谭锦泉
- 作品数：65 被引量：291H指数：10
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学语言文字更多>>
- RNA干预与microRNA被引量：3
- 2004年
- RNA干预 (RNA mediatedinterference,RNAi)已逐渐成为基因功能研究的重要工具。RNAi主要通过双链RNA的介导 ,特异性地降解相应序列的靶mRNA ,从而阻断相应基因表达的转录后水平的基因沉默 (genesilencing)。microRNAs(miRNAs)是近年才研究发现的一类新型的小分子RNAs。随着对miRNAs进一步研究 ,表明miRNAs具有组织特异性 ,并在生物生长发育阶段中起到重要的调控作用 ,但具体机制还在进一步研究中。随着对microRNAs功能及RNAi作用机理的深入研究 。
- 熊洁谭锦泉金由辛
- 关键词：RNAI基因沉默SMALLMIRNAS
- Jα33基因工程蛋白与多克隆抗体的制备及初步应用被引量：1
- 2012年
- 为了获得同时识别人类和小鼠MAIT细胞的特异性抗体,我们制备了MAIT细胞TCRα链Jα33融合蛋白及其抗体,为MAIT细胞在炎症性肠道疾病(IBD)中作用的研究提供有利的工具。用Jα33的全长序列为引物经PCR扩增Jα33串联体,扩增的串联体片段连接进入T载体,阳性克隆转入pGEX-4T-1表达载体中原核表达GST-Jα33融合蛋白,纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备anti-Jα33多克隆抗体。并分别用Western blot和RT-PCR检测IBD模型小鼠MAIT细胞Jα33的表达。成功获得分子量约为38 kD的融合蛋白,免疫大白兔后得到抗Jα33的多克隆抗体,Western blot结果显示Jα33多克隆抗体能检测到人外周血单个核淋巴细胞表面Jα33的表达,而HeLa中则无Jα33的表达;MAIT细胞Jα33在IBD小鼠肠组织中表达量明显低于正常对照。成功制备了能同时识别人类和小鼠MAIT细胞Jα33的多克隆抗体,为研究MAIT细胞的定位和功能开启了方便之门。
- 肖睿璟吴孟君王梅彭妹郑颖城郑小玲何玉玲谭锦泉
- 关键词：抗体制备
- CD34^+造血祖细胞的聚集、CXCR3 mRNA的检测及CXCR3极化的研究
- 2001年
- 目的 研究新鲜分离的和粒细胞单核细胞 集落刺激因子 (granulocytemacrophagecolonystimulatingfactor,GM CSF)刺激的CD34+ 造血祖细胞上CXC趋化性细胞因子受体 3(CXCchemokinereceptor 3 ,CXCR3)mRNA水平表达的区别 ,以及在γ 干扰素诱导蛋白 10 (IFN γinducibleprotein10 ,γIP 10 )和γ 干扰素诱导的单核因子 (monokineinducedbyIFN γ ,Mig)的作用下 ,GM CSF刺激的CD34+ 造血祖细胞的聚集作用和CXCR3分布的变化。方法 采用Northernblotting检测CXCR3mRNA水平的表达 ;2 4孔板细胞培养法观察细胞聚集作用 ;荧光标记抗体染色CXCR3后 ,以共聚焦免疫荧光显微镜观察CXCR3的极化现象。结果 GM CSF刺激的CD34+ 造血祖细胞上CXCR3mRNA表达水平明显高于新鲜分离的细胞 ;γIP 10和Mig能够诱导GM CSF刺激的CD34+ 造血祖细胞发生聚集现象和CXCR3重新分布现象 ,CXCR3聚集成束 ,并指向特定的方向。结论 GM CSF的刺激作用能够显著性提高CXCR3在CD34+ 造血祖细胞上的表达 ;γIP 10和Mig能够诱导GM CSF刺激的CD34+ 造血祖细胞的聚集作用和CXCR3的极化现象。
- 王红艳黄保军王明军郭克泰秦卫兵谭锦泉
- 关键词：GM-CSFCD34造血祖细胞CXCR3MRNA极化
- 遗传印记基因PEG10转基因小鼠的建立及其皮下移植瘤生长和转移的变化被引量：1
- 2009年
- 目的 建立PEG10转基因小鼠模型，研究PEG10对小鼠皮下移植瘤的生长和转移的影响。方法PCR阳性转基因鼠经RT—PCR、Westernblot鉴定后，皮下注射H22细胞，连续测量肿瘤体积。12d后取肿瘤和肝脏组织进行HE染色，肝脏组织进行SP染色，检测PEG10蛋白的表达。计量资料采用独立样本的f检验。结果阳性首建鼠的肝脏中检测到目的基因和蛋白的表达。转基因小鼠皮下瘤的体积（4．08、4．23cm3）及质量（6．89、6．48g）均显著高于野生型小鼠（1．61cm。及1．63g，P〈0．05），均向周围组织侵袭并出现肝转移，肝脏中检测到PEG10蛋白；野生型小鼠的肿瘤组织有包膜，未出现肝转移。结论构建的PEG10转基因小鼠模型可促进皮下移植瘤的生长、侵袭和转移。
- 刘瑶林菊生郑新民谭锦泉汪志军张强吴伟常莹
- 关键词：肝肿瘤转基因小鼠皮下移植瘤模型
- TNF受体(P55)胞外区和IgGFc嵌合蛋白高效原核表达载体的构建被引量：2
- 2002年
- 目的 构建TNF受体 (P5 5 )胞外区和IgGFc嵌合蛋白的高效原核表达载体。方法 以人心肌cDNA文库为模板 ,PCR扩增TNF受体 (P5 5 )胞外区全基因 (sTNFR ED) ,亚克隆入pGEM T/IgGFc中构建 pGEM T/sTNFR ED∶Ig GFc重组子 ,然后以其为模板 ,在上游引物中引入原核细胞高频密码子 ,再次PCR扩增去信号肽TNF受体 (P5 5 )胞外区和IgGFc嵌合基因 (TNFR ED∶IgGFc) ,亚克隆入 pUC19载体 ,经序列测定正确后克隆入原核表达载体 pBV2 2 0中。结果 成功构建了TNF受体 (P5 5 )胞外区和IgGFc嵌合蛋白高效原核表达载体 ,命名为 pBV2 2 0 /TNFR ED∶IgGFc。结论 pBV2 2 0 /TNFR ED∶IgGFc表达载体的构建 ,为进一步表达TNF受体 (P5 5 )胞外区和IgGFc嵌合蛋白及其在中和TNF毒副作用。
- 祖东徐春晓张智清谭锦泉
- 关键词：TNF受体嵌合蛋白
- 活动性系统性红斑狼疮患者CD8^+T细胞CCR7异常高表达被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨系统性红斑狼疮患者T细胞是否存在CCR7表达异常及功能改变。方法 应用流式细胞仪、实 时定量RT PCR和Northern印记分别检测正常机体和SLE患者CD4+T细胞和CD8+T细胞CCR3、CCR4、 CCR5、CCR7和CCR9的表达情况;利用趋化实验检测其功能。结果 活动性SLE患者CD8+T细胞异常高表达 CCR7(94.8%),CD8+T细胞CCR7mRNA水平明显增高(拷贝数约5.3×103±1.1×103);CCL21可选择性诱导 活动性SLE患者CD8+T细胞发生明显的趋化运动,最大C.I.值为3.8±0.42。结论 CCR7通常选择性、功能性 地高表达于活动性SLE患者的CD8+T细胞上,并不异常表达于其CD4+T细胞,而该现象并不见于正常机体和非 活动性SLE患者。
- 何玉玲陈朗吴春晨周钢谢珞琨张秋萍谭锦泉
- 关键词：系统性红斑狼疮趋化因子受体CD8^+T细胞趋化作用
- IL-2诱导外周血单个核细胞对肿瘤细胞的杀伤效应被引量：3
- 2003年
- 目的 了解白细胞介素 2 (IL 2 )诱导外周血单个核细胞 (PBMC)对肿瘤细胞的杀伤效应 ,探讨其作用机制。方法 IL 2 ( 10 5IU/L)体外诱导PBMC 5d ,并与Raji细胞株共同培养 ,采用MTT法测定不同时间诱导后的PBMC对Raji细胞的杀伤效应 ;采用BAS ELISA法检测杀伤活性最大时的IFN γ、TNF α、sFasL的表达 ,采用流式细胞仪检测诱导后PBMC的FasL、穿孔素、颗粒酶B的表达。结果 IL 2 ( 10 5IU/L)体外诱导PBMC 5d时 ,都能明显增强对Raji细胞的杀伤活性 ,而且在培养的第 4天杀伤活性最高 (P <0 0 5 ) ,诱导PBMC 4d后 ,FasL、穿孔素、颗粒酶B的表达与B组相比 ,明显增加 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 IL 2 ( 10 5IU/L)体外诱导PBMC能明显增强对Raji细胞的杀伤活性 ,主要是通过诱导PBMC表达IFN γ、穿孔素。
- 杨明珍夏瑞祥黄建尧曾庆曙程昌斌谭锦泉
- 关键词：IL-2外周血单个核细胞肿瘤细胞杀伤效应免疫学
- 熊果酸诱导胃癌细胞BGC-823凋亡机制的研究被引量：13
- 2006年
- 目的:探讨熊果酸(UA)对胃癌细胞BGC-823增殖抑制和诱导凋亡的作用机制。方法:采用MTT法检测UA对BGC-823细胞的增殖抑制效应;用琼脂糖凝胶电泳观察DNA凋亡片段;流式细胞仪检测UA作用后BGC-823细胞的周期分布和凋亡率;用Fas单克隆抗体检测BGC-823细胞表面Fas的表达;Western blot检测BGC-823细胞Bcl-2的表达及caspase-3和caspase-8的活性。结果:UA对BGC-823细胞具有增殖抑制效应,并呈浓度和时间依赖性。UA作用24 h时半数抑制浓度(IC50)为43.10μmol/L。当UA浓度为50和60μmol/L时,琼脂糖凝胶电泳可呈现DNA凋亡梯带。随着UA浓度从20μmol/L递增到60μmol/L,周期检测发现BGC-823细胞出现亚G1峰逐步增高,S期阻滞增加,G1期下降。细胞内Bcl-2表达下降,caspase-3和caspase-8活性增加。BGC-823细胞表面未发现Fas的表达。结论:UA对BGC-823细胞有较强的增殖抑制和诱导凋亡作用,下调Bcl-2的表达及激活caspase-3、caspase-8可能是其诱导凋亡的机制。
- 陈会敏张静胡志芳董兴高罗和生谭锦泉邓涛张秋萍
- 关键词：熊果酸BGC-823凋亡BCL-2CASPASE
- 一种新型调控基因表达的反义寡核苷酸:LNA
- 2003年
- LNA(lockednucleicacid)是新近发现的一种新型调控基因表达的反义寡核甘酸 ,它以RNA为骨架 ,亚甲基键连接核糖环中的 2′ 氧和 4′ 碳。这种锁套式的结构 。
- 肖凌王明军刘胜武谭锦泉
- 关键词：基因调控反义寡核苷酸LNA基因表达
- γIP-10和Mig通过趋化因子CXC受体3激活嗜酸性粒细胞的NFAT被引量：1
- 2001年
- 目的 研究γIP 1 0和Mig通过趋化因子CXC受体 3 (CXCR3 )激活嗜酸性粒细胞的活化细胞核因子 (nuclearfactorofactivatedTlymphocytes,NFAT)作用。方法 嗜酸性粒细胞的纯化技术、流式细胞术、实时定量逆转录PCR (RT PCR)、核提取物和电泳移动性转变测定等方法进行测定与分析。结果 CXCR3大量在嗜酸性粒细胞上表达。通过流式细胞仪及实时定量RT PCR技术检测证明 ,IL 2和IL 1 0上调或下调嗜酸性粒细胞上CXCR3的蛋白和mRNA表达水平。其配体γIP 1 0和Mig可以引起嗜酸性粒细胞中的NFAT复合体的核易位而激活NFAT1和NFAT4。结论 CXCR3 γIP 1 0和 Mig受体 配体以及IL 2和IL 1 0对CXCR3表达的调节作用可能在过敏炎症过程 (包括启动、发展和结局的病理生理过程 )的细胞因子 /趋化因子环境中发挥特别重要的作用。
- 李群谭锦泉黄保军胡春松陈静PerS.SkovLarsK.Poulsen罗畅民
- 关键词：趋化因子趋化因子受体细胞活化嗜酸性粒细胞
