罗海峰
- 作品数：11 被引量：37H指数：4
- 供职机构：上海第二医科大学附属仁济医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Smad2特异性siRNA对大鼠抗肝纤维化的作用被引量：3
- 2005年
- 目的探讨大鼠体内Smad2特异性siRNA的抗肝纤维化作用。方法肝纤维化大鼠模型,尾静脉注射pEGFP-Cl-CR4质粒转染大鼠肝脏。8周后应用RT-PCR和Westernblot技术检测肝脏Smad2mRNA和蛋白的表达情况,同时检测肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量。结果pEGFP-Cl-CR4克隆转染肝脏组织中,Smad2基因和蛋白表达受到明显的抑制;Hyp含量与各对照组比较显著下降(P<0.05)。结论在体内实验中,载体表达的特异性siRNA可以有效地抑制肝脏组织中Smad2的表达,阻断TGF-β对肝星状细胞的激活,使胶原分泌下调。
- 罗海峰吴志勇陈炜邱江锋张志奇孟方斌
- 关键词：SMAD2特异性抗肝纤维化肝脏组织转染EGFP
- 腺苷A_2型受体在肝窦内皮细胞一氧化氮生成中的作用被引量：3
- 2004年
- 目的研究腺苷A2型受体在肝窦内皮细胞(HSECs)一氧化氮生成中的作用。方法分别将腺苷、腺苷A1型受体激动剂R鄄PIA和腺苷A2型受体激动剂CGS21680与原代培养的HSEC共培养20min、40min、60min后,用RT鄄PCR测定HSECeNOSmRNA的表达,并测定HSEC内一氧化氮(NO)含量的变化。结果与对照组相比,腺苷和CGS21680都能促使HSEC内eNOSmRNA表达增加,提高HSEC内NO含量(P<0.05),而R鄄PIA却无此作用(P>0.05)。结论HSEC通过腺苷A2型受体的兴奋作用产生大量NO。
- 于昕陈炜罗蒙邱江锋罗海峰王祥瑞Joan Rosello-Catafau吴志勇
- 关键词：肝窦内皮细胞腺苷一氧化氮
- eNOS基因治疗对肝硬化大鼠肝内血流阻力的影响被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨内皮性一氧化氮合酶 (endothelialnitricoxidesynthase ,eNOS)对肝硬化大鼠肝内血流阻力 (intrahepaticvascularresistance ,IHVR)和门静脉压力 (portalvenouspressure ,PVP)的影响。方法 (1 )建立原位肝脏灌流模型 (insituliverperfusion ,ISLP) ,观察去甲肾上腺素 (noradrenalin ,NE)、NG 单甲基 L 精氨酸 (NG monomethyl L arginine,L NMMA)和精氨酸 (L arginine ,L Arg)对肝硬化大鼠门静脉灌注压 (portalperfusionpressure,PP)的影响。 (2 )观察活体门静脉注射L NMMA对肝硬化大鼠PVP的影响。结果 (1 )ISLP模型中 ,对照组大鼠灌流液中加入L NMMA后PP对NE的反应性显著增加 ,PP峰值增高至 (2 6 .7± 0 . 9)mmHg ;如预先给予L Arg后再加L NMMA ,PP对NE反应性显著低于单用L NMMA时 ,其PP峰值降为 (2 3 .2± 0 . 9)mmHg。eNOS基因治疗 5d后 ,PP对NE的反应性显著低于对照组 (P <0 .0 1 ) ,其PP峰值为 (1 9. 9± 1 .0 )mmHg ;加入L NMMA后PP峰值虽升至 (2 3.5± 2 .0 )mmHg,但仍显著低于对照组PP(P <0 0 1 )。 (2 )活体门静脉注射L NMMA后 ,eNOS治疗组PVP虽由 (1 3. 9±0 . 7)mmHg升至 (1 9. 3± 1 . 0 )mmHg ,但仍显著低于对照组PVP(P <0 .0 1 ) ,活体试验与原位灌注结果相符。
- 张志奇吴志勇邱江锋罗海峰兰斓
- 关键词：ENOS基因治疗肝硬化去甲肾上腺素
- eNOS基因治疗对肝硬化大鼠肝内eNOS表达和门静脉压力的影响
- 2003年
- 目的:探讨eNOS基因治疗对肝硬化大鼠肝内eNOS表达和门静脉压力的影响。方法:建立CCl_4肝内型肝硬化大鼠模型。取30只肝硬化大鼠,随机分成三组:eNOS治疗组(n=10)、Tris对照组(n=10)和空质粒对照组(n=10)。经门静脉分别注射脂质体-eNOS质粒、Tris缓冲液、脂质体-空质粒,分别测定注射前和注射5d后门静脉压力,并用RT-PCR和免疫组化方法检测三组大鼠注射5d后肝内eNOS的表达。结果:eNOS基因治疗5d后,eNOS mRNA和eNOS蛋白表达都显著增加。eNOS治疗组门静脉压力为(12.8±0.8)mmHg,显著低于治疗前的PVP(15.3±1.0)mmHg(P<0.01),而两对照组门静脉压力在注射前后无显著性差异。结论:以脂质体为载体,经门静脉注射eNOS基因治疗可增加肝内eNOS表达并降低门静脉压力。
- 张志奇吴志勇邱江锋罗海峰
- 关键词：门静脉基因治疗肝硬化
- 胃窦血管扩张症的发病与诊治被引量：5
- 2004年
- 胃窦血管扩张症是引起严重的上消化道出血的一种少见疾病。文章介绍其发病原因,病理机制,诊断治疗等,重点阐述其与门静脉高压性胃病的区别。
- 罗海峰吴志勇
- 关键词：胃窦血管扩张症上消化道出血门静脉高压性胃病病理学
- 门静脉高压症鼠内脏和血管中环加氧酶的表达
- 2005年
- 目的研究门静脉高压症鼠血浆前列环素(PGI2)水平、血管和小肠中环加氧酶(COX)基因表达以及内脏血流动力学的变化,探讨PGI2、COXmRNA表达与门静脉高压症高血流动力学之间的关系。方法20只雄性SD大鼠随机分成肝内型门静脉高压症组(IHPH,n=7)、肝前型门静脉高压症组(PHPH,n=7)和假手术组(SO,n=6),同位素微球技术行内脏血流动力学研究,并采取股动脉血行血浆六-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)浓度测定;RT-PCR法半定量测定血管和小肠标本中COXmRNA表达。结果IHPH、PHPH组均具有内脏血流量增加、内脏血管阻力降低等高血流动力学特征;IHPH、PHPH组血浆6-keto-PGF1α及胸主动脉、肠系膜上动脉和小肠COX-1mRNA的表达均显著高于SO组(P<0.05),且其浓度或表达情况均与内脏血流量(PVI)、内脏血管阻力(SVR)和门静脉压力(FPP)显著相关(P<0.05)。结论门静脉高压症时内脏、血管组织中COXmRNA表达和血浆6-keto-PGF1α浓度与内脏血流动力学变化显著相关。
- 孟方斌曹晖邱江锋罗海峰吴志勇
- 关键词：内脏门静脉高压症COX环加氧酶雄性
- 特异性siRNA抑制肝星状细胞Smad2表达被引量：13
- 2004年
- 目的构建Smad2特异性siRNA表达克隆,探讨其在肝星状细胞(HSCs)中是否能够有效地抑制Smad2的表达。方法利用生物软件进行Smad2mRNA二级结构模拟,选择合适的靶位点,使用pBSKU6载体表达Smad2特异性siRNA,在体外转染HSC鄄T6细胞株,应用RT鄄PCR和Western鄄blot技术检测Smad2mRNA和蛋白的表达情况。结果成功构建siRNA表达克隆,转染后Smad2在基因和蛋白的表达水平均受到了明显抑制。在构建成功的4个克隆中,CR4抑制mRNA表达最为显著,达90%以上;抑制蛋白表达率也达到80%左右。同时CR1和CR4能有效地下调HSC分泌Ⅲ型胶原。结论在体外实验中,载体表达的特异性siRNA可有效地抑制HSCs中Smad2的表达,并可对激活的HSCs分泌细胞外基质产生有益的影响。
- 罗海峰吴志勇邱江锋陈炜张志奇孟方斌
- 关键词：RNA干扰肝星状细胞转化生长因子肝纤维化
- 大鼠肝细胞缺氧预处理后基因表达谱的改变被引量：1
- 2005年
- 陈炜吴志勇邱江峰张志奇罗海峰Joan Rosello-Catafau
- 关键词：缺氧预处理大鼠肝细胞基因表达谱基因芯片技术缺血预处理受体介导
- 缺血预处理对肝细胞缺血再灌氧损伤的影响被引量：1
- 2005年
- 陈炜吴志勇邱江锋罗海峰张志奇Joan Rosello-Catafau
- 关键词：缺血肝细胞
- 大鼠肝星状细胞的原代分离、培养与鉴定被引量：5
- 2003年
- 目的 :介绍一种合理、实用、便捷的肝星状细胞 (HSCs)原代培养方法。方法 :对SD大鼠进行肝脏原位灌注、酶消化 ,并进行间质细胞密度梯度离心。使用 2 0 %、35 %和 5 0 %三层Percoll密度梯度分离纯化HSCs,分析其纯度、活力 ,并根据原代和传代HSCs的特征进行鉴定。结果 :每只鼠肝HSCs原代培养得率为(1.5～ 2 )× 10 7个细胞 ,纯度为 (97± 2 ) % ,细胞活力为 (98± 0 .6 ) %。原代和传代HSCs都表达Desmin ,只有传代 7d的HSCs表达α SMA。电镜见细胞浆内大量脂滴。结论 :本方法简单、实用、方便 ,所得结果优于其他方法。
- 罗海峰吴志勇陈炜邱江锋张燕
- 关键词：原代培养肝星状细胞
