钟小林
- 作品数：45 被引量：158H指数：6
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新世纪高等教育教学改革工程重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- NF-κB参与小鼠β-防御素3基因急性时相表达的转录调节被引量：4
- 2004年
- 目的 分析急性时相反应时调节小鼠 β 防御素 3基因表达的转录因子。 方法 通过腹腔注射外源性脂多糖(LPS)建立小鼠急性时相反应 ,经Northernblot方法检测mBD3mRNA在组织中的表达 ;EMSA和Southwesternblot分析细胞核蛋白中的转录因子。结果 内毒素注射后仅在肝脏组织中检测到mBD3mRNA ;肝脏细胞核蛋白中有与mBD3基因调节区特异DNA片段结合的转录因子 ,分子量在 ( 4 3 0～ 66 2 )× 10 3之间。结论 小鼠急性时相反应时NF κB参与 β 防御素
- 杨卫华周建新钟小林廖荣霞
- 关键词：NF-ΚBΒ-防御素急性时相反应转录调节
- PCR-SSCP检测急性白血病患者N-ras基因突变及临床意义初探被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨N ras基因突变与急性白血病发生的关系。方法 采取骨髓和外周血白细胞提取DNA ,用PCR SSCP分析技术分别对急性白血病患者、正常对照组的N ras基因突变进行检测。结果 84例急性白血病患者中 2 5例发生N ras基因突变 ,基因变异频率为 2 9 8% ,其中急性淋巴细胞白血病为 18 6% ,急性髓细胞白血病为 41 4% ;11例随访 6个月 ,7例N ras基因突变消失 ,4例N ras基因突变持续存在 ;正常对照组未发现N ras基因突变。结论 N
- 刘红彭家和江渝钟小林曹廷兵张立何凤田
- 关键词：N-RAS基因急性白血病突变
- 基因诊断的基本策略与临床应用被引量：1
- 2004年
- 钟小林黄刚张立何凤田
- 关键词：基因诊断疾病
- ERR1突变体I240R对其转录活化功能的影响
- 2005年
- 目的 分析ERR1突变体I240R对ERR1转录活化功能的影响。方法 用重叠延伸PCR构建ERR1的缺失突 变体ERR1 I240R到真核表达质粒pSG5上,通过荧光素酶报告基因表达系统检测ERR1 I240R对ERR1转录活化功能的影 响。结果 测序证实成功构建了ERR1的突变体pSG5 ERR1 I240R。报告基因表达系统检测显示ERR1 I240R激活的荧光 素酶报告基因活性明显高于野生型的ERR1。结论 ERR1突变体ERR1 I240R转录活化功能明显高于野生型的ERR1,为 进一步研究ERR1的结构与功能打下了基础。
- 李强陈敏陈彬李渝萍陈健钟小林周度金
- 关键词：突变体转录活化
- 核因子-κB参与小鼠Hepcidin基因的转录调控被引量：3
- 2006年
- 目的探讨核因子-kB(NF-kB)参与Hepcidin基因急性时相表达转录调控的可能性及其分子机制。方法腹腔注射脂多糖(LPS)建立小鼠急性时相反应模型,检测Hepcidin表达与LPS的剂量效应和时间效应关系；电泳迁移率变动实验(EMSA)初步探讨NF-kB参与Hepcidin基因转录调控的可能性；构建NF-kB p65亚基特异的小干扰RNA(siRNA)表达载体pAVU6+27-NF-kB,DOTAP脂质体法瞬时转染小鼠原代肝细胞,观察NF-kB p65基因沉默后Hepcidin表达改变以及LPS诱导Hepcidin表达情况。结果 Hepcidin表达与LPS注射剂量和时间呈正相关,50 μg LPS注射后10h,Hepcidin表达达到峰值。EMSA 显示-53～-64 bp位点出现明显的滞后带。NF-kB p65特异的siRNA表达载体瞬时转染原代肝细胞后,基因沉默效率为50％～67％,转染细胞Hepcidin的表达水平明显下降,且并不能被LPS显著诱导。结论 NF- kB参与Hepcidin转录调控,p65亚基是其上调Hepcidin基因表达的关键组分,-53～-64 bp是p65亚基的作用位点。
- 廖荣霞孙建国钟小林周建新王元忠
- 关键词：急性时相反应HEPCIDINRNA干扰
- 芥菜转基因再生体系的建立被引量：6
- 2004年
- 以叶用和茎用芥菜的子叶、叶片及下胚轴为外植体 ,通过筛选 12种含不同种类和浓度激素的培养基 ,综合分析与确定影响芥菜转基因再生体系各因素的最佳值 ,以及对再生抗性苗的PCR、Southern、Northern及抗虫鉴定 ,筛选到了能稳定表达外源基因的转基因植株 。
- 杨朝辉雷建军曹必好钟小林李蓉芬江渝彭家和何凤田
- 关键词：芥菜外植体抗虫育种CPTI基因农杆菌介导
- 抗人结肠癌单抗MC5的功能性ScFv在大肠杆菌中的可溶性表达(英文)
- 2003年
- 目的 制备抗人结肠癌单抗MC5的具功能活性的可溶性单链可变区片段 (ScFv)。方法 从分泌MC5的杂交瘤细胞分离mRNA ,RT PCR分别扩增抗体质量、轻链可变区基因 (VH和VLDNA) ,经linkerDNA连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与噬粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,转化菌经辅助噬菌体M13KO7感染后 ,获得重组噬菌体。以高表达MC5结合抗原的人结肠癌细胞系SW4 80对重组噬菌体进行 2轮筛选后 ,经ELISA筛选呈现抗体ScFv片段的噬菌体单克隆。取 2个强阳性克隆的噬菌体感染大肠杆菌HB2 15 1,用于表达可溶性ScFv。经点印迹和Western印迹对可溶性ScFv进行鉴定 ,经ELISA检测可溶性ScFv的抗原结合活性。结果 所获得的VH、VL和ScFvDNA分别约为 340、32 0和 75 0bp。对重组噬菌体经 2轮亲和筛选后 ,经ELISA从 2 5个克隆中筛检出 10个抗原阳性克隆。源于 2个强阳性克隆的可溶性ScFv的分子质量为32 0 0 0u ,且浓集于细菌周质腔中 ,可溶性ScFv具有抗原结合活性 ,其结合位点与亲本单抗MC5相同。结论 针对MC5的具功能活性的可溶性ScFv的成功制备 ,为人结肠癌的体外 (乃至体内 )
- 何凤田郑英如高会广陈姗李蓉芬江渝彭家和钟小林
- 关键词：大肠杆菌可溶性表达结肠癌噬菌体呈现
- 内毒素诱导小鼠β-防御素-3(mBD3)基因急性时相表达与肝脏损伤的关系
- 2005年
- 目的 :探讨急性时相反应时 β -防御素基因表达与内毒素性肝损伤的关系。 方法 :小鼠腹腔注射内毒素建立急性时相反应 ,经Northern -blot检测各组织中mBD3mRNA及表达的剂 -效、时 -效关系。结果 :仅在肝脏组织中检测到mBD3mRNA。内毒素诱导mBD3mRNA在肝脏中的表达存在最小诱导剂量。以最小诱导剂量 (1.5 μg/g)注射后 6h才出现mBD3mRNA的表达 ,8～ 10h达峰值 ,12h后表达水平下降。不同剂量内毒素注射后不同时间引起肝脏组织出现不同程度的炎性反应。结论 :mBD3基因在肝脏中的急性时相表达与内毒素引起的肝脏组织炎性反应有关。
- 杨卫华周建新王燕宁钟小林卢媛廖荣霞
- 关键词：Β-防御素急性时相反应内毒素
- 病例教学法在生物化学教学中的评价被引量：23
- 2001年
- 第三军医大学近年在临床医学、预防医学和检验医学等不同专业五年制本科的生物化学教学中进行了病例教学法尝试和探索。通过200名学生的问卷调查，结果表明：绝大多数学生认为病例教学能激发学习兴趣，提高能力，并能引导将生化理论与临床问题相联系；约有65％的学生认为病例教学不能提高学习效率。进一步分析发现，上述结果在不同专业的五年制学生之间没有明显差异。
- 江渝钟小林康运生许霖水周长保叶治家何凤田
- 关键词：病例教学法生物化学教学问卷调查
- Grb2在MCF-7乳腺癌细胞中的核定位研究被引量：1
- 2004年
- 目的 构建Grb2的红色荧光蛋白融合表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,并观察Grb2在MCF 7乳腺癌细胞的核定位情况。方法 用PCR方法扩增Grb2cDNA ,与红色荧光蛋白表达质粒pDsRed1 C重组构建融合蛋白表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,酶切、测序鉴定后 ,瞬时转染MCF 7乳腺癌细胞株 ,用荧光显微镜观察Grb2的核定位情况。结果 pDsRed1 C/Grb2质粒有正确的阅读框 ,融合表达蛋白DsRed1 C/Grb2可定位于MCF 7乳腺癌细胞核内。结论 成功构建了Grb2的红色荧光蛋白融合表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,在MCF 7乳腺癌细胞株中 ,Grb2除存在于胞浆外 ,也可定位于细胞核内 ,可能与其参与核内基因的转录调控有关。
- 陈敏陈彬李渝萍陈健李强钟小林周度金
- 关键词：乳腺癌细胞株胞浆红色荧光蛋白
