谢连凤
- 作品数:4 被引量:13H指数:3
- 供职机构:赣南医学院更多>>
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- 人泪腺腺样囊性癌肿瘤干细胞分离培养及特征研究被引量:6
- 2015年
- 目的 分离、培养人泪腺腺样囊性癌(LACC)细胞系并研究其肿瘤干细胞(CSC)特性.方法 实验研究.应用无血清悬浮培养法分离培养人LACC-CSC,显微镜下观察细胞形态学改变.实验分为两组,即LACC-CSC实验组和LACC对照组,应用流式细胞仪检测干细胞标记CD133、ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达,Tanswell小室检测CSC侵袭力,并诱导CSC向血管内皮细胞分化,体外异种移植检测CSC致瘤力.实验组与对照组组间比较采用t检验.结果 LACC接种于无血清培养基后悬浮成球生长,10~ 12 d可形成形态规则的肿瘤微球体.流式细胞仪检测示LACC-CSC表达CD133比率为(35.67±6.86)%,LACC为(0.46±0.48)%,二者比较差异具有统计学意义(t=-8.867,P<0.05);LACC-CSC表达ABCG2为(39.99±4.54)%,LACC为(6.75±1.34)%,二者比较差异具有统计学意义(t=-9.932, P<0.05).Transwell体外侵袭实验示,培养24 h后,LACC-CSC穿过Matrigel基底膜平均为(32.60±8.79)个/高倍镜视野,LACC为(10.20±2.77)个/高倍镜视野,两组比较差异有统计学意义(t=5.433,P<0.05);培养48 h后LACC-CSC穿过Matrigel基底膜平均为(62.60±4.83)个/HP,LACC为(44.00±5.34)个/HP,两组比较差异有统计学意义(t=5.779,P<0.05).应用含VEGF和bFGF等的血清培养基低氧诱导,LACC-CSC呈贴壁生长,细胞形态改变,连续诱导后三维基质胶中可形成血管腔样结构,表达血管内皮标记CD31、CD34.体外移植瘤实验LACC-CSC组9d时全部出瘤,LACC组12d全部出瘤,两组成瘤率均为100%.结论 通过无血清培养法获得的LACC-CSC悬浮成球生长,表达经典干细胞标记CD133及ABCG2,具有更强的迁移侵袭力以及体内致瘤力,并具有多向分化潜能,具有干细胞的一般特性.
- 吕建美何彦津谢连凤刘勋朱利民
- 关键词:泪器眼肿瘤肿瘤干细胞
- 鼻窦黏液囊肿眼眶侵犯的影像学显示被引量:4
- 2014年
- 目的分析鼻窦黏液囊肿眼眶侵犯的cT和超声表现,探讨对其诊断和鉴别诊断价值。方法对2000年5月至2011年12月在天津医科大学第二医院眼科和眼科医院就诊的34例黏液囊肿患者,均经手术治疗和病理证实确诊,结合手术对照分析其黏液囊肿CT和超声表现。结果34例眼眶黏液囊肿病例中,原发于额窦24例(70.6%,24/34),筛窦9例(26.5%,9/34),上颌窦1例(2.9%,1/34)。囊肿范围均超出原发部位,在24例原发于额窦者中,除侵犯眼眶之外,16例蔓延至筛窦,4例侵入前颅窝。9例原发于筛窦者,除侵犯眼眶外,窦内壁向中膈移位,阻塞局部鼻腔。囊肿内密度,23例均匀,11例不均匀。CT值由+19HU至+88HU,平均+46.6HU。9例行强化扫描,均呈环形增强。每例均有窦腔扩大和眶腔间的骨壁吸收,还有4例额窦上壁吸收。囊肿窦内部分的周围骨壁,有不同程度增厚23例。囊肿内侧骨壁向鼻中隔移位或吸收,局部鼻腔闭锁。根据囊肿侵人眼眶的程度,引起内直肌、视神经及眼球向外移位,眼球突出、变形。超声表现:32例黏液囊肿为点状弱内回声,2例缺乏内回声;全部病例显示声衰减不明显。彩色多普勒血流显像检查,34例黏液囊肿内均缺乏血流信号。结论CT和超声能准确显示病变的位置、形状、大小、边界、内密度或内回声、声衰减程度和继发改变,以及供血状况,对于黏液囊肿的诊断和鉴别诊断有重要意义。
- 谢连凤宋国祥何彦津
- 关键词:眼眶黏液囊肿CT超声
- 人泪腺腺样囊性癌细胞系裸鼠异种种植的研究被引量:3
- 2014年
- 目的 探讨人泪腺腺样囊性癌(LACC)细胞系裸鼠异种种植模型的建立及荷瘤的组织生物学行为.方法 实验研究.将人LACC细胞系接种于10只裸鼠腋下的皮下,注射细胞悬液后每天观察裸鼠以及测量裸鼠荷瘤的最长径L和最短径W,并用公式V(荷瘤体积)=(LxW2)/2计算出荷瘤的体积.分别于注射细胞悬液后14、28、35、42、49 d随机取2只裸鼠的荷瘤以及裸鼠的肝脏、肺和腋下淋巴结.对注射细胞后14 d的荷瘤行透射电镜观察,对注射细胞后14、28、35、42、49 d的荷瘤行HE染色、免疫组织化学染色检测Keratin、Vimentin、α-SMA、S-100、Desmin的表达以及提取其总RNA,用RT-PCR检测该荷瘤的人类β-actin的表达情况.对所取的裸鼠肝脏、肺和腋下淋巴结组织切片,行HE染色,观察有无肿瘤转移.结果 接种细胞系后7d,10只裸鼠腋下皮下全部长出荷瘤.HE染色和透射电子显微镜下观察,荷瘤具有典型的上皮性肿瘤组织结构.对荷瘤行免疫组织化学染色示Keratin、Vimentin、α-SMA、S-100阳性,Desmin阴性.RT-PCR检测荷瘤表达人类β-actin基因.光镜下观察,均未发现肿瘤转移至裸鼠肝脏、肺和腋下淋巴结.结论 人LACC细胞具有一般恶性肿瘤的特点,同时也具有腺样囊性癌细胞的特点.荷瘤具有与原瘤一致的组织学特性,该动物模型易复制,时间短,成功率高,是研究LACC的良好模型.
- 谢连凤周蓓清何彦津林婷婷刘勋陈陆霞朱利民
- 关键词:泪器疾病眼肿瘤
- 人泪腺腺样囊性癌细胞系异种种植研究及其肿瘤干细胞的分离培养和鉴定
- 目的 1.探讨人泪腺腺样囊性癌细胞系的生物学特性。 2.建立人泪腺腺样囊性癌的动物模型,为研究泪腺腺样囊性癌的发生发展以及治疗提供实验依据和条件。 3.从人泪腺腺样囊性癌细胞系LACC中分离培养泪腺腺样囊性癌肿瘤干...
- 谢连凤
- 关键词:泪腺腺样囊性癌肿瘤干细胞无血清培养基生物学特性
- 文献传递