谢丽
- 作品数:4 被引量:11H指数:1
- 供职机构:第四军医大学基础医学部细胞工程研究中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 抗SARS-CoV人源Fab抗体的表达及鉴定
- 2006年
- 为进一步研究抗SARS-CoV刺突蛋白S(Spike)的中和抗体2g7,对其进行了原核表达,将2g7转入琥珀突变的非抑制性菌株(SupE-)的大肠杆菌Top10F'中进行可溶性表达。用HPLC纯化后,SDA-PAGE显示2g7的轻重链均存在,ELISA,Westernblot检测显示2g7能与SARS-CoV的S1蛋白结合。BIAcore测定其与抗原的亲和力为2.67×10-8mol。竞争ELISA显示该抗体能与SARS-CoV刺突蛋白S(Spike)结合并阻断该蛋白与其受体ACE2的结合。实验结果表明:利用免疫噬菌体抗体库能在小库容的情况下筛选获得高亲和性的人源抗体,并可以在大肠杆菌中获得高效表达,这一实验结果为有效性地防治病毒性疾病提供了思路。
- 李郁陈江浩包国强张思河宋斐谢丽杨红
- 关键词:刺突蛋白噬菌体抗体FAB
- 白介素-1β在妊娠期高血压疾病中的作用被引量:9
- 2005年
- 目的 通过研究缺氧对胎盘绒毛分泌白介素 -1β(IL- 1β)的影响及重组IL- 1β体外对内皮细胞的损伤,探讨IL - 1β在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法 8例正常足月胎盘绒毛分别在常氧(21%O2)及低氧(2%O2)的条件下培养, 采用ELISA方法检测胎盘绒毛培养液中IL- 1β的含量;体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),在培养液中加入重组IL- 1β 培养5h后,流式细胞仪检测内皮细胞血管细胞粘附分子-1(VCAM 1)的表达。结果 胎盘绒毛在缺氧条件下培养分泌 IL- 1β的量显著高于常氧条件;重组IL- 1β体外可诱导内皮细胞VCAM 1的表达。结论 缺氧可能是影响胎盘绒毛产生IL -1β的一个重要因素,IL- 1β能引起血管内皮细胞的损伤,IL- 1β可能参与了妊娠期高血压疾病的病理发生过程。
- 赵宏喜姚元庆李东红黄亮李怡谢丽姜峰侯秀红
- 关键词:妊娠期高血压疾病胎盘缺氧白介素-1Β血管细胞粘附分子-1
- HAb18Gedomab1单抗的制备及功能研究被引量:1
- 2004年
- 目的:制备抗人HAb18G/CD147胞外区蛋白(HAb18Ged)的单抗HAb18Gedomab1,并对其理化性质和生物学功能进行分析鉴定. 方法:用HAb18Ged免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术, 融合并筛选分泌抗人HAb18Ged蛋白单抗的杂交瘤细胞株, 制备腹水,采用离子交换层析法纯化该抗体.采用流式细胞术、免疫组化等方法对其特异性进行鉴定,并通过明胶酶谱、I型胶原酶谱、重组基底膜降解实验研究该抗体的体外生物学功能. 结果:获得一株稳定分泌抗人HAb18G/CD147胞外区蛋白单抗的杂交瘤细胞株HAb18Gedomab1,滴度为:1:106, 纯化后HAb18Gedomab1单抗的纯度大于90%,抗体亚型属IgG1型.流式细胞术及免疫组化结果证明,该抗体与FHCC-98细胞膜抗原及肝癌组织均呈特异性结合.生物学功能研究表明,HAb18Gedomab1可刺激鼠成纤维细胞(3T3)分泌明胶酶MMP-2,MMP-9及胶原酶MMP-1, MMP-8,并具有促进基底膜降解的作用. 结论:HAb18Gedomabl单抗可特异识别HAb18Ged,刺激MMPs分泌,促进基底膜降解.
- 叶卉陈志南米力商澎骞爱荣蒋建利汪莉谢丽张敏
- 关键词:HAB18G/CD147单抗基底膜杂交瘤细胞株流式细胞术胞外区
- 无血清培养HAb18细胞的生长代谢与抗体分泌特征被引量:1
- 2006年
- 通过逐步降低血清浓度,HPLC氨基酸分析及正交实验筛选研制了HAb18杂交瘤细胞的无血清培养基。对在该无血清培养条件下的细胞进行了计数,对培养上清液进行了葡萄糖、谷氨酰胺、乳酸和氨浓度以及抗体分泌量和抗原结合活性测定,并对动力学参数进行了分析,结果表明HAb18细胞在无血清培养条件下达到的最大细胞密度和抗体分泌量分别为0.91×106个/ml和43.8mg/L;细胞比生长速率较在有血清条件下稍有下降,而抗体合成速率提高(0.0207/h比0.0218/h,0.387pg/cell/h比0.218pg/cell/h,P<0.01)。无血清培养时葡萄糖和谷氨酰胺消耗无明显变化,但乳酸浓度降低,氨浓度升高;此外,分泌抗体的抗原结合活性增加。研究无血清培养条件下的HAb18细胞生长代谢和抗体分泌特征可为建立HAb18无血清悬浮流加培养工艺打下基础。
- 李玲米力谢丽刘蓉冯强徐力青陈志南
- 关键词:杂交瘤细胞无血清培养细胞代谢抗体分泌