贾小娜
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：东华大学生物科学与技术研究所更多>>
- 发文基金：上海市基础研究重大（重点）项目国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 次壶腹腺丝蛋白功能模块的研究
- 蜘蛛丝是一种理想的生物材料，具有很大的潜在应用价值。由于蜘蛛纺丝量少以及互相残杀的天性，不能像家蚕那样通过大规模、密集饲养的方式来获取大量的蜘蛛丝蛋白纤维。因此，采用生物技术的方法重组表达蜘蛛丝蛋白以及后续的仿生成为一种...
- 贾小娜
- 文献传递
- 次壶腹腺丝蛋白功能模块的研究被引量：2
- 2014年
- 蜘蛛丝是天然的生物材料,具有潜在的巨大应用价值。研究蜘蛛丝蛋白质的结构与功能,有助于破解蜘蛛丝蛋白质的成丝机理,为制备优良材料学性能的仿生蜘蛛丝纤维提供理论依据。以MiSp蜘蛛丝的重复区和C端非重复区蛋白多肽为研究对象,在不同pH值和离子条件下,在体外研究其二级结构与成丝的关系。CD图谱显示:表达纯化的重组蜘蛛丝蛋白R1R2在pH 7.5、6.5和5.5时二级结构相似,均为无规则卷曲,而R1R2CT则主要呈现为α螺旋构象;扫描电镜结果表明:在以上3种pH条件下,只有pH 5.5时R1R2和R1R2CT才形成重组丝纤维,R1R2CT纤维形态较平整,类似于天然蛛丝纤维形态,而R1R2丝纤维则呈条带状,表面粗糙。另外,氯化钠不利于形成形态平整的丝纤维。该成果为研究蛛丝蛋白的成丝机理奠定基础,也为制备仿生蛛丝蛋白纤维提供理论依据。
- 贾小娜陈格飞孟清
- 关键词：Α螺旋纤维
- 重组蜘蛛丝蛋白MiSp NT结构域在不同pH环境下的Trp荧光光谱及圆二色谱分析被引量：3
- 2014年
- 为明确蛛丝蛋白NT结构域的生物学功能,首次研究了MiSp NT结构域在不同pH条件下的二聚化动力学及二级结构特性.基于蛛丝蛋白MiSp全长编码基因,克隆并分别在BL21(DE3)和Rosetta-gami 2(DE3)中重组表达MiSp NT结构域:BL21(DE3)表达水平较高,约35 mg/L LB培养基,表达产物需经短暂超声和2 mol/L尿素促溶;Rosetta-gami 2(DE3)表达产物可溶性较好,但表达水平仅为BL21(DE3)一半左右.融合蛋白经凝血酶介导的2次Ni-NTA纯化,纯度达到95%以上.Trp荧光光谱分析表明,MiSpNT在pH为7.0左右时开始二聚化,pH5.7时二聚体为主要构象,pH T约为6.6.MiSpNT在pH 7.5,6.5和5.5条件下的CD图谱相似,均主要为α-helix,表明NT二聚化与二级结构水平的变化没有直接联系.本研究为进一步探索蛛丝蛋白NT结构域的结构和功能以及成丝机理提供线索.
- 陈格飞贾小娜郑翔宇孟清
- 关键词：二聚化
