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H19和IGF2R基因在体细胞克隆猪各组织中的甲基化状态被引量：6: 2012年; 为了探求新生克隆猪可能的死亡原因以及是否存在不完全的DNA甲基化重编程,本试验运用亚硫酸氢盐测序法分别检测了H19基因和IGF2R基因差异甲基化区(DMR)在新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的甲基化状态。结果发现,H19基因DMR在克隆猪肺脏中表现为超甲基化,极显著高于正常猪(95.20%vs 46.80%P<0.01),且10个测序克隆中存在2处连续的全甲基化CpG位点(4～9位、12～S17位),而在其他组织中甲基化差异不显著(P>0.05);IGF2R基因DMR在肝脏中处于超甲基化状态,显著高于正常猪(80.00%vs 39.41%P<0.05),而在肺脏中为去甲基化状态,极显著低于正常猪(14.71%vs 66.47%P<0.01),在其他组织差异不显著(P>0.05)。结果说明,在死亡克隆猪中,H19基因DMR在肺脏和IGF2R基因在肝脏与肺脏中存在不完全的DNA甲基化重编程,这可能是导致克隆动物死亡的因素之一。; 吴志强谢一妮戴建军张廷宇吴彩凤张树山顾晓龙刘亮吴斌陈慧兰张德福马恒东; 关键词：DNA甲基化体细胞克隆

单层细胞共培养对猪去卵丘卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响: 2011年; 本试验比较观察第一极体(The first polar body,PbⅠ)、Oosight imaging system观察和hocchst33342染色法对第2次减数分裂中期(Metaphase Ⅱ,MⅡ)卵母细胞判定结果的相关性分析,并探讨卵巢皮质细胞(porcine ovarian cortex cells,pOCCs)、猪输卵管上皮细胞(porcine oviductal epithelial cells,pOECs)和猪卵丘颗粒细胞(porcine cumulus cells,pCCs)等3种单层细胞体外共培养体系对猪去卵丘卵母细胞(cumulus cells denuded oocytes,Dos)体外成熟(in vitro maturation,IVM)和孤雌发育的影响。结果显示:(1)Oosight imaging system判定卵母细胞成熟的结果与hocchst33342染色法判定的结果有很强相关性(R=0.973,P<0.01,N=90);(2)pOCCs单层细胞共培养体系中猪去卵丘卵母细胞成熟率显著高于pOECs((52.5±0.30)%vs(43.8±2.18)%,P<0.05),且这2组成熟率显著高于其余各组(P<0.05);Dos在3种单层细胞共培养体系培养后,成熟卵母细胞GSH含量较非共培养组都能显著升高(P<0.05),pOCCs组GSH含量最高((7.1±0.32)pmol/卵);(3)成熟后的Dos经孤雌激活,pOCCs组和pOECs组卵裂率和囊胚率都显著高于其余2组(P<0.05)。; 顾晓龙孟祥黔吴彩凤戴建军张廷宇谢一妮吴志强刘亮曾宪垠张德福; 关键词：共培养体外成熟

克隆猪印迹基因IGF2/H19印迹控制区的甲基化状态被引量：5: 2011年; 为了探求核移植过程中DNA甲基化重编程是否充分,运用亚硫酸氢盐测序法分别检测新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏组织中IGF2/H19基因印迹控制区(DMR1、DMR2、DMR3)的甲基化状态。结果发现,DMR1、DMR3在克隆猪和正常猪各组织中的甲基化水平不同,但差异不显著(P>0.05)。DMR2在克隆猪肺脏组织表现为超甲基化,极显著高于正常猪(P<0.01),且10个测序克隆中存在2处连续的全甲基化CpG位点(分别为4-9位和12-17位),而在其它组织中甲基化差异不显著(P>0.05)。说明DMR2在克隆猪肺脏组织可能存在DNA甲基化重编程紊乱,这也可能是导致该克隆猪死亡的因素之一。; 吴志强谢一妮张廷宇戴建军吴彩凤马恒东张德福; 关键词：DNA甲基化体细胞克隆

鸡蛋黄和鹌鹑蛋黄在崇明白山羊精液冷冻保存中效果比较被引量：2: 2011年; 对崇明白山羊精液采取3种不同离心处理去除精清,比较添加鹌鹑蛋黄和鸡蛋黄对精液冷冻保存效果的影响。结果表明:崇明白山羊精液冷冻保存中以1000 r/min离心5min去除精清后,添加鸡蛋黄组解冻后精子活力为50.48%,鹌鹑蛋黄组解冻后精子活力为42.98%。添加鸡蛋黄组的效果显著优于鹌鹑蛋处理组。; 刘亮孟祥黔吴彩凤戴建军张廷宇顾晓龙吴志强谢一妮张树山张德福; 关键词：崇明白山羊精液精子活力冷冻保存蛋黄

山羊H-FABP基因多态性及其与肌内脂肪含量的相关性研究: 随着当今社会人民生活水平的不断改善和提高,相对其它肉制品而言,羊肉以其低脂肪、低胆固醇、高蛋白、无公害等特点越来越受到广大消费者的喜爱。肌内脂肪(Intramuscular fat, IMF)含量是评价肌肉品质的重要指标...; 谢一妮; 关键词：山羊 H-FABP基因 PCR-RFLP IMF; 文献传递

崇明岛山羊群体H-FABP基因多态性的研究被引量：4: 2011年; 以崇明岛53只崇明白山羊、30只徐淮山羊、37只杂山羊为实验材料,利用直接测序寻找心脏型脂肪酸结合蛋白基因(H-FABP)部分exon2及intron2序列上的SNPs,PCR-RFLP分析其多态性。结果表明:存在3个SNP位点(A1017G、C1115T、G999-)。A1017G通过HaeⅡ-RFLP得到BB、Bb、bb 3种基因型,除徐淮山羊外,崇明白山羊和杂山羊处于Hardy-Weinberg非平衡状态,3个群体均为低度多态(PIC<0.25)。C1115T未引起酶切位点改变。G999-通过SauⅠ-RFLP得到DD、Dd、dd 3种基因型,崇明白山羊处于Hardy-Weinberg非平衡状态,为低度多态(PIC<0.25);徐淮山羊和杂山羊只有DD基因型,呈严重的偏态,没有多态性。本研究表明H-FABP在不同山羊品种中具有单核苷酸多态性,可进一步作为候选基因分析其与肌内脂肪含量性状的关联性。; 谢一妮吴彩凤张廷宇马恒东张德福; 关键词：遗传育种 H-FABP基因 PCR-RFLP 山羊

崇明岛山羊群体H-FABP基因多态性的研究: 以崇明岛53只崇明白山羊、30只徐淮山羊、37只杂山羊为实验材料，利用直接测序寻找心脏型脂肪酸结合蛋白基因（H-FABP）部分exon2及intron2序列上的SNPs，PCR-RFLP分析其多态性。结果表明：存在3个S...; 谢一妮吴彩凤张廷宇马恒东张德福; 关键词：遗传育种山羊

海藻糖对猪精子冷冻真空干燥保存效果的影响被引量：4: 2010年; 猪精子经冷冻干燥后,在光学显微镜和电子显微镜下观察其超微结构,并借助辅助生殖技术将其注入猪卵母细胞后,进一步观察受精卵的发育情况。结果表明:海藻糖组雄原核形成率(68.52%)、卵裂率(59.17%)和囊胚率(19.16%)优于EDTA组(64.59%、56.26%和15.62%)和对照组(35.36%、52.33%和8.60%)(P<0.05);海藻糖组的冷冻真空干燥猪精子分别在4℃下保存60、120、180d,雄原核形成率、卵裂率和囊胚率均无显著差异(P>0.05);海藻糖组的冷冻真空干燥猪精子复水化后孵育1h和2h,卵裂率、卵裂率和囊胚率均差异显著(P<0.05);海藻糖处理组与EDTA处理组中的冷冻真空干燥猪精子分别在4℃和-20℃下保存后各处理组间精子形态差异不显著(P>0.05);海藻糖组中B级冷冻真空干燥精子百分数显著多于EDTA处理组(P<0.05)。超微结构分析表明,冷冻真空干燥猪精子的损伤主要表现在顶体和颈部的肿胀与缺损、尾部断裂。; 孟祥黔顾晓龙吴彩凤戴建军张廷宇谢一妮吴志强刘亮马恒东张德福; 关键词：猪精子冷冻真空干燥单精子注射

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谢一妮