郎志宏
- 作品数：117 被引量：401H指数：13
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 双抗夹心ELISA方法检测转cry8Ca基因烟草的杀虫蛋白
- 2009年
- 为了检测抗金龟子幼虫的转cry8Ca基因烟草杀虫蛋白的含量，对双抗夹心酶联免疫吸附法（DAS—ELISA）检测体系中的反应条件进行了优化。采用方阵法对血清抗体的反应浓度进行筛选，对提取液、包被液、封闭液和底物作用时间进行比较和优选，结果确定多克隆抗体浓度为1：3200，酶标结合物浓度为1：400，pH9．6碳酸缓冲液提取，pH7．4磷酸缓冲液包被，0．5％明胶．PBST封闭，TMB底物作用15min为最佳双抗夹心ELISA检测条件。通过这一检测体系，对转cry8Ca基因烟草植株进行检测，S12株系的Cry8C蛋白含量最高，每克鲜重含有12．683～14．461μg，占总蛋白量的0．052％-0．062％。
- 王容燕董建臻王金耀郎志宏曹伟平宋福平杜立新宋健冯书亮
- 关键词：转基因烟草金龟子幼虫
- 改造的mcry2Ab4基因及其应用
- 本发明涉及“改造的mcry2Ab4基因及其应用”，属于生物防治技术领域。改造的mcry2Ab4基因，编码具有SEQ ID NO4所示氨基酸序列的蛋白，其核苷酸序列如SEQ ID NO3所示。本发明通过调整cry2Ab4基...
- 张杰郎志宏梁革梅宋福平束长龙黄大昉
- 文献传递
- 对鞘翅目害虫高效的苏云金芽孢杆菌cry8H基因、蛋白及其应用
- 本发明涉及“对鞘翅目害虫高效的苏云金芽孢杆菌cry8H基因、蛋白及其应用”属于生物防治技术领域。本发明对鞘翅目害虫高毒力的cry8H基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO1所示，人工设计合成的可以在植物中表达的cry8H...
- 束长龙宋福平王容燕张杰冯书亮黄大昉郎志宏
- 文献传递
- 转基因作物的生态安全性问题及其对策被引量：6
- 2010年
- 随着转基因作物商业化进程的加快,转基因作物的安全性引起了人们越来越多的关注,主要就转基因作物生态安全性问题以及产生的原因进行综述,并提出我国现阶段应采取的对策。
- 王延锋郎志宏赵奎军黄大昉
- 关键词：转基因作物生态安全基因漂移安全性评价
- 甜高粱琥珀酸半醛脱氢酶SbSSADH基因克隆及原核表达被引量：4
- 2015年
- γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)代谢旁路是TCA循环的一个代谢支路,广泛存在于动植物和微生物中,植物GABA代谢旁路与植物生物和非生物胁迫响应相关。琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)是GABA旁路的一个关键酶,对GABA途径在生物体内发挥功能起着至关重要的作用。通过检索Maize GDB和Gramene数据库获得甜高粱Sb SSADH基因信息,利用同源克隆的方法获得了甜高粱Sb SSADH基因。序列分析结果表明,Sb SSADH基因与玉米、甘蔗在核酸序列的相似度为94.77%,但前端约200 bp的信号肽部分差异较大。通过以p ET-28a为表达载体构建Sb SSADH原核表达系统,Rosetta菌株为表达菌,表达出约50 k D的SSADH蛋白,将纯化的蛋白进行酶活分析,纯化蛋白具有琥珀酸半醛脱氢酶活性,并且受酶抑制剂ATP和AMP的抑制。
- 王龙海杨泽伟朱莉黄大昉郎志宏
- 关键词：甜高粱蛋白表达酶活测定
- 转2mG2-epsps基因烟草的草甘膦耐受性分析被引量：12
- 2009年
- 利用农杆菌介导法将耐草甘膦基因2mG2-epsps转入烟草,获得87株PCR阳性植株,阳性率为43%。对PCR阳性植株进行Southern杂交、RT-PCR、Western杂交和ELISA分析,结果显示外源基因已经整合到烟草基因组中并高效表达,转基因植株的叶片中2mG2-EPSPS蛋白的最高表达量可达26.03μg/g鲜重。转基因烟草草甘膦耐受性分析显示,其中有15个转化事件表现出较好的草甘膦耐受性,对草甘膦的耐受性可达到1%。转基因植株的种子可以在10 mmol/L草甘膦异丙铵盐浓度下萌发,T1代转基因烟草幼苗可以耐受浓度为0.8%的草甘膦。研究结果表明转2mG2-epsps基因烟草具有较高的草甘膦耐受性,2mG2-epsps基因可以用于耐除草剂转基因作物的培育。
- 孙鹤郎志宏陆伟林敏黄大昉
- 关键词：转基因烟草
- 一种以甜高粱幼穗或幼穗诱导愈伤组织为外植体遗传转化方法
- 本发明为“一种以甜高粱幼穗或幼穗诱导愈伤组织为外植体遗传转化方法”，属植物基因工程技术领域。本发明对甜高粱幼穗外植体诱导愈伤组织，采用农杆菌介导法转化外源基因，通过预培养，然后共培养，再筛选培养，得到抗性愈伤，再将其继代...
- 黄大昉朱莉郎志宏李桂英
- 文献传递
- 甜高粱幼穗愈伤组织再生体系建立的方法
- 本发明为“甜高粱幼穗愈伤组织再生体系建立的方法”，属植物基因工程技术领域，包括如下步骤：1)选取幼穗，旗叶期长约2-5cm幼穗，切成薄片，2)将其接种于诱导培养基中培养，形成愈伤组织，3)将愈伤幼穗组织块在继代培养基中继...
- 黄大昉朱莉郎志宏李桂英
- 文献传递
- 高粱遗传转化研究进展被引量：12
- 2011年
- 高粱是世界上仅次于小麦、水稻、玉米和大豆的重要作物之一,然而由于其高效、稳定的遗传转化体系的建立较难,限制了其转基因研究进程。近年来,随着转基因技术的不断发展和完善,高粱转基因研究也取得了飞速的发展。从高粱遗传转化再生系统中外植体的选择、转化方法、影响转化和基因表达效率的因素等几方面进行了综述,并总结转基因高粱研究进展。
- 朱莉郎志宏李桂英黃大昉
- 关键词：高粱基因枪法农杆菌介导法
- 高赖氨酸蛋白基因SBgLR的克隆及其对提高玉米种子中蛋白质和赖氨酸的作用
- 从马铃薯(Solanum tuberosum L.)中克隆的SBgLR基因由3个外显子和2个内含子组成,编码211个氨基酸,其赖氨酸重量比为18.93%,是一个天然存在的高赖氨酸蛋白基因。构建了两个含SBgLR基因组DN...
- 郎志宏于静娟朱登云赵倩敖光明
- 关键词：蛋白质赖氨酸
- 文献传递
