMP-2的活性;选取10 ng/ml的IL-1β单独或分别与4种信号通路抑制剂(NF-κB抑制剂Bay11-7082,MAPK抑制剂SB203580、PD98059和SP600125)处理滑膜细胞,处理后12、24、48、72 h检测MMP-2的活性。结果 IL-1β随浓度和处理时间的增加明显上调滑膜细胞MMP-2的活性(P<0.05);与IL-1β处理组比较,Bay11-7082明显抑制了IL-1β诱导MMP-2活性的上调,并使72 h时MMP-2的活性降至13%(P<0.01);其他抑制剂对IL-1β诱导MMP-2活性上调的影响无统计学差异(P>0.05)。结论 IL-1β以时间和剂量依赖方式,通过NF-κB信号通路诱导滑膜细胞MMP-2活性。
- 陈荣富黄伟谢静梁熙KL Paul Sung王春莉符纯锋
- 关键词：白介素-1Β滑膜细胞基质金属蛋白酶-2
- 钛颗粒和炎症因子对人滑膜细胞MMP-2活性的影响及无菌性松动防治的初步探讨
- 全关节置换术目前仍然是终末期关节疾病较好的治疗方法，并且成功率高达90%以上，但是，无菌性松动是影响远期疗效的主要并发症,目前假体无菌性松动的具体机制尚未完全明朗，不过专家一致认为磨损颗粒引起的骨溶解为其主要成因。失败假...
- 符纯锋
- 关键词：钛颗粒滑膜细胞炎症因子基质金属蛋白酶无菌性松动
- 文献传递
- 前列腺素E_2干预后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞的迁移被引量：2
- 2012年
- 背景:细胞迁移是组织损伤后修复过程中的重要环节之一,但是膝关节交叉韧带损伤后局部产生的细胞因子前列腺素E2对后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞迁移的影响尚未见报道。目的:在后交叉韧带成纤维细胞与滑膜细胞单培养和共培养的条件下,研究前列腺素E2对此2种细胞迁移的影响。方法:体外培养人后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞,分别进行2种细胞的单培养和Transwell共培养,并用质量浓度10μg/L的前列腺素E2干预。比较单培养和共培养下细胞生长状态;细胞划痕试验检测24h时细胞的迁移率。结果与结论:共培养使后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞的迁移率较单培养增高128%和48%。前列腺素E2分别使单培养下后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞的迁移率降低了28%和14%;使共培养下细胞的迁移率较相应的共培养组未处理细胞下降37%和24%。证实,在前列腺素E2的刺激下,后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞迁移率均明显降低,尤其对共培养下后交叉韧带成纤维细胞迁移率的抑制更显著。
- 陈荣富王春莉谢静黄伟梁熙宋国立符纯锋陈诚
- 关键词：细胞迁移后交叉韧带共培养滑膜细胞前列腺素E2
- 共培养下后交叉韧带成纤维细胞中MMPs的基因表达被引量：2
- 2012年
- 目的研究后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)成纤维细胞与滑膜细胞共培养下,2种细胞之间的交流对PCL成纤维细胞中基质金属蛋白酶MMP-1、2、3表达及活性的影响。方法分为共培养组和单培养组:①用显微镜观察共培养24 h后细胞的活性和迁移率。②分别培养6 h后,提取总RNA,逆转录PCR;实时荧光定量PCR对人后交叉韧带成纤维细胞MMP-1、2、3基因的表达进行半定量和定量分析。③共培养处理1、2、3 d后收集培养上清液,用明胶酶谱法检测MMP-2的活性。结果共培养使PCL细胞和滑膜细胞较单层细胞培养迁移率分别增高了(43.1±0.1)%和(76.2±0.2)%(P<0.01)。与单培养相比,共培养组明显增加了MMP-2的基因表达,但降低了MMP-1、3的基因表达。酶谱结果表明共培养增加了MMP-2活性(P<0.05)。结论共培养能够促进细胞的迁移以及调节细胞中MMP-1、2、3的表达情况。
- 王春莉梅虎谢静蒋稼欢尹琳陈诚符纯锋KL Paul Sung
- 关键词：后交叉韧带滑膜共培养基质金属蛋白酶
- 钛颗粒和炎症因子对人滑膜细胞MMP-2活性的影响及无菌性松动防治的初步检讨
- 全关节置换术目前仍然是终末期关节疾病较好的治疗方法，并且成功率高达90％以上，但是，无菌性松动是影响远期疗效的主要并发症，目前假体无菌性松动的具体机制尚未完全明朗，不过专家一致认为磨损颗粒引起的骨溶解为其主要成因。失败假...
- 符纯锋
- 关键词：MMP-2活性炎症因子无菌性松动
- 文献传递
- 钛颗粒和炎症因子对人滑膜细胞MMP-2表达的影响
- 2013年
- 目的研究钛颗粒和炎症因子(TNF-α、IL-1β)对人滑膜细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达及活性的影响,探讨滑膜在钛磨损颗粒诱导的金对金人工关节假体周围骨溶解中的可能机制。方法用钛颗粒和TNF-α、IL-1β处理体外培养的人膝关节滑膜细胞,处理后12、24、48、72 h收集培养上清液,用明胶酶谱法检测MMP-2的活性。结果直径最小的钛颗粒(≤5μm)能刺激人滑膜细胞MMP-2蛋白表达4倍于对照组;与对照组相比,钛颗粒、TNF-α、IL-1β及相互联合作用均明显增加了MMP-2的表达(P<0.01),三者联合作用更明显(P<0.01)。钛颗粒和TNF-α、IL-1β能够刺激人膝关节滑膜细胞增加MMP-2蛋白活性,并具有协同效应。结论金对金人工关节置换术后,磨损钛颗粒可能和炎性因子协同刺激滑膜细胞,增加骨细胞外基质的降解,导致假体的骨性支持结构力学性能下降,促使假体无菌性松动的发生。
- 符纯锋黄伟梁熙胡宁宋国立谢静陈荣富王春莉林良波王志强陈诚
- 关键词：钛颗粒滑膜炎症因子无菌性松动
- 钛颗粒和TNF-α对人膝关节滑膜细胞MMP-1、2、3表达的影响
- 2013年
- 研究钛颗粒和肿瘤坏死因子(TNF-α)对人滑膜细胞基质金属蛋白酶(MMP-1、2、3)表达及活性的影响,从而探讨滑膜在钛磨损颗粒诱导的金对金人工关节假体周围骨溶解中的可能机制。用钛颗粒和TNF-α处理体外培养的人膝关节滑膜细胞,在处理后2h提取总RNA;逆转录PCR、荧光实时定量PCR对人滑膜细胞MMP-1、2、3基因的表达进行半定量和定量分析。处理后12、24和48h收集培养上清液,用明胶酶谱法检测MMP-2的活性。结果显示,与对照组相比,钛颗粒、TNF-α均明显增加了MMP-1、2、3基因的表达(P<0.05),两者联合作用更明显(P<0.01)。MMP-2蛋白水平和基因表达趋势基本一致,钛颗粒和TNF-α处理分别增加MMP-2活性1.3倍和1.5倍(P<0.05),联合处理作用更为明显,增加1.7倍(P<0.01)。钛颗粒和TNF-α能够刺激人膝关节滑膜细胞MMP-1、2、3基因表达的增加以及MMP-2蛋白活性。本研究表明,金对金人工关节置换术后,磨损钛颗粒可能刺激滑膜细胞,增加骨细胞外基质的降解,导致假体的骨性支持结构力学性能下降,促使假体无菌性松动的发生。
- 符纯锋谢静陈荣富王春莉许春明陈诚王志强林良波黄伟梁熙宋国立
- 关键词：钛颗粒无菌性松动滑膜肿瘤坏死因子基质金属蛋白酶
