陈云峰
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：徐州医学院附属医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 瘦素对大鼠气道平滑肌β_2肾上腺素能受体表达的影响被引量：2
- 2014年
- 目的观察瘦素(LP)对大鼠气道平滑肌细胞β2肾上腺素能受体(β2-AR)表达的影响,探讨LP参与哮喘发病的机制。方法组织贴块法原代培养大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs),随机分为空白对照组(A组),LP 50 ng/L组(B组),LP 100 ng/L组(C组),LP 200 ng/L组(D组)及LP拮抗剂组(LP 200 ng/L+LP拮抗剂200 ng/L)(E组)分别干预24 h,采用Western印迹法及实时荧光半定量RT-PCR测瘦素受体(Ob-R)及β2-AR的表达。结果与A组相比,B、C、D组Ob-R表达明显升高,而β2-AR表达下降,证实LP可以上调Ob-R的表达并抑制β2-AR的表达;E组Ob-R表达较B、C、D组下降(P<0.05),与A组相比(P>0.05);E组β2-AR表达较B、C、D组升高(P<0.05),与A组相比(P>0.05)。结论 LP呈浓度依赖抑制大鼠气道平滑肌细胞β2-AR的表达。
- 陈云峰朱述阳刘向群刘文静吴瑕倪文静
- 关键词：瘦素气道平滑肌肾上腺素能受体
- 噻托溴铵抑制瘦素促大鼠气道平滑肌细胞的增殖被引量：2
- 2013年
- 目的探讨噻托溴铵对瘦素促大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的作用。方法体外培养大鼠ASMCs,瘦素(100μg/L)干预后,加入不同浓度噻托溴铵(μg/L)(15、30、60和120),CCK-8法测定ASMCs增殖,荧光实时定量RT-PCR及免疫印迹(Western blot)分别检测瘦素受体mRNA及蛋白含量水平表达。结果与对照组比较,瘦素可明显促进大鼠ASMCs增殖(P<0.05),加入噻托溴铵则抑制瘦素的促增殖作用(P<0.05),并与浓度相关(P<0.01)。瘦素作用后,其受体mRNA表达增加,蛋白含量由对照组的0.327±0.011升至0.541±0.016(P<0.05);噻托溴铵干预后,瘦素受体mRNA表达减少,蛋白含量分别回降至(0.514±0.017、0.468±0.025、0.331±0.023、0.313±0.017)(P<0.05);并与浓度相关(P<0.01)。结论噻托溴铵可抑制瘦素的促ASMCs增殖作用,其机制可能与下调大鼠ASMCs表面的瘦素受体表达有关。
- 吴瑕朱述阳郑玉龙刘文静陈云峰倪文静赵玲
- 关键词：噻托溴铵瘦素瘦素受体气道平滑肌
- 硝苯地平对哮喘小鼠肺组织过氧化物酶体增殖物激活受体-γ和脂联素受体表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨硝苯地平对哮喘小鼠肺组织过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和脂联素受体(AdipoRs)表达的影响及可能机制。方法:小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)和硝苯地平干预组(C组)、硝苯地平联合PPAR-γ抑制剂GW9662干预组(D组),每组6只。建立哮喘模型并收集肺泡灌洗液(BALF),检测BALF中细胞计数及分类,实时荧光定量PCR和Westernblot方法检测肺组织PPAR-γ和AdipoRs的表达。结果:与A组比较,B组气道炎症细胞数增多,PPAR-γ表达增加,AdipoRs表达下降(均P<0.05)。C组较B组炎症细胞数下降,PPAR-γ表达增加,AdipoRs表达增加(均P<0.05)。D组炎症细胞数较C组升高,肺组织几乎无PPAR-γ表达,AdipoRs表达水平减少(均P<0.05)。结论:硝苯地平可通过上调PPAR-γ表达,增加AdipoRs的表达,减少炎症细胞的浸润,抑制气道炎症。
- 赵玲朱述阳陈玉玲陈碧刘文静吴瑕陈云峰
- 关键词：哮喘过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ脂联素受体硝苯地平
- 瘦素对大鼠气道平滑肌细胞凋亡的影响
- 2012年
- 目的探讨瘦素对大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)凋亡的影响。方法体外培养大鼠ASMCs。Western blot法测定ASMCs上瘦素受体的表达。不同浓度(0、20、40、60、80、100μg/mL)的瘦素及100μg/mL瘦素+BY-0961Rleptin receptor(L)干预培养的大鼠ASMCs 48h后,Annexin V-FITC/PC测定细胞凋亡率,Western blot法测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)和B细胞淋巴瘤/白血病-xl(Bcl-xl)蛋白表达。结果 ASMCs上有瘦素受体的表达;细胞的凋亡率与瘦素浓度呈负相关;瘦素对ASMCs抗凋亡作用与浓度呈正相关,caspase-3表达减少,Bcl-xl表达增加。结论大鼠ASMCs表面有瘦素受体的表达。瘦素可以抑制体外培养的大鼠ASMCs的凋亡,且这种作用呈浓度依赖性。
- 倪文静朱述阳刘文静吴瑕陈云峰赵玲
- 关键词：瘦素肌细胞平滑肌细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
- 瘦素通过PI3K／Akt通路对大鼠气道平滑肌细胞凋亡的影响被引量：8
- 2012年
- 目的观察瘦素对大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）蛋白激酶-B（Akt）、磷酸化蛋白激酶-B（Pho-Akt）、B细胞淋巴瘤／白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酰蛋白酶．3（caspase-3）的表达及细胞凋亡的影响，探讨瘦素影响ASMC凋亡的可能机制。方法体外培养大鼠ASMC，按随机数字表法分为空白对照组、瘦素50μg/L组（Lep50组）、瘦素100μg/L组（Lep100组）、瘦素200μg/L组（Lep200组）及瘦素200μg/L＋LY294002组[1-磷脂酰肌醇3．激酶（P13K）抑制剂组]。各组均孵育24h后用Annexin-V／PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡率，WesternblotOn,0定Akt、Pho-Akt、Bcl-2、Bax和caspase-3的蛋白表达情况。结果Lep50组、Lep100组、Lep200组的细胞凋亡率分别为（3．97±0．39）％、（1．88±0．72）％和（0．77±0．11）％，均低于空白对照组的（7．38±0．49）％（F=89．57，P〈0．05），且各组细胞凋亡率与瘦素浓度呈负相关（r=-0．711，P〈0．05）；P13K抑制剂组凋亡率为（3．29±0．36）％，高于Lep200组（F=89．57，P〈0．01）。Westernblot结果显示随着瘦素浓度的升高Bel-2表达增加，且与浓度呈正相关（r=0．939，P〈0．05），Bax和easpase-3表达下降，与瘦素浓度成负相关（r值分别为-0．908和-0．961，均P〈0．05），Bcl-2／Bax比值增加（F=20．56，P〈0．05），Pho-Akt表达上调，且与瘦素浓度呈正相关（r=0．958，P〈0．05）；P13K抑制剂组较Lep200组Pho-Akt、Bcl-2表达下降（F值分别为32．93和19．48，均P〈0．05），Bax和caspase-3表达升高（F值分别为10．10和29．86，均P〈0．05），Bcl-2／Bax比值下降（F=20．56，P〈0．05）。结论瘦素可以抑制ASMC的凋亡，其机制可能与激活P13K／Akt通路有关。
- 刘文静朱述阳陈玉玲吴瑕倪文静陈云峰赵玲
- 关键词：瘦素肌细胞平滑肌细胞凋亡1-磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B
