董兰兰
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
- 供职机构：苏州大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ICOS转基因小鼠感染日本血吸虫后HSCs活化效应及对肝纤维化的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 观察ICOS转基因小鼠感染日本血吸虫后原代肝星状细胞（HSCs）的活化效应,探讨ICOSL/ICOS信号介导HSCs活化在血吸虫病肝纤维化形成中的作用.方法 建立ICOS-Tg小鼠及野生型小鼠日本血吸虫模型,通过肝脏酶灌注法和密度梯度离心法分离感染前（0周）和感染后（4～9周）的小鼠原代HSCs,运用台盼蓝拒染法鉴定分离的原代HSCs成活率;应用其在328 nm波长紫外激发光下自发荧光特性以及在肝细胞中其特异性表达神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）鉴定分离的原代HSCs纯度;培养7d后,采用SYBR染料法实时荧光定量PCR检测原代HSCs中TGF-β1,Ⅰ、Ⅲ型胶原及α-SMA mRNA的表达变化.结果 分离的原代HSCs纯度达到90％,其成活率为95％.ICOS-Tg小鼠肝HSCs中α-SMAmRNA表达水平即HSCs的活化程度在感染后6、9周显著高于同时期野生型小鼠（P＜0.01）.ICOS-Tg小鼠肝HSCs中TGF-β1,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA水平亦高于同时期野生型小鼠的水平,特别是在感染后6、9周呈显差异有统计学意义（P＜0.01～0.05）.结论 与野生型小鼠相比,感染日本血吸虫的ICOS-Tg小鼠肝HSCs活化增强,显著上调TGF-β1 mRNA、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及α-SMA mRNA的表达,提示在ICOS-Tg小鼠,ICOSL/ICOS信号的增强可明显上调HSCs活化促进肝纤维化的形成.
- 梁松王波许静董兰兰王言言赵波夏超明
- 关键词：日本血吸虫肝星状细胞TGF-Β1肝纤维化
- 吡喹酮压力下日本血吸虫耐药性的诱导和虫体差异表达蛋白的分析被引量：3
- 2014年
- 目的分析经吡喹酮(PZQ)半数有效量(ED50)诱导虫体与未诱导虫体之间的差异表达蛋白,为阐明PZQ的作用机制,探索候选疫苗靶抗原及药物治疗靶点,提供实验依据。方法应用PZQ ED50(25.98mg/kg),对单性感染4周后ICR鼠连续灌胃给药30d,停药21d后,再给予治疗剂量(200mg/kg)连续灌胃5d,肝门静脉灌注法收集成虫体外培养,观察虫体对PZQ的敏感性。收集诱导虫体和未诱导虫体,利用2D-DIGE分离差异蛋白,并予MALDI-TOF-MS鉴定,进而在线Uniprot软件检索差异蛋白功能。结果诱导成虫在8倍未诱导成虫临界致死浓度(112μmol/L)PZQ作用下,仍有75.6%存活率,与未诱导成虫临界致死浓度组相比差异有统计学意义(P<0.05)。诱导虫体和未诱导虫体共确认有30个差异表达蛋白,其中12个蛋白表达上调,18个蛋白表达下调,主要是细胞骨架相关蛋白、细胞中参与糖代谢和能量代谢的酶类、氧化还原酶类以及应激蛋白和参与解毒代谢的蛋白酶等。结论诱导虫体对PZQ敏感性下降显著,显示出明显的耐受性。诱导后,蛋白表达上调或下调提示PZQ诱导促进或抑制了某些特定基因的表达。为深入阐明PZQ作用机制,探索新的疫苗候选抗原及药物治疗的靶点,提供科学依据,同时为研发抗血吸虫新药开拓新途径和新思路。
- 董兰兰许静赵波梁松王言言关志勋曹蕴夏超明
- 关键词：日本血吸虫吡喹酮ED50耐药性蛋白质组学
- 吡喹酮衍生物抗日本血吸虫生物学效应研究
- 2014年
- 目的观察32种YCH-II-P系列PZQ衍生物对体外培养的日本血吸虫成虫和童虫活性的影响。方法 ICR小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第17d及第6周肝门静脉灌注法收集童虫与成虫,分别加不同浓度的化合物于培养液,过夜后(16h)无菌生理盐水洗涤虫体3次,换新鲜培养液继续培养虫体72h,每天置体视显微镜下观察其死亡率及活力降低情况,收集第72h虫体作扫描电镜观察。结果 32种YCH-II-P系列PZQ衍生物筛选出P96、P125、P126、P64种有效化合物。其中P96作用浓度为50μmol/L时虫体完全死亡,体外抗日本血吸虫成虫及童虫临界致死浓度均为25μmol/L,SEM显示虫体皮层及抱雌沟内壁损伤严重。结论 YCH-II-P系列PZQ衍生物中P96体外具有显著的杀日本血吸虫成虫和童虫作用效应。
- 孙缓董兰兰赵波仇思婕孙德群夏超明
- 关键词：日本血吸虫体外培养
- 吡喹酮衍生物抗日本血吸虫生物学效应及吡喹酮耐药虫体差异表达蛋白的筛选
- 本文对吡喹酮衍生物抗日本血吸虫生物学效应及吡喹酮耐药虫体差异表达蛋白的筛选进行了研究。本研究分为四个部分： 第一部分：吡喹酮衍生物DW-3-15、P96及P96异构体体外抗日本血吸虫虫期及性别特异性生物学效应。 目的...
- 董兰兰
- 关键词：日本血吸虫生物学效应蛋白结构
- 文献传递
- 一种采血箱
- 本实用新型公开了一种采血箱，包括箱体、安装在所述箱体顶部可打开或关闭的箱盖，箱体的底部设有用于放置化验单的第一抽屉，箱体上位于第一抽屉上方设有用于收集采血试管的试管收纳室、用于收集污染注射器的注射器收纳室、用于收集污染止...
- 王言言夏超明范宝芹赵波董兰兰曹蕴
- 文献传递
- 共吡喹酮衍生物抗日本血吸虫生物学效应及吡喹酮耐药虫体差异表达蛋白的筛选
- 第一部分吡喹酮衍生物DW-3-15、P96及P96异构体体外抗日本血吸虫虫期及性别特异性生物学效应 目的：观察两种吡喹酮衍生物DW-3-15、P96体外抗日本血吸虫童虫及雌、雄成虫生物学效应，初步探讨9种P96异构...
- 董兰兰
- 关键词：日本血吸虫差异表达蛋白
- 文献传递
- Real-time PCR法用于日本血吸虫感染宿主血清DNA的定量检测及其感染度的评价被引量：3
- 2014年
- 目的以日本血吸虫高度重复序列-逆转录转座子SjR2为靶序列,建立TaqMan实时定量PCR法检测宿主血清中的日本血吸虫DNA用于评价感染度。方法以real-time PCR法检测不同感染度的家兔模型血清DNA。结果该法具有高度的敏感性和特异性,可以检测到44.7拷贝的重组质粒DNA。在感染家兔后的3d到7周血清中均能检测到血吸虫DNA,不同感染度早期检测的时间节点及其检测阈值分别为,家兔感染30条尾蚴(EPG=14)需在感染后2周才能检测到目的DNA,其含量为119.03拷贝,感染50条尾蚴(EPG=24)、感染100条尾蚴(EPG=48)则在感染后1周可检测到目的DNA,其含量分别为54.36拷贝和72.24拷贝,在家兔感染200条尾蚴(EPG=97)、感染500条尾蚴(EPG=232)最早在感染后3d即可检测到目的 DNA,其含量分别为60.34拷贝和142.47拷贝。日本血吸虫感染宿主血清DNA水平与感染度呈正相关,即血清DNA浓度随感染度的增大而上升。结论本研究所建立的real-time PCR法可定量检测血清DNA动态变化并对日本血吸虫病诊断及感染度的评价具有潜在的应用价值,为日本血吸虫病诊断与疗效考核提供了新方法。
- 官威许静孙缓梁松董兰兰夏超明
- 关键词：日本血吸虫血清DNA感染度
