闵丹丹
- 作品数：10 被引量：40H指数：4
- 供职机构：广西药用植物园更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西药用植物园青年基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- HPLC测定假蒟中的α-细辛脑及其含量的动态积累被引量：2
- 2013年
- 目的采用HPLC法测定假蒟中α-细辛脑的含量,观察其动态积累变化。方法色谱柱为phenomenex ODS2柱(250mm×4.60 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(49∶51),流速1.0 mL.min-1,检测波长313 nm,柱温30℃。结果α-细辛脑0.0975～1.9500μg与峰面积的线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为101.59%(RSD=2.10%,n=6)。结论所用方法简便、快捷、重复性好,可作为假蒟药材中α-细辛脑的含量测定方法。
- 马雯芳余娇蔡毅闵丹丹
- 关键词：Α-细辛脑HPLC
- 三七萜类骨架生物合成途径关键酶ispG和GGPPS基因的克隆和表达分析
- 目的:根据前期三七转录组测序结果筛选出位于三七萜类骨架生物合成途径中的关键酶香叶基香叶基焦磷酸合酶(GGPPS)及4-羟基-3-甲基-2-烯基二磷酸合酶(ispG)，克隆得到GGPPS和ispG基因的全长序列信息，初步分...
- 闵丹丹
- 关键词：萜类化合物生物合成转录组测序原核表达载体
- 文献传递
- 山豆根根瘤菌的生物学特性及其不同菌株对山豆根幼苗药用有效成分的影响被引量：6
- 2017年
- 对采自广西不同地点的山豆根根瘤菌进行生物学特性研究,并将其分别接种在盆栽山豆根幼苗上,室内培养180 d后,测定植株药用有效成分苦参碱、氧化苦参碱含量。结果表明,山豆根根瘤菌为快生型根瘤菌,在YMA培养基上代谢产酸,大部分菌株的生长温度范围为25~35℃,酸碱耐受范围为pH值6.0~10.0,对抗生素卡那霉素(Km)、庆大霉素(Gm)敏感;不同来源的根瘤菌对山豆根药用有效成分积累的影响不同,与其他菌株相比,来自靖西县的2株菌JX2、JX3对苦参碱、氧化苦参碱的影响达到了显著水平。
- 唐美琼闵丹丹李刚李林轩
- 关键词：山豆根根瘤菌生物学特性
- 三七GGPPS基因CDS序列克隆及原核表达被引量：1
- 2018年
- 目的为研究GGPPS基因在三七中的功能,从三七中克隆GGPPS基因CDS序列,并进行原核表达。方法以3年生三七叶组织为材料,依据Genbank中已报道的GGPPS基因序列设计引物,利用RT-PCR技术,克隆得到编码区序列;克隆片段连接到p ET-30α(+)表达载体,转入大肠杆菌BL21后,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下进行表达。结果三七GGPPS基因CDS序列全长1 032 bp,编码343个氨基酸。SDS-PAGE结果表明,所构建的原核表达载体表达的融合蛋白大小在29 000~44 000,且表达产物主要以不溶性包涵体形式存在。结论成功克隆了三七GGPPS基因CDS序列,建立了稳定的原核表达体系,为进一步研究其在三七中的生物学功能奠定了基础。
- 唐美琼闵丹丹赵以民赵以民胡营
- 关键词：CDS克隆原核表达
- 三七RNase-like基因的克隆及表达分析被引量：1
- 2014年
- 采用同源序列克隆法,结合RACE技术,从三七[Panax notoginseng(Burk.)F.H]根茎总RNA中克隆次生代谢相关差异表达RNase-like贮藏蛋白的编码序列,并进一步以DNA为模板扩增全长基因,获得一条开放阅读框为717 bp的cDNA序列,命名为PMP(GenBank,KC751542),相应基因全长1 074bp。序列及其进化分析表明,该基因包含3个外显子和2个内含子,编码238个氨基酸,相应蛋白质的分子量为27.47 kD,含有核苷酸结合的保守区域,属于RNase-T2超家族成员。三七PMP蛋白与人参RNase-like贮藏蛋白高度同源,序列相似性达95%。实时荧光定量PCR研究表明,三七PMP基因在其根、茎、叶、花等器官中均有表达,且3年生根中表达量最高,暗示该基因可能参与三七皂苷次生代谢调控及其品质形成。
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- 关键词：克隆
- 不同干燥方法对假蒟挥发油成分影响的研究被引量：10
- 2013年
- 目的分析不同干燥方法对假蒟挥发油成分的影响。方法采用水蒸气蒸馏法提取假蒟挥发油,并采用GC-MS法分析3种干燥方法假蒟挥发油中的化学成分。结果新鲜、晒干、阴干的假蒟挥发油平均得油率(V/m)分别为0.06%、0.09%、0.15%,阴干处理的假蒟挥发油中α-细辛脑含有量最高。结论阴干处理方式最适用于假蒟的干燥加工。
- 马雯芳余娇邓慧连闵丹丹蔡毅
- 关键词：挥发油GC-MS
- 应用根瘤菌提高山豆根有效药用成分含量的方法
- 本发明公开了一种应用根瘤菌提高山豆根有效药用成分含量的方法，包括以下步骤：将根瘤菌菌液分布于山豆根植株的根系周围，之后将山豆根植株于日间25～30℃、夜间20～25℃、光强2500～3500lx条件下培养160～190天...
- 唐美琼闵丹丹李刚李林轩
- 文献传递
- 三七香叶基香叶基焦磷酸合酶基因的克隆及表达分析被引量：9
- 2015年
- 基于三七转录组测序结果,选择萜类代谢骨架上香叶基香叶基焦磷酸合酶基因(GGPPS),结合RACE技术,克隆得到全长1 203 bp的c DNA序列,最长开放阅读框为1 035 bp,命名为Pn GGPPS,Gene Bank登录号为KM486564,Pn GGPPS基因全长2 370 bp,包含1个内含子和2个外显子,该基因编码344个氨基酸,与蓖麻Ricinus communis、丹参Salvia miltiorrhiza等植物GGPPS的同源性达到73%以上,具有富天冬氨酸区等多个结构域,属于类异戊二烯合成酶超家族。实时荧光定量PCR结果显示,Pn GGPPS在一至三年生三七的根、茎、叶和三年生的花等不同器官组织中均有表达,但以三年生叶中具有显著水平的高表达量,暗示其既具有调节三七生长发育的基本功能,也与三七叶绿素和类胡萝卜素的合成、叶绿体的发育、阴生适应性,以及品质的形成有关。
- 闵丹丹唐美琼李刚屈啸声缪剑华
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 小花山小橘叶及茎化学成分初步研究被引量：3
- 2013年
- 目的采用系统预试法对小花山小橘叶及茎可能的化学成分进行预实验,初步探索小花山小橘叶及茎的化学成分。方法采用试管反应法、纸反应法,对小花山小橘叶及茎水、95%乙醇、石油醚提取物进行研究,通过多种指示剂和显色剂的颜色反应或沉淀反应,对小花山小橘叶及茎可能含有的化学成分进行初步研究。结果小花山小橘叶及茎可能含有氨基酸、多肽、蛋白质、糖、多糖、苷类、酚类、鞣质、有机酸、黄酮、内酯、香豆素、甾体、三萜类、挥发油等化学成分。结论初步确定小花山小橘叶及茎含有多种化学成分,为小花山小橘叶及茎的进一步开发利用提供了实验基础。
- 马雯芳蔡少芳赵芯芝闵丹丹甄汉深
- 关键词：化学成分
- 三七病程相关蛋白PR10-1基因克隆及功能初步分析被引量：10
- 2015年
- 采用同源克隆法和RACE技术相结合,对三七根部蛋白质组差异进行研究,鉴定PR10-1蛋白相应的基因全长c DNA,初步分析该基因在三七中的功能。测序结果显示该基因序列全长863 bp,包含1个序列长465 bp编码155个氨基酸的开放阅读框,命名为Pn PR10-1,Gen Bank登录号KJ741402。氨基酸序列同源性及系统发育树分析发现,Pn PR10-1与人参的PR10-1蛋白同源性最高,含有Bet-v-I家族等多个保守结构域。实时荧光定量PCR分析显示,Pn PR10-1在1~3年生三七各组织中均有本底表达,暗示其参与生长发育、代谢调控等生物学过程;Pn PR10-1在根部受根腐病原菌（Fusarium oxysporum）胁迫上调表达,推测Pn PR10-1基因可能参与抗三七根腐病等广谱抗病防御反应。
- 唐美琼闵丹丹李刚蒋妮叶云峰
- 关键词：病程相关蛋白基因克隆防御反应
